血液腫瘤與檢測

1、淋巴造血系統(tǒng)腫瘤及檢測,概念： 在機體各種致瘤因素的作用下，局部組織的細胞在基因水平上失去對其生長的正常調(diào)控，與正常組織相比，其增生和分化異常，導(dǎo)致克隆性增生而形成的新生物，常形成腫塊。特性：1.獲得不斷增殖的能力→相對無限制性自主性生長；2.失去正常分化成熟的能力→異常的形態(tài)、代謝和功能。,腫瘤的概念,淋巴造血系統(tǒng)腫瘤？,,,,我國死亡率前十位惡性腫瘤,造血系統(tǒng)/組織,胚胎期（中胚葉造血期）：卵黃囊、肝、脾胎兒期（肝脾

2、造血期）：肝、脾、骨髓、胸腺、淋巴結(jié)出生后（骨髓造血期）：骨髓、淋巴結(jié)生成淋巴細胞和漿細胞,血細胞的發(fā)育與成熟,造血細胞的生長發(fā)育是一個連續(xù)不斷的復(fù)雜過程，造血器官內(nèi)的各種造血細胞，按一定的規(guī)律發(fā)育成為各種成熟的血細胞，然后釋放入血循環(huán)中。,造血干細胞的分化,淋巴造血系統(tǒng)腫瘤,骨髓增生異常綜合征（MDS）白血?。ˋML、ALL、CML、CLL）淋巴瘤 (HL、NHL)多發(fā)性骨髓瘤（MM）骨髓增生性疾?。∕PN）(CML、ET、

3、PV、PMF),骨髓增生異常綜合征（MDS）,骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndromes, MDS)是起源于造血干細胞的一組異質(zhì)性髓系克隆性疾病，特點是髓系細胞分化及發(fā)育異常，表現(xiàn)為無效造血、難治性血細胞減少、造血功能衰竭，高風險向急性髓系白血病（AML）轉(zhuǎn)化。,骨髓增生異常綜合征（MDS）,,白血病,白血病是一類造血干細胞惡性克隆性疾病?？寺⌒园籽〖毎驗樵鲋呈Э?、分化障礙、凋亡受阻等機制在骨髓和其他造血

4、組織中大量增殖累積，并浸潤其他組織和器官，同時正常造血受抑制。按白血病細胞的分化成熟程度及自然病程，可分為急、慢性白血病。按病變細胞系列分類，包括髓系的粒、單、紅、巨核系和淋巴系的T和B細胞系。臨床上常將白血病分為急性淋巴細胞白血?。ˋLL）、急性髓細胞白血?。ˋML）、慢性粒細胞白血?。–ML）、慢性淋巴細胞白血病等（CLL）。,白血?。╨eukemia）,,,急性白血病A,慢性白血病 C,,,淋巴系L,髓系M,淋巴瘤,淋巴瘤（

5、lymphoma）起源于淋巴結(jié)和淋巴組織，其發(fā)生大多與免疫應(yīng)答過程中淋巴細胞增殖分化產(chǎn)生的某種免疫細胞惡變有關(guān)，是免疫系統(tǒng)的惡性腫瘤。臨床上常按組織病理學(xué)改變將其分為非霍奇金淋巴瘤（NHL）和 霍奇金淋巴瘤（HL）兩類,淋巴瘤,,多發(fā)性骨髓瘤,多發(fā)性骨髓瘤（MM）是漿細胞惡性增殖的結(jié)果。其特征為骨髓漿細胞異常增生伴有單克隆免疫球蛋白（M蛋白）過度生成，極少數(shù)患者可以是不產(chǎn)生M蛋白的未分泌型MM。,漿細胞?。ǘ喟l(fā)性骨髓瘤）,,骨髓增生

6、性疾病,骨髓增生性疾病指分化相對成熟的一系或多系骨髓細胞不斷地克隆性增殖所致的一組腫瘤性疾病，也稱骨髓增殖性腫瘤（MPNs）。MPN可分為慢性粒細胞白血?。–ML），真性紅細胞增多癥（PV），原發(fā)性血小板增多癥（ET），原發(fā)性骨髓纖維化（PMF）。（是造血干細胞異常克隆而引起的成纖維細胞反應(yīng)性增生）,骨髓增生性疾病,,,急性白血病(AML、ALL)骨髓增生異常綜合征(MDS),慢性白血病(CML、CLL)淋巴瘤(HL、NHL)多

7、發(fā)性骨髓瘤(MM)骨髓增生性疾病(CML、PV、ET、PMF),,,,,淋巴造血系統(tǒng)腫瘤的檢測,淋巴造血系統(tǒng)腫瘤精確的診斷分型是正確選用化療方案的前提。目前國際上通用的是MICM分型。細胞形態(tài)學(xué)(Morphology)：骨髓穿刺、骨髓活檢免疫學(xué)(Immunology): 流式細胞術(shù)細胞遺傳學(xué)(Cytogenetics)：染色體核型分析分子生物學(xué)(Molecular) :FISH、突變分析（PCR、片段分析、基因測序）,細胞形態(tài)

8、學(xué)(Morphology),通過骨髓細胞學(xué)可以了解骨髓中各種細胞數(shù)量、細胞形態(tài)、有無異常細胞等，從而協(xié)助診斷疾病、療效觀察、判斷預(yù)后。,骨髓穿刺：采取骨髓液骨髓活檢：特制的穿刺針取一小塊骨髓組織,免疫學(xué)(Immunology),根據(jù)不同種類的細胞以及細胞在不同分化階段表達的抗原差異，通過免疫學(xué)方法識別抗原從而檢測細胞類型及數(shù)量。粒細胞成熟過程。,,流式細胞術(shù),利用細胞特異抗原，通過流式細胞儀對血細胞種類、數(shù)量等特征進行分析，從而協(xié)助

9、診斷疾病。,細胞遺傳學(xué)(Cytogenetics)：染色體核型分析,t(9;22)(q32;q23.2) in CML,分子生物學(xué)(Molecular),2R2G 陰性細胞,1R1G2F陽性細胞,FISH（熒光原位雜交技術(shù)）, 是利用熒光標記的特異核酸探針與細胞內(nèi)相應(yīng)的靶DNA分子或RNA分子雜交，檢測基因變異情況。BCR/ABL融合，典型的陽性細胞信號模式為1R1G2F，由于斷裂點位置不同,以及基因缺失，還可能出現(xiàn)其它陽性信號模式。

10、,分子生物學(xué)(Molecular),檢測方法： RQ-PCR, Sanger測序、二代基因測序、片段分析檢測項目： 融合基因篩查、基因表達檢測、基因序列突變檢測,定性分析做什么？融合基因篩查,怎么做？,,,定量分析做什么？融合基因基因表達,怎么做？,,,突變分析,Sanger測序,確定一條染色體片斷上的堿基順序。Sanger法：在PCR時加入熒光標記的復(fù)制終止劑，比如ddA,ddT,ddC,ddG（相應(yīng)

11、于4種堿基）ddX的兩個作用：可以當作正常堿基參與復(fù)制一旦鏈入DNA中，其后就不能再繼續(xù)連接它們具有共同的起始點，但終止在不同的的核苷酸上誰終止，堿基就是誰,SNE (TPMT分型),,,,片段分析,技術(shù)基礎(chǔ)：熒光標記的引物片段分析=分離熒光標記的片段并檢測其相對大小,淋巴造血系統(tǒng)腫瘤檢測,,MPN送檢診斷流程,總結(jié)：,1.發(fā)生：基因→增生和分化異常→數(shù)量及形態(tài)、代謝、功能的異常2.分類：3.檢測:MICM