人體解剖生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作-1016

1、人體解剖生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作,常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物的捉持動(dòng)物的秤重實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及編號(hào)的標(biāo)記方法動(dòng)物的麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法,常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,小鼠在哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，由于小鼠體小，飼養(yǎng)管理方便，易于控制，生產(chǎn)繁殖快，研究最深，有明確的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，已擁有大量的近交系、突變系和封閉群，因此在各種實(shí)驗(yàn)研究中，用量最大，用途最多。,常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,大鼠白化型大鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中占據(jù)著重要的地位，

2、常用的大鼠近交品系有十幾個(gè)如ACI、BVF、F344、PA、M520、WAB、WAC、WKA、SD、RF等品系。常用的非近交的純種大鼠有7種，其中以Wistar大鼠用得最多，我國醫(yī)藥研究中應(yīng)用也比較廣泛。此種大鼠白色，相當(dāng)于小鼠的瑞士（Swiss）種。,常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,豚鼠豚鼠對(duì)某些藥物極為敏感，因此它是研究這些藥物的“專門動(dòng)物”。例如豚鼠對(duì)組織胺極敏感，所以很適合作平喘藥和抗組織胺藥的研究；豚鼠對(duì)人型結(jié)核桿菌具有高度的敏感性，因此常

3、用作抗結(jié)核病藥物的藥理學(xué)研究。,常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,家兔家兔體小力弱、膽小怕驚、怕熱、怕潮，喜歡安靜、清潔、干燥、涼爽的環(huán)境，不能忍受污穢的條件。家兔對(duì)體溫變化十分靈敏。最易產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng)，而且發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定。小鼠、大鼠和豚鼠恒溫機(jī)能差。對(duì)發(fā)熱刺激的反應(yīng)低。有時(shí)熱原性物質(zhì)的刺激時(shí)。體溫反應(yīng)下降。,常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,犬犬在各個(gè)方面的研究，如心血管外科、腦外廣泛用于實(shí)驗(yàn)外科科、斷肢再植、器官或組織移植等中都比較常用。犬是目前基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究和教

4、學(xué)中最常用的動(dòng)物之一，尤其在生理、藥理、病理生理等實(shí)驗(yàn)研究中起著重要作用。,,動(dòng)物的麻醉,揮發(fā)性麻醉藥,乙醚乙醚麻醉的優(yōu)點(diǎn)：深度易于掌握，比較安全，麻醉后恢復(fù)比較快。缺點(diǎn)：需要專人管理，麻醉初期出現(xiàn)強(qiáng)烈的興奮現(xiàn)象，對(duì)呼吸道有較強(qiáng)的刺激性，需在麻醉前給一定量的嗎啡和阿托品（基礎(chǔ)麻醉）。,非揮發(fā)性麻醉藥,苯巴比妥鈉戊巴比妥鈉氨基甲酸乙酯水合氯醛,,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法,皮下注射皮內(nèi)注射腹腔注射肌肉注射靜脈注射灌胃給藥法,實(shí)

5、驗(yàn)動(dòng)物的取血方法,尾靜脈眼眶動(dòng)脈和靜脈后眼眶靜脈叢連續(xù)穿刺斷頭心臟頸靜脈耳緣靜脈,,大/小鼠解剖,血液凝固,【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹勘緦?shí)驗(yàn)采用兔頸總動(dòng)脈放血，通過測(cè)定各種條件下的血液凝固時(shí)間，了解影響血液凝固的一些因素?！緦?shí)驗(yàn)原理】血液凝固可分為內(nèi)源性凝血系統(tǒng)和外源性凝血系統(tǒng)。內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是指參與凝血過程的因子全部存在于血漿中，外源性凝血系統(tǒng)是指在組織因子參與的凝血過程?！緦?shí)驗(yàn)材料】家兔兔手術(shù)臺(tái)、哺乳動(dòng)物手術(shù)器、動(dòng)脈夾、細(xì)塑料

