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1、第七章電化學(xué)分析技術(shù)和臨床相關(guān)儀器,§7-1 概述§7-2 電化學(xué)分析原理 §7-3 電解質(zhì)分析儀 §7-4 血?dú)夥治鰞x,電化學(xué)臨床分析儀器是利用電化學(xué)分析技術(shù)而設(shè)計(jì)的臨床分析儀器。,§7-1 概 述,一、電化學(xué)臨床分析儀器,電解質(zhì)分析儀(electrolyte chemistry analyzers),血?dú)夥治鰞x(blood gas analyzers),,分類,1.
2、電解質(zhì)分析儀,采用離子選擇性電極(ISE)測量體液中離子濃度的儀器。,測量樣品中的指標(biāo): 鉀、鈉、氯、鈣、鋰、pH值等。,利用電極對血樣中的酸堿度(pH)、二氧化碳分壓(PCO2)和氧分壓(PO2)進(jìn)行測定的儀器。,2.血?dú)夥治鰞x,測量樣品中的指標(biāo): pH、PCO2、PO2、AB、SB、BB、TCO2、BE blood、BEECF、SO2等。,電化學(xué)分析法是建立在溶液電化學(xué)性質(zhì)基礎(chǔ)上的一類分析方法。,二、電化學(xué)
3、分析法 (Electrochemical analysis),測 定物理量,,參與反應(yīng)的化學(xué)物質(zhì)的量,確定,電位電流電導(dǎo)電量,,§7-2 電化學(xué)分析原理,一、pH值測定原理,pH玻璃膜電極(glass membrane electrode),玻璃電極對溶液pH的敏感程度取決于電極的玻璃膜。,在25℃時(shí),玻璃電極的電極電位:,通常采用二次測量法,即用相同的儀器測定標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測溶液的電動勢,以確
4、定待測液的pH。采用的電池組成是:,2. 電化學(xué)法測量血液 pH,由于各玻璃電極的 K玻 不盡相同,在測定時(shí)儀器需用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液進(jìn)行校正。,常用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液,(1)0.05mol/Kg 鄰苯二甲酸氫鉀溶液,37℃,pH值: 6.84,37℃,pH值:4.02,(2)0.025mol/Kg 混合磷酸鹽溶液,二、離子選擇性電極工作原理 ( principal of Ion selective electrode ),1.
5、離子選擇性電極的結(jié)構(gòu),膜電位:膜內(nèi)外被測離子活度的不同而產(chǎn)生 電位差。,離子選擇性電極又稱膜電極(membrane electrodes ),特點(diǎn):僅對溶液中特定離子有選擇性響應(yīng)。,膜電極的關(guān)鍵:是一個(gè)稱為選擇膜的敏感元件。,敏感元件: 單晶、混晶、液膜、功能膜及生物 膜等構(gòu)成。,離子選擇電極的構(gòu)造,離子選擇性電極的電極電位表示為:,,,陽離子選擇性電極為 +;陰離子選擇性電極為 -;
6、n 為離子電荷數(shù);Cx 為被測離子濃度;fx 為被測離子活度系數(shù);K 在測量條件恒定時(shí)為常數(shù)。,2. 離子選擇性電極的測量方法,ISE與參比電極共同浸入樣品試液中構(gòu)成一個(gè)原電池,通過測量原電池的電動勢E,便可求得被測離子的活度或濃度。,離子選擇性電極作正極時(shí): 對陽離子響應(yīng)的電極,取正號; 對陰離子響應(yīng)的電極,取負(fù)號。,間接法---- 血清經(jīng)一定離子強(qiáng)度緩沖溶液 稀釋后由電極測量。,
7、直接法間接法,ISE測量方法分類:,直接法---- 血清不經(jīng)稀釋直接由電極測量,,三、氧分壓(PO2)電極的工作原理,PO2 電極是氧化還原電極,對氧的測量是基于電解氧的原理實(shí)現(xiàn)的。,目前用得最多的氧電極是電解式的Clark氧電極,Clark氧電極是由鉑陰極、Ag/AgCl陽極、KCl電解質(zhì)和透氣膜所構(gòu)成。,Clark 氧電極的結(jié)構(gòu),待測溶液中的O2可以借助電極外表面的O2滲透膜(約20?m的聚丙烯或聚乙烯或聚四氟乙烯),依靠P
8、O2梯度透過膜而進(jìn)入電極。,在測定時(shí),O2在鉑陰極表面發(fā)生的反應(yīng)如下:,O2 + 2 H2O → H2O2 H2O2 + 2 e- → 2 OH-,當(dāng)陰極表面附近的氧被消耗后,陰極表面氧氣分壓:,PO2= 0.00 kPa/mmHg,樣品中的氧將通過滲透膜向陰極發(fā)生濃度擴(kuò)散。 當(dāng)氧濃度擴(kuò)散梯度相對穩(wěn)定時(shí),就產(chǎn)生一個(gè)穩(wