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1、微生物的生長(zhǎng)和環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響,第一節(jié) 微生物的生長(zhǎng),第二節(jié) 環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響,第三節(jié) 常用的滅菌方法,生物個(gè)體物質(zhì)有規(guī)律地、不可逆增加,導(dǎo)致個(gè)體體積擴(kuò)大的生物學(xué)過程。,生長(zhǎng):,生物個(gè)體生長(zhǎng)到一定階段,通過特定方式產(chǎn)生新的生命個(gè)體,即引起生命個(gè)體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。,繁殖:,生長(zhǎng)是一個(gè)逐步發(fā)生的量變過程;繁殖是一個(gè)產(chǎn)生新的生命個(gè)體的質(zhì)變過程。,生長(zhǎng)、繁殖就是保證微生物獲得巨大數(shù)量的必要前提沒有一定的數(shù)
2、量就等于沒有微生物的存在。,一個(gè)微生物細(xì)胞,,合適的外界條件,吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),進(jìn)行代謝。,,如果同化作用的速度超過了異化作用,個(gè)體的生長(zhǎng)原生質(zhì)的總量(重量、體積、大小)就不斷增加。,,如果各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L(zhǎng)時(shí),則達(dá)到一定程度后就會(huì)發(fā)生繁殖,引起個(gè)體數(shù)目的增加。,,群體內(nèi)各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng),,群體的生長(zhǎng),,一、細(xì)菌的個(gè)體生長(zhǎng)和同步生長(zhǎng),二、典型生長(zhǎng)曲線,第一節(jié) 微生物的生長(zhǎng),一、細(xì)菌的個(gè)體生長(zhǎng)和同步生長(zhǎng),要研究單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),
3、所發(fā)生的生物化學(xué)變化和細(xì)胞學(xué)變化,目前使用的方法:一是用電子顯微鏡觀察細(xì)菌細(xì)胞的超薄切片二是使用同步培養(yǎng)技術(shù),培養(yǎng)時(shí)間,獲得細(xì)菌同步生長(zhǎng)的方法主要有兩類:,① 通過環(huán)境條件來誘導(dǎo)同步性,,選擇性過濾梯度離心法硝酸纖維素濾膜法,,,溫度培養(yǎng)基成份控制其他:如光照和黑暗交替培養(yǎng),硝酸纖維素濾膜法是最經(jīng)典的獲得同步生長(zhǎng)的方法。,由于細(xì)胞的個(gè)體差異,同步生長(zhǎng)往往只能維持2-3個(gè)世代,隨后又逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)殡S機(jī)生長(zhǎng)。,②通過物理學(xué)方法從隨機(jī)
4、的、不同步細(xì)菌群體中選擇出同步的菌體,二、典型生長(zhǎng)曲線,生長(zhǎng)曲線:,把少量純種單細(xì)胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中后,在適宜的溫度、通氣(厭氧菌則不能通氣)等條件下,它們的群體就會(huì)有規(guī)律的生長(zhǎng)起來,以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值做縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),就可以畫出一條有規(guī)律的曲線,這就是微生物的生長(zhǎng)曲線。,細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線一般用菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)作圖。,影響延滯期長(zhǎng)短的因素很多,除菌種外,主要有三個(gè)。接種齡接種量培養(yǎng)基成分,延滯期出現(xiàn)的原