6、管、20毫升注射器、25%烏拉坦、試管8支、小燒杯2個(gè)，竹簽1支、冰塊、棉花，石蠟、肝素、草酸鉀、生理鹽水、肺組織浸液。,【實(shí)驗(yàn)方法】1、用烏拉坦將兔麻醉，仰臥固定于兔手術(shù)臺(tái)上，分離一側(cè)頸總動(dòng)脈，上端用線結(jié)扎阻斷血液，下端夾上動(dòng)脈夾，在動(dòng)脈當(dāng)中剪一小口，插入細(xì)塑料管，結(jié)扎插管備取備用。2、將下列試管準(zhǔn)備好試驗(yàn)用品后，每管加入血液2毫升。試管1 內(nèi)放少許棉花；試管2 用石蠟油潤滑整個(gè)內(nèi)表面試管3 不加任何處理試管4

7、 置于有冰塊的小燒杯中試管5 內(nèi)加肝素8單位試管6 內(nèi)加草酸鉀1-2毫克將多余的血盛于小燒杯中，不斷用竹簽攪動(dòng)直至纖維蛋白形成3、記錄凝血時(shí)間：每個(gè)試管加血2毫升后，即可開始計(jì)時(shí)，每隔15秒，將試管傾斜一次，觀察血液是否凝固。至血液成為凝膠狀不再流動(dòng)為止，幾下所經(jīng)時(shí)間即凝血時(shí)。另一燒杯內(nèi)加入血液后立即用竹簽攪動(dòng)，去除纖維蛋白。5、6號(hào)試管，加入血液后，用拇指蓋住試管口將管顛倒兩次。,將結(jié)果及在各條件下的凝血時(shí)間按表1填寫

8、，并進(jìn)行解釋表1 各條件下凝血時(shí)間,血紅蛋白含量的測(cè)定,【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆毡壬y(cè)定血紅蛋白含量的方法?！緦?shí)驗(yàn)原理】測(cè)定血紅蛋白含量的方法很多，實(shí)驗(yàn)常用比色法。其原理是在一定量的血液中，血紅蛋白經(jīng)少量鹽酸的作用，使亞鐵血紅素變成高鐵血紅素，呈現(xiàn)較穩(wěn)定的棕色。用水稀釋后與標(biāo)準(zhǔn)色比較，求出每100ml 血液中所含的血紅蛋白克數(shù)。正常成年男子每100ml 血液平均含14.4g，女子為13.1?！緦?shí)驗(yàn)材料】兔血，沙利氏血紅蛋白計(jì)一套，采血

9、針，玻璃棒，滴管，75%酒精，95%酒精，棉球，蒸餾水，乙醚，0.1N鹽酸,【實(shí)驗(yàn)方法】1．血紅蛋白計(jì)包括①標(biāo)準(zhǔn)比色架，架的兩側(cè)鑲有兩個(gè)棕色標(biāo)準(zhǔn)玻璃色柱。②血紅蛋白稀釋管，有方形也有圓形的。兩側(cè)有刻度，一側(cè)以g 為計(jì)數(shù)單位，對(duì)側(cè)以百分率計(jì)。2．用滴管加0.1mol/LHCl 于血紅蛋白稀釋管內(nèi)，到刻度10 處。3．用血紅蛋白吸管的尖端吸上個(gè)實(shí)驗(yàn)中燒杯中的血，吸血至刻度20mm3 處（0.02ml）。4．用濾紙片或棉球擦凈吸管口周

10、圍的血液，將吸管插入血紅蛋白稀釋管的鹽酸內(nèi)，輕輕吹出血液至管底部，反復(fù)吸入并吹出稀釋管內(nèi)上層的鹽酸，洗滌吸管多次，使吸管內(nèi)的血液完全洗入稀釋管內(nèi)。搖勻或用小玻璃棒攪勻后，放置10min，使鹽酸與血紅蛋白充分作用。5．把稀釋管插入標(biāo)準(zhǔn)比色架兩色柱中央的空格中，使無刻度的兩側(cè)面位于空格的前后方，便于透光和比色。6．用滴管向稀釋管內(nèi)逐滴加入蒸餾水（每加一滴要攪拌），邊滴邊觀察顏色，直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)玻璃色柱相同為止。稀釋管上液面的刻度讀數(shù)即為

