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文檔簡介
1、Waters故障指南1目錄1色譜柱使用壽命27最理想的流速2保留時間變化28鍵和的碳鏈3保留時間漂移29pH緩沖4不同色譜柱和不同批次之間的重現(xiàn)性30流動相組分5樣品配制問題31柱子污染6峰形拖尾原因32方法驗證7正相色譜33糖類分析中的雙峰8系統(tǒng)體積,死體積,滯后體積34方法控制9梯度方法轉(zhuǎn)移35流動相pH10系統(tǒng)堵塞36改善信噪比11色譜柱塔板數(shù)37過載12柱壓38柱子的耐用性13峰面積變化39快速分析和柱壓14鬼峰40反沖柱子15
2、pH對保留時間的影響41選擇性的改變16柱平衡42新方法17柱改性43倒峰18復(fù)雜的樣品44麻煩,冗長乏味,費時19疏水坍塌45快速分析20基線噪音46LCMS的緩沖液21小孔柱47反相色譜中的堿性緩沖液22樣品溶液48柱后衍生23梯度比例49梯度滯留體積24柱子保存50緩沖能力25離子對色譜51流速的變化與定量關(guān)系26反相填料的水解穩(wěn)定性52極性物質(zhì)的分析Waters故障指南3的分析性能和保護作用。不要用大些的顆粒型號,大的顆?;蜓b填
3、不好的預(yù)柱會因譜帶擴展而導(dǎo)致分離效果變差。問:使用預(yù)柱聽起來不錯,還有其他方法嗎?答:還有其他一些方法,但是他們都有缺陷。我不提倡用那些可能溶解色譜柱頂端污染物的溶劑去沖洗柱子。很多情況下,這個方法是沒有作用的。例如,如果沉積在色譜柱頂端的污染物是蛋白質(zhì),你沖洗的時候他們已經(jīng)變性很久了,甚至可能交聯(lián)在一起,變得難以溶解。此外,通常色譜柱是處于水解平衡狀態(tài),而每次沖洗都會除掉水解鍵合相。因此,重復(fù)的沖洗柱子會加速柱子的老化。而且,沖洗后還
4、要用流動相平衡柱子,如果是做離子對色譜的話會消耗大量的時間。另一個經(jīng)常用的方法是反沖柱子。如果用和流動相不同的溶劑沖洗會產(chǎn)生和上面相同的問題。如果用流動相的話,需要很長的時間才能除去污染物,也有可能根本就沒作用。同時,反沖柱子會削弱柱子。盡管現(xiàn)在的裝填技術(shù)可以使柱子承受反沖,但是一般情況下不要采取這種做法。問:那么最好的建議就是使用預(yù)柱了?答:絕對是。預(yù)柱也沒那么貴一般隨品牌和型號的不同價格在10$50$之間,而他們所保護的柱子的價格是
5、預(yù)柱的10倍左右啊。而且他們還可以避免其他來源的污染物的,這些污染物更加難以發(fā)現(xiàn)。這些來源包括比如流動相中的灰塵,泵脫落的密封圈的碎片,或者從流動相吸附的污染物等等。其中有些難以對付,而保護柱就可以阻擋這些。問:還有其他縮短柱子使用壽命的原因嗎?答:有的,但是只要你按照生產(chǎn)商的說明使用柱子的話一般很少發(fā)生。有一個可能就是流動相pH超出使用范圍而導(dǎo)致的柱子坍塌。樣品用強酸或強堿溶解的話也會發(fā)生另外,一些特別的柱子有特別注意的地方例如氨基柱
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