肝炎標志物介紹

1、肝炎病毒標志物與相關科室的關系,趙英仁 西安交通大學第一附屬醫(yī)院感染科,西安交通大學第一附屬醫(yī)院感染科,西北地區(qū)唯一國家衛(wèi)計委感染病國家臨床重點?？芐FDA批準的藥物研究資深機構(gòu)陜西省衛(wèi)生廳首批確定的優(yōu)勢學科陜西省感染病學會主委單位陜西省疑難發(fā)熱待查、疑難肝病診療中心陜西省慢性肝病臨床研究中心省內(nèi)及周邊省份疑難危重患者轉(zhuǎn)診首選單位乙肝母嬰傳播阻斷國際領先國家“十一五”、“十二五”、“十三五” 重大專項的資助學科,西安交

2、通大學第一附屬醫(yī)院感染科主任西安交通大學肝炎研究所所長陜西省感染病學會主任委員，全國感染病學學會委員，全國微生態(tài)學會委員《中華傳染病學雜志》、《中華肝臟病學雜志》、《臨床肝膽病雜志》編委，中華預防醫(yī)學會《熱帶醫(yī)學》等雜志編委。主持國家“十一五、十二五”“十三五”傳染病重大專項及科技支撐計劃、衛(wèi)生部重點學科建設項目和國家自然科學基金在內(nèi)的各類課題。 從事HBV母嬰傳播與不良結(jié)局家族聚集性感染的基礎和臨床研究，重癥肝炎預警機制及治療

3、研究，不明原因發(fā)熱性疾病的診斷和治療。發(fā)表學術(shù)論文80余篇，SCI收錄40余篇 。獲陜西省科技進步一、二等獎。參編全國統(tǒng)編教材五、七、八年制《感染病學》 、教育部教改教材《新發(fā)傳染病學》 。編寫《肝病細胞治療學》、《丙型肝炎基礎與臨床》等專著5部。,趙英仁 教授 主任醫(yī)師 博導,zhaoyingren@mail.xjtu.edu.cn,肝炎病毒,五型：甲、乙、丙、丁、戊型；兩類：經(jīng)消化道傳播：甲型、戊型 經(jīng)血

4、液傳播：乙型、丙型、丁型,HBV,哪些人群需要篩查HBV感染高危人群,母親是HBV感染者的嬰兒乙肝患者的家庭成員準備任何有創(chuàng)操作的患者吸毒者、監(jiān)獄犯人性傳播疾病病人血液透析病人醫(yī)護人員,,全球乙肝病毒感染的流行現(xiàn)狀,我國HBV感染流行現(xiàn)狀,我國是HBV感染的中等流行區(qū)。我國HBV感染率概況為：抗HBc及／或抗HBs陽性：60％非感染人群：26％慢性乙型肝炎：2％表面抗原陽性的慢性無癥狀HBV攜帶者：7。18％表面

5、抗原陰性的慢性無癥狀HBV攜帶者：2％,Dane顆粒的基本結(jié)構(gòu)示意圖,,,,,,,HBsAg,HBcAg,DNAP,,,,,,,,,（外膜蛋白）,（核衣殼蛋白）,HBV DNA,血液傳播,日常生活,母嬰 傳播,性傳播,乙肝病毒的傳播途徑,高危人群,母親是HBV感染者的嬰兒乙肝患者的家庭成員吸毒者監(jiān)獄犯人性傳播疾病病人血液透析病人醫(yī)護人員,疾病診斷的臨床意義及常見模式分析,HBV血清標志物及其臨床意義介紹幾個臨床乙肝檢測的

6、概念臨床常見乙肝血清標志物反映模式,HBV血清標志物及其臨床意義,乙肝病毒感染標志物 ※ HBV-DNA和兩對半: 抗原 抗體 外膜 ——————HBsAg HBsAb 核殼分泌蛋白—— HBeAg HBeAb

7、 核殼結(jié)構(gòu)蛋白——HBcAg HBcAb,（1）HBsAg,●出現(xiàn)時間：HBV感染后2～6個月（潛伏期）,●持續(xù)時間：,急性自限性肝炎：6個月內(nèi)可消失,慢性肝炎或慢性HBsAg攜帶者：可持續(xù)陽性,,,,曾用名：HA、澳抗,（2）抗-HBs,出現(xiàn)時間：急性感染后期、HBsAg 消失后和注射疫苗后正常的免疫應答者,標志著HBV感染進入恢復期和注射乙肝疫苗后產(chǎn)生正常的免疫應答相同 HBsAg亞