11、每100ml 血液血紅蛋白的克數(shù)。,家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)、體液調(diào)節(jié),【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?．掌握測(cè)定動(dòng)脈血壓直接法及動(dòng)脈插管方法。2．了解溫血?jiǎng)游锏穆樽?、固定及手術(shù)方法。 3．觀察心血管活動(dòng)的某些影響因素?！緦?shí)驗(yàn)原理】心臟受交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)支配。心交感神經(jīng)興奮，對(duì)心臟產(chǎn)生正性變時(shí)、變力、變傳導(dǎo)作用，從而使心輸出量增加。心迷走神經(jīng)興奮，對(duì)心臟產(chǎn)生負(fù)性變時(shí)、變力、變傳導(dǎo)作用，從而使心輸出量減少。支配血管的植物神經(jīng)主要是交感縮血管神經(jīng)

12、，其興奮時(shí)主要引起縮血管效應(yīng)，外周阻力增加。中樞通過反射活動(dòng)調(diào)節(jié)心血管的活動(dòng)，改變心輸出量及外周阻力，從而調(diào)節(jié)動(dòng)脈血壓。心血管活動(dòng)尚受體液因素的調(diào)節(jié)。其中主要有腎上腺素和去甲腎上腺素。本實(shí)驗(yàn)是以動(dòng)脈血壓為指標(biāo)，在整體條件下，施加某些因素，觀察神經(jīng)、體液因素對(duì)心、血管的調(diào)節(jié)作用?！緦?shí)驗(yàn)材料】家兔多道生理記錄儀、血壓換能器、動(dòng)脈插管、三通管。兔手術(shù)臺(tái)、哺乳類手術(shù)器破、注射器、有色絲線、紗布、棉花。25％氨基甲酸乙酯、1％肝素。生理鹽水

13、、l／萬去甲腎上腺素。,【實(shí)驗(yàn)方法】1. 麻醉和動(dòng)物固定：兔稱重后，按1g／kg體重的劑量由兔耳緣靜脈緩慢注入25％氨基甲酸乙酯溶液將動(dòng)物麻醉。注射過程中注意觀察動(dòng)物的肌張力、呼吸頻率及角膜反射的變化，防止麻醉過深。麻醉好的動(dòng)物仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上，注意頸部必須放正拉直。2. 分離頸部血管和神經(jīng)：用彎剪刀剪去頸部的毛，作長5—7厘米的正中切口，鈍性分離皮下組織和肌肉，即可見到氣管，將氣管兩旁的肌肉拉開，便可在氣管兩側(cè)的深部找到頸動(dòng)脈鞘

14、，內(nèi)有頸總動(dòng)脈、迷走神經(jīng)、減壓神經(jīng)和交感神經(jīng)。仔細(xì)辨認(rèn)并小心分離，在左側(cè)減壓神經(jīng)和交感神經(jīng)下穿不同顏色濕絲線備用．然后分離雙側(cè)的迷走神經(jīng)和頸總動(dòng)脈，穿線備用。 3. 動(dòng)脈插管：分離右側(cè)頸總動(dòng)脈3厘米左右，近心端用動(dòng)脈夾夾閉，遠(yuǎn)心端用線結(jié)扎．耳緣靜脈注入肝素1ml，然后在結(jié)扎的近端剪一斜口，向心臟方向插入動(dòng)脈插管，用線將插管與動(dòng)脈扎緊，防止滑脫。放開動(dòng)脈夾，記錄動(dòng)脈血壓。,觀察項(xiàng)目 1、觀察正常血壓曲線。2、用動(dòng)脈夾夾閉左

15、側(cè)頸總動(dòng)脈5—10秒，觀察血壓變化。3、刺激減壓神經(jīng)：以中等強(qiáng)度，頻率為10-15次/秒，波寬2毫米的連續(xù)電脈沖。刺激一次減壓神經(jīng)，觀察血壓有何變化？然后用兩根絲線在該神經(jīng)中部兩處接扎，并在兩結(jié)扎間將神經(jīng)切斷，分別刺激切斷后的神經(jīng)中樞端和外周端，觀察對(duì)血壓影響有何不同？4、刺激迷走神經(jīng)：結(jié)扎并剪斷雙側(cè)迷走神經(jīng)，觀察血壓變化．刺激右側(cè)外周端，觀察血壓變化。5、靜脈注射去甲腎上腺素：由耳緣靜脈注入1／萬去甲腎上腺素0.3 ml，觀察血

