生物化學(xué)實驗一 蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng)

1、實驗一實驗一蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng)蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng)一、目的要求驗證蛋白質(zhì)特性；學(xué)習(xí)和掌握蛋白質(zhì)呈色反應(yīng)的原理和方法；學(xué)習(xí)幾種常用的鑒定蛋白質(zhì)和氨基酸的方法。二、實驗原理蛋白質(zhì)中的某些化學(xué)鍵或氨基酸殘基中的某些化學(xué)基團(tuán)可以與某些特殊試劑形成特定的有色物質(zhì)。這些反應(yīng)稱為蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)。各種蛋白質(zhì)的氨基酸殘基不完全相同。因此，呈色反應(yīng)產(chǎn)物的顏色也不完全一樣。呈色反應(yīng)不是蛋白質(zhì)所特有，一些非蛋白物質(zhì)也能呈現(xiàn)類似的呈色反應(yīng)。因此，不能

2、僅以呈色反應(yīng)結(jié)果來判別被測物質(zhì)是否為蛋白質(zhì)。三、呈色反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)1.原理兩分子尿素經(jīng)加熱至180C后可以縮合成一分子雙縮脲，并放出一分子氨。雙縮脲在堿性溶液中與銅離子結(jié)合生成紫紅色絡(luò)合物，此反應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng)。多肽及所有蛋白質(zhì)均具有肽鍵，與雙縮脲分子中亞酰胺鍵結(jié)構(gòu)相同，也能發(fā)生此反應(yīng)，因此，蛋白質(zhì)在堿性溶液中與銅離子也能呈現(xiàn)出類似于雙縮脲的顏色反應(yīng)。2.器材與試劑1)器材試管、藥匙、電爐、試管夾、滴管。2)試劑〈1〉蛋白質(zhì)溶

3、液(10%卵清蛋白溶液)：吸取雞蛋清溶液10ml，加蒸餾水稀釋，定容至100ml?！?〉10%氫氧化鈉溶液?！?〉1%硫酸銅(CuSO4)溶液?！?〉0.1%甘氨酸(Gly)溶液：稱0.1g甘氨酸溶于蒸餾水中，稀釋至100ml?！?〉結(jié)晶尿素。3.實驗步驟雙縮脲反應(yīng)實驗1234尿素＋加熱后的尿素＋蛋白質(zhì)溶液滴30.1%Gly滴310%NaOH滴55551%CuSO4滴1111顯色現(xiàn)象試管試劑滴〈1〉卵清蛋白溶液100ml：與雙縮脲反應(yīng)相

4、同?！?〉10%氫氧化鈉溶液。〈3〉頭發(fā)?！?〉指甲?！?〉0.5%苯酚溶液?！?〉濃硝酸?！?〉0.3%色氨酸(Trp)溶液?！?〉0.3%酪氨酸(Tyr)溶液。3.實驗步驟與結(jié)果觀察取6支試管，按表加入試劑，觀察各管出現(xiàn)的現(xiàn)象，有的試管反應(yīng)慢，可置沸水浴加熱5min。蛋白質(zhì)的黃色反應(yīng)實驗123456材料滴蛋白質(zhì)溶液指甲頭發(fā)0.5%苯酚溶液0.3%色氨酸0.3%酪氨酸4少許少許444濃硝酸滴24040444現(xiàn)象試管試劑待各管出現(xiàn)黃色后