8、型的HBV再感染有免疫力，但對不同亞型的HBV保護力不完全。,（3）HBeAg,HBeAg是HBcAg的降解產(chǎn)物,,,,HBV C基因,前C區(qū),C 區(qū),,,前C / C 蛋白,HBeAg,HBcAg,表 達,,,,切割、加工,,分泌到細胞外,,HBeAg只存在于血清中,●HBeAg是病毒復制和傳染性的標志,血清HBeAg與HBV DNA的含量成正相關，符合率達到95%以上。,（4）抗-HBe,●出現(xiàn)時間：隨著HBeAg的消失而出現(xiàn),●抗

9、-HBe的出現(xiàn)標志著病毒復制減少、傳染性降低,抗-HBe陽性者中，16.3%～30%左右HBV DNA仍陽性可能與前C基因變異有關,易加重病情、易演變?yōu)楦斡不?α-干擾素療效亦較差,,,（5）抗-HBc,●HBcAg主要存在于HBV感染的肝細胞內(nèi)或DANE顆粒 核心中，到血液中即被降解為HBeAg。,一般血清學方法檢測不到HBcAg，而只能檢測到抗-HBc,,抗HBc-IgM：是HBV近期感染或慢性感染者病毒活動的標志,抗HB

10、c-IgG：凡“有過” HBV感染者均可陽性,可終身陽性,常規(guī)檢測的HBV血清標志物,HBsAg HBV感染，但未必是急性肝炎或者 慢性病變活動的病原。抗HBs 感染后免疫；對疫苗的免疫應答；或HBIG的被動免疫HBeAg 反映HBV復制，有病毒血癥，血液高傳染性抗HBe ALT持續(xù)正常者表示HBV低復制或不復制， HBsAg

11、 (+)血液低傳染性。 抗HBc 低滴度表示過去感染；高滴度表示現(xiàn)行感染。IgM抗HBc 高滴度表示急性或近期感染； 活動性病變可出現(xiàn)低滴度。,乙肝檢測模式的解釋,常見九種模式少見十六種模式罕見七種模式,HBV-DNA的意義,DNA是基因，因此HB

12、V-DNA是HBV的遺傳物質(zhì)，當HBV侵入肝細胞后，就會以HBV-DNA為模板，合成新的HBV顆粒并釋放入血，故HBV-DNA是病毒復制的一個重要指標。,COBAS® TaqMan,,乙型肝炎的關鍵是治療人群的選擇,重型肝炎的識別肝硬化的治療兒童肝炎的治療肝炎嚴重度的判定肝臟儲備功能的判斷高度關注家族聚集性HBV感染,HCV,哪些人需要篩查HCV感染,輸血、輸血制品、獻血史者；出血熱患者；長期血液透析的患者；接受

13、器官移植；不正規(guī)醫(yī)院進行過牙科操作者有紋身、耳朵打孔、美容、修腳；共用注射器者HCV感染者有密切接觸者醫(yī)護人員、警察、監(jiān)獄管理人員；,1、有包膜,屬黃病毒科，丙型肝炎屬。2、單股正鏈 RNA (9.6 kb)3、T½: ?2.7 小時4、每日復制量：10 兆 (1012) 病毒顆粒,Purcell RH. NIH Consensus Conference on Hepatitis C. 1997.

14、 Neumann AU et al. Science. 1998;282:103-107. Rosenberg S. J Mol Biol. 2001;313:451-464. Lauer GM, Walker BD. N Engl J Med. 2001;345:41-52.,丙型肝炎病毒,從非甲非乙型肝炎到丙型肝炎:,1968-1974年間,HAV、HBV診斷方法相繼建立,人們發(fā)現(xiàn)還有一種引起輸血后肝炎的致病因子.197