16、壓變化。6、刺激交感神經(jīng)：結(jié)扎并剪斷左側(cè)交感神經(jīng)，觀察左側(cè)耳都血管的變化，然后用中等強(qiáng)度電流連續(xù)刺激其頭端，觀察左側(cè)耳部血管變化。,尿生成的影響因素,【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?．學(xué)習(xí)輸尿管插管技術(shù)。2．觀察影響尿量的幾種因素。【實(shí)驗(yàn)原理】尿的生成過程包括：腎小球的過濾作用；腎小管與集合管的重吸收作用；腎小管與集合管的分泌作用。在整體內(nèi)，這3個(gè)過程往往受到生理性的調(diào)節(jié)。凡影響這些過程的因素，都可影響尿的生成而引起尿量的改變。【實(shí)驗(yàn)材料】

17、家兔、手術(shù)臺(tái)、常用手術(shù)器械、或細(xì)塑料管、、刻度試管、2ml及20ml注射器、25%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注射液、生理鹽水、垂體后葉素（5單位/ml）,【實(shí)驗(yàn)方法】1.麻醉：家兔一只，用25%氨基甲酸乙酯（1g/kg）耳緣靜脈注射，麻醉后，仰位固定于手術(shù)臺(tái)上。2.插管：導(dǎo)尿管直接由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的尿道插入，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)選擇雄性，插導(dǎo)尿管時(shí)用液體石蠟浸潤后順尿道輕輕插入膀胱。插管是若遇阻力，不可強(qiáng)插，應(yīng)拔出重插。依次進(jìn)行下列項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)。

18、注意：每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)前都要記錄尿量作為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)觀察待尿流量穩(wěn)定后，即可進(jìn)行下列各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)觀察。每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，都應(yīng)先記錄一段尿量曲線作為對(duì)照；然后進(jìn)行注射或刺激，并連續(xù)記錄和觀察至效應(yīng)明顯和恢復(fù)過程。（組間對(duì)照、自身前后對(duì)照）（1）自耳緣靜脈注射的生理鹽水20ml，觀察尿量的變化。（2）自耳緣靜脈注射20%葡萄糖液15ml，觀察其變化。（3）自耳緣靜脈注射垂體后葉素0.2ml，觀察和記錄其變化20min。 (4) 自耳緣靜脈注射呋

19、塞米0.2ml ，觀察和記錄其變化20min。結(jié)果：記錄兔尿量并觀察其變化。,小白鼠破壞小腦引起的共濟(jì)失調(diào),【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹恳粋?cè)小腦損傷后的動(dòng)物，軀體運(yùn)動(dòng)表現(xiàn)異常，通過對(duì)異常運(yùn)動(dòng)的觀察，了解小腦的機(jī)能。【實(shí)驗(yàn)原理】小腦具有維持身體平衡，調(diào)節(jié)肌緊張和協(xié)調(diào)肌肉運(yùn)動(dòng)等機(jī)能。當(dāng)小腦損傷后，隨著破壞程度的不同，可表現(xiàn)出不同程度的肌緊張失調(diào)及平衡失調(diào)。絨球小結(jié)葉——古小腦——前庭小腦——調(diào)節(jié)肌緊張，維持身體平衡小腦前葉——舊小腦——脊髓小腦

20、——控制肌肉的張力和協(xié)調(diào)小腦后葉——新小腦——大腦小腦——影響運(yùn)動(dòng)的起始、計(jì)劃和協(xié)調(diào)，包括確定運(yùn)動(dòng)的力量、方向和范圍,【實(shí)驗(yàn)材料】 小白鼠4只、探針?！緦?shí)驗(yàn)方法】1.觀察正常小鼠的活動(dòng)情況。2.用探針破壞某一側(cè)小腦，切勿損傷中腦，然后迅速取出探針。3.放開縛線觀察小白鼠的活動(dòng)情況。4.根據(jù)切除小腦的小白鼠活動(dòng)情況討論小腦的功能。,血腦屏障通透性實(shí)驗(yàn),【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹孔C實(shí)血腦屏障的存在，血液中的細(xì)菌和某些藥物不易輕易進(jìn)入腦組織