5、因:,微生物接種到新鮮培養(yǎng)液中,一時(shí)還缺乏分解或催化有關(guān)底物的酶,或是缺乏充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成有關(guān)中間代謝產(chǎn)物,就需要一段適應(yīng)期,于是出現(xiàn)了生長(zhǎng)的延滯期。,調(diào)整代謝,,在生產(chǎn)實(shí)踐中縮短延滯期的常用手段:,(1)通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使延滯期縮短;,(2)利用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞作為種子;,(3)盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大;,(4)適當(dāng)擴(kuò)大接種量;,影響微生物生長(zhǎng)的外界因素很多,除了營(yíng)養(yǎng)條件外,還
6、有許多物理?xiàng)l件。如溫度、水分、pH、氧氣等。,一、溫度,二、水分,三、氧氣,四、 pH,五、滲透壓,六、輻射,第二節(jié) 環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響,一、溫度,由于微生物的生命活動(dòng)是由一系列生物化學(xué)反應(yīng)組成的,而這些反應(yīng)受溫度的影響極為明顯。,溫度是影響微生物生長(zhǎng)的最重要的因素之一,最低生長(zhǎng)溫度(一般為-5~-10 ºC,極端為-30 ºC),最適生長(zhǎng)溫度,嗜冷菌(45ºC),最高生長(zhǎng)溫度(一般為80~
7、95 ºC,極端為105~300 ºC ),,生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn),,,,,,,低溫對(duì)微生物的影響,高溫對(duì)微生物的影響,微生物在冰凍溫度下,細(xì)胞內(nèi)的游離水形成冰晶體,對(duì)細(xì)胞膜與細(xì)胞壁有機(jī)械的物理刺傷作用,特別是游離水被冰凍,使細(xì)胞脫水濃縮引起細(xì)胞質(zhì)黏度增大,電解質(zhì)濃度增高,pH和膠體狀態(tài)發(fā)生改變,也可引起細(xì)胞質(zhì)內(nèi)蛋白質(zhì)部分變性等,甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。,高溫對(duì)微生物的致死作用主要因蛋白質(zhì)、核酸與酶系統(tǒng)等重要生物高分子的氫鍵受到
8、破壞,導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性;核酸發(fā)生降解變性失活;破壞細(xì)胞的組成;熱溶解細(xì)胞膜上類脂成分形成極小的孔,使細(xì)胞內(nèi)容物泄漏,從而導(dǎo)致死亡。,二、水分 水分是微生物生命活動(dòng)的必要條件。不同微生物生長(zhǎng)的最低Aw值有較大差異。,多數(shù)細(xì)菌: 最低Aw0.90,范圍0.90~0.99,多數(shù)酵母菌:最低Aw0.87,范圍0.87~0.91,多數(shù)霉菌:最低Aw0.80,范圍0.80~0.87,,三、氧氣 氧對(duì)微生物的生命活