15、4年紐約的Pince對204例術(shù)后病人隨訪,6個月51人(25%)發(fā)生了輸血后肝炎,僅12人與HBV有關.CMV顯然不是輸血后肝炎的原因.1989年9月在東京會議上命名此種病毒為丙型肝炎病毒(HCV),由此引發(fā)的肝炎稱之為丙型肝炎(HC).,HCV的病毒命名,,全球丙肝的流行情況,1、WHO的資料表明,全世界已有約1.7億丙型肝炎病毒感染者。2、急性HCV感染者中8O-90％可發(fā)展為慢性肝炎,其中約20-30％會緩慢進展為肝硬化。

16、1-5％發(fā)展為肝癌。3、HCV主要經(jīng)血液和血液制品傳播。 至今還沒有預防丙型肝炎的疫苗問世,治療效果不是十分理想。因此,建立一種針對HCV的具有高靈敏度、特異性和穩(wěn)定性的檢測方法，對于防止HCV傳播、HCV感染的早期診斷和治療具有重要意義。,我國丙型肝炎流行情況,一般人群抗-HCV流行率: 3.2%估計HCV感染人數(shù): 3 800萬,( 全國病毒性肝炎血清流行病學調(diào)),目前經(jīng)過血源的管理，丙肝發(fā)病率應當有所下降，但有

17、大量病人未被發(fā)現(xiàn)和治療,>3%( 14 省),2～3%( 11 省),<2%( 6 省),,,我國各省市自治區(qū)HCV抗體 流行率,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,新疆,西藏,四川,貴州,海南,廣東,廣西,云南,河南,江蘇,安徽,湖北,臺灣,福建,江西,湖南,寧夏,山西,陜西,遼寧,上海,天津,黑龍江,山東,青海,甘肅,北京,河北,浙江,吉林,內(nèi)蒙古,重慶,( 全國病毒性肝炎血

18、清流行病學調(diào)查 1992~1995 ),我國HCV基因型調(diào)查,1、HCV 1b型是主要的基因型，其檢出率達83.17％。2、HCV 2型檢出率低，占6.86％；其余為1b、2、4b型的混合型。3、HCV 1b檢出率在50歲組分別為77.77％、83.92％、90.90％。4、HCV 1b在女性感染的比率較高（93.61％），男性為75％，差異有極顯著的統(tǒng)計意義(p10年和<10年病人中的檢出率分別為100％和80.43％（p

19、<0.01） 。,HCV 感染：中國 HCV 基因型的地理分布,,,20% 痊愈,HCV感染的自然史,,80% 持續(xù)感染,,30% 穩(wěn)定，慢性，無進展,Adapted from Alter HF, Seeff LB. Semin Liver Dis. 2000;20:17-35,肝臟疾病終末期，肝細胞癌，肝臟移植，死亡,,30% 呈嚴重進展,100 位 HCV 急性感染,40% 有不同程度進展,,丙型肝炎病毒(HCV)感染危害性

20、不容忽視,全球性流行 ——3% (1.7 億)慢性化的危險性 —— 60%–85%臨床診斷病例 —— < 30%肝硬化的危險性 —— 在感染后20年內(nèi)達 10% 在感染后30年內(nèi)達20%肝硬化患者中肝細胞癌 ——1%–4%/年 (美國)的發(fā)生率

21、 ~ 7% (日本、臺灣)失代償肝硬化10年存活率 —— 25％肝硬化相關性病死率 —— 1%–5%/年,WHO. Hepatitis C. Fact sheet no. 164. Emmet B. Keeffe, MD, Medscape Gastroenterology eJournal, 2002, 4(2) Nation

22、al Institute of Health Consensus Development Conference Statement:Management of Hepatitis C:2002-June 10-12,2002Consensus statements on the prevention and management of hepatitis B and C in the Asia-pacific region,HCV的感

23、染人數(shù) = 臨床病例？,發(fā)病隱匿基層臨床醫(yī)生認識不足丙肝檢測沒有納入常規(guī)查體項目確診比較難，費用高抗體的窗口期，RNA的假陰性** ——臨床診斷病例少,,National Institute of Health Consensus Development Conference Statement:Management of Hepatitis C:2002-June 10-12,2002,美國：在2015年以前

24、，臨床診斷HCV的成人病例數(shù)增加4倍中國：挑戰(zhàn)？！,挑戰(zhàn)!!,問題與挑戰(zhàn),我 們 如 何 應 對 挑 戰(zhàn)？,1、制定中國丙肝防治指南：規(guī)范丙肝的篩查， 診斷和治療。2、加強丙肝疾病和診療對基層醫(yī)生的教育。3、重視臨床一線對丙肝的篩查。4、通過各種途徑提高公眾對丙肝的防范意識： 如媒體等。,近年來丙肝研究進展,丙肝分型、病毒復制、病毒變異等慢性化機制、脂肪變性、癌變機理等抗病毒治療：I型應答率40%；II型

25、應答率80%直接抗病毒治療,實驗室診斷進展,多抗原包被的抗體檢測（第3代抗-HCV）HCV-Ag的檢測（第4代）抗原-抗體聯(lián)合檢測（篩查）HCV的基因分型HCV-RNA的檢測 ——總之，實驗室診斷研究進展？,,診斷、監(jiān)測方法,HCV血清學試驗EIA檢測抗HCV,HCV-RNA定性試驗PCR、TMA,HCV-RNA定量試驗PCR、bDNA,ALT,肝纖維化非損傷試驗,肝活檢,,,,,,,基因分型,,,實驗室診斷方法,Na

26、tional Institute of Health Consensus Development Conference Statement:Management of Hepatitis C:2002-June 10-12,2002,HCV血清學試驗EIA檢測HCV抗原,,常用的檢測方法,酶聯(lián)免疫吸附試驗-HCV抗體檢測 酶聯(lián)免疫吸附試驗- HCV核心抗原檢測免疫學方法-免疫印跡法（RIBA）免疫學方法-血清學分型分子生物學

27、方法-HCV-PCR定量、HCV-PCR定性分子生物學基因分型方法-型特異PCR分型法、型特異探針雜交法、限制性長度多態(tài)性分析法(RFIJP)、核酸序列分析法、酶切分型法、基因芯片等,HCV抗體檢測應用的不足,目前國內(nèi)主要應用抗HCV/EIA檢測抗體，經(jīng)抗體篩選后，臨床上仍有少量的輸血后丙肝的發(fā)生。,HCV抗體檢測應用的不足,1、不能用于丙型肝炎的早期診斷。2、臨床上不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染。3、抗病毒治療不一定造成抗HCV

28、陰轉(zhuǎn)，不能用于抗病毒療效的檢測。,血清HCV-RNA的檢測,血清HCV-RNA的定性檢測： 容易產(chǎn)生假陽性或假陰性（PCR產(chǎn)物易產(chǎn)生污染）血清HCV-RNA的定量檢測： 可用于抗病毒治療的選擇與療效監(jiān)測,丙肝抗原檢測,1、丙型肝炎早期感染診斷指標2、丙型肝炎確診指標3、丙型肝炎治療評價指標4、丙型肝炎篩查指標,HCV核心抗原的檢測,,,,抗-HCV,,“游離”抗原,時間,HCV 感染過程,早期檢測

29、“篩查”,,“總”抗原(抗體結(jié)合),,,“總”抗原,診斷用,12-14天,年,,,,1 pg/ml 總HCV 核心抗原 = 8000 IU/ml HCV RNA,,日,70-80天,,,丙肝確診后的實驗室檢測,HCV基因分型——選擇抗病毒治療防案、療效評價、確定療程，預后判斷HCV-RNA定量的檢測——評價抗病毒治療的療效我科開展高敏HCV RNA定量及HCV基因型檢測。,丙型肝炎的關鍵是發(fā)現(xiàn),抗體陽性HCV RNA檢測

30、的應用治療有重大突破,甲型肝炎,戊型肝炎,,肝功能化驗的意義,轉(zhuǎn)氨酶升高的理解轉(zhuǎn)氨酶的分布及可能的意義原因分析的邏輯思考,經(jīng)歷一番寒徹骨 自有梅花撲鼻香,,,人有了知識，就會具備各種分析能力，明辨是非的能力。所以我們要勤懇讀書，廣泛閱讀，古人說“書中自有黃金屋。”通過閱讀科技書籍，我們能豐富知識，培養(yǎng)邏輯思維能力；通過閱讀文學作品，我們能提高文學鑒賞水平，培養(yǎng)文學情趣；通過閱讀報刊，我們能增長見識