9、動(dòng)有著極其重要的影響。,好氧菌厭氧菌,專性好氧菌:在分子氧存在下進(jìn)行好氧呼吸產(chǎn)能兼性厭氧菌微好氧菌:只能在0.01~0.03Pa的大氣壓下生活,以呼吸為主,兼營(yíng)發(fā)酵產(chǎn)能以呼吸為主,兼營(yíng)厭氧呼吸產(chǎn)能,,耐氧菌:只能以發(fā)酵產(chǎn)能,但分子氧無害專性厭氧菌:只能生長(zhǎng)在無氧或基本無氧條件下,氧劇毒,,,,微生物與氧的關(guān)系,(一)專性好氧菌 必須在有分子氧的條件下才能生長(zhǎng),有完整的呼吸鏈,以分子氧作為最終氫受體,細(xì)胞
10、含超氧化物歧化酶和過氧化氫酶。,絕大多數(shù)真菌和許多細(xì)菌都是專性好氧菌,(二)兼性厭氧菌 在有氧或無氧條件下均能生長(zhǎng),但在有氧情況下生長(zhǎng)得更好;在有氧時(shí)靠呼吸產(chǎn)能,無氧時(shí)借發(fā)酵或無氧呼吸產(chǎn)能;細(xì)胞含超氧化物歧化酶和過氧化氫酶;,許多酵母菌和許多細(xì)菌都是兼性厭氧菌,(三)微好氧菌 只能在較低的氧分壓下才能生長(zhǎng)的微生物。也通過呼吸鏈并以氧為最終氫受體而產(chǎn)能。,例如:霍亂弧菌、一些氫單胞菌屬、發(fā)酵單胞菌屬等
11、,一類可在分子氧存在下進(jìn)行厭氧生活的厭氧菌,即它們的生長(zhǎng)不需要氧,分子氧對(duì)它們也無毒害。它們不具有呼吸鏈,僅依靠專性發(fā)酵獲得能量。細(xì)胞含超氧化物歧化酶和過氧化物酶。但缺乏過氧化氫酶。,一般的乳酸菌多數(shù)是耐氧菌,(四)耐氧菌,(五)專性厭氧菌 它有以下幾個(gè)特點(diǎn):分子氧對(duì)它們有毒,短期接觸也會(huì)抑制它們生長(zhǎng)甚至致死;只有在深層的無氧或低氧化還原勢(shì)的環(huán)境下才能生長(zhǎng);,生命活動(dòng)所需能量是通過發(fā)酵、無氧呼吸、循環(huán)光合磷酸化或甲烷發(fā)酵等提供
12、;細(xì)胞內(nèi)缺乏超氧化物歧化酶和細(xì)胞色素氧化酶;,各種光合細(xì)菌和 產(chǎn)甲烷菌等都屬于專性厭氧菌,專性厭氧菌因缺乏超氧化物歧化酶,故易被生物體內(nèi)極易產(chǎn)生的超氧物陰離子自由基而毒害致死。,大多數(shù)缺乏過氧化氫酶,常見專性厭氧菌有肉毒梭狀芽孢桿菌、擬桿菌屬、雙歧桿菌屬、光合細(xì)菌、產(chǎn)甲烷菌。,,,四、pH,微生物生長(zhǎng)pH范圍較廣,一般在2-8之間,絕大多數(shù)生長(zhǎng)在pH5-9。不同的微生都有其最適宜生長(zhǎng)pH和一定pH范圍,最高、最適、最低PH范圍,最適p
13、H微生物生長(zhǎng)繁殖速度快。最低、最高PH環(huán)境中,微生物雖能生存和生長(zhǎng),但緩慢易死亡,最適生長(zhǎng)pH值偏于堿性范圍內(nèi)的微生物:最適 pH >8,,嗜堿微生物(例如硝化細(xì)菌、放線菌、根瘤菌等)耐堿微生物(例如干鏈霉菌等),最適生長(zhǎng)pH值偏于酸性范圍內(nèi)的微生物:最適pH <5,嗜酸微生物(例如硫桿菌屬)耐酸微生物(例如乳酸桿菌、醋酸桿菌等),多數(shù)真菌是嗜酸的(pH5),多數(shù)放線菌是嗜堿的(pH8),,在微生物的培養(yǎng)過程中,如何調(diào)節(jié)
14、合適的pH就成了發(fā)酵生產(chǎn)中的一項(xiàng)重要措施。,嗜中性微生物:最適pH 5 - 8.,五、滲透壓,大多微生物適用于在等滲的環(huán)境中生長(zhǎng),若置于高滲溶液中,易造成細(xì)胞脫水而引質(zhì)壁分離,使細(xì)胞不能生長(zhǎng)甚至死亡,若置于低滲溶液中,外環(huán)境中水從溶液進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)引起細(xì)胞膨脹,甚至破裂死亡。,等滲,高滲,利用一般微生物不耐高滲。食品工業(yè)可采取多種有效抑制微生物生長(zhǎng),保存食品的方法 有些微生物耐高滲能力較強(qiáng),可在15—30%鹽溶液生長(zhǎng),六、輻射
15、,紫外線波長(zhǎng)在200~300nm殺菌作用能最強(qiáng),因?yàn)榈鞍踪|(zhì)和核酸分別在280nm和260nm處有較高吸收峰,因?yàn)榉肿咏Y(jié)構(gòu)被破壞和變性失活。,在周圍環(huán)境中,到處都有各種各樣的微生物存在著,其中是對(duì)人類有害的微生物,我們應(yīng)采取有效的措施來抑制或消滅它們。,一、幾個(gè)基本概念,二、物理殺菌因素的代表——高溫,三、化學(xué)殺菌劑或制菌劑,第三節(jié) 常用的滅菌方法,(一)滅菌 采用強(qiáng)烈的物化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其
16、生長(zhǎng)繁殖能力的措施,稱為滅菌。,(二)消毒(化學(xué)和物理方法) 消毒是一種采用較溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的病原菌。,一般消毒劑在常用濃度下只能殺死微生物的繁殖體,對(duì)芽孢則無殺滅作用。 化學(xué)消毒劑高濃度時(shí)具有殺菌作用,低濃度時(shí)具有抑菌作用。,,,一、幾個(gè)基本概念,(三)商業(yè)滅菌,是指食品經(jīng)殺菌處理后,采用常規(guī)的培養(yǎng)方法無活菌檢出或殘存的非致病菌的數(shù)量很低,但要求它們?cè)诓贿m宜的pH、溫度等儲(chǔ)藏條
17、件下不能在產(chǎn)品中生長(zhǎng)繁殖。,食品工業(yè)中,常用“殺菌”名詞,包括消毒和商業(yè)滅菌,如牛奶的殺菌是巴氏消毒;罐藏食品的殺菌是指商業(yè)滅菌。,(四)防腐 防腐就是利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長(zhǎng)繁殖,從而達(dá)到防止食品等發(fā)生霉腐的措施。,(五)化療 化療即化學(xué)治療,它是利用具有高度選擇毒力的化學(xué)物質(zhì)來抑制宿主體內(nèi)部病原微生物的生長(zhǎng)繁殖,借以達(dá)到治療該傳染病的一種措施。,二、物理殺菌因素的代表——高溫
18、 能作為物理殺菌因素的種類很多,例如高溫、輻射、超聲波和激光等,現(xiàn)在最常用的方法是高溫。,在實(shí)踐上行之有效高溫滅菌或消毒的方法主要有以下幾種:,1、干熱滅菌法,2、濕熱滅菌法,三、化學(xué)殺菌劑或制菌劑 抑制或殺滅微生物的化學(xué)因素種類極多、用途廣泛、性質(zhì)各異。主要有以下種類:,化學(xué)因素,表面消毒劑,溶液狀態(tài)氣體狀態(tài),抗代謝藥物:硫胺類等抗生素中草藥有效成分,,,,化學(xué)治療劑,(一)表面消毒劑,消毒劑:可殺死微生物,通
19、常用于非生物材料的滅 菌或消毒。,酸類:乳酸、醋酸、苯甲酸、山梨酸、脫氫醋酸等。,堿類:石灰水、生石灰乳、火堿、燒堿等。,氧化劑:高錳酸鉀、過氧化氫、氯氣、漂白粉、過氧乙酸、 二氧化氯、碘酒等。,有機(jī)化合物:醇類、酚類、醛類等。如乙醇、石碳酸、 甲醛(福爾馬林)等。,(二)抗代謝藥物的代表——磺胺類藥物,有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似,以至可以和特定
20、的酶結(jié)合,從而阻礙了酶的功能,干擾了代謝的正常進(jìn)行,這些物質(zhì)稱為抗代謝物。,葉酸對(duì)抗物(磺胺)嘌呤對(duì)抗物(6-巰基嘌呤)苯丙氨酸對(duì)抗物(對(duì)氟苯丙氨酸)尿嘧啶對(duì)抗物(5-氟尿嘧啶)胸腺嘧啶對(duì)抗物(5-溴胸腺嘧啶)等等,(三)抗生素,抗生素是生物在其生命活動(dòng)過程中產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物或其人工衍生物,它們?cè)诤艿蜐舛葧r(shí)就能抑制或影響它種生物的生命活動(dòng),如殺死微生物或抑制其生長(zhǎng),因而可作優(yōu)良的化學(xué)治療劑。,1、概念,自本世紀(jì)40年代以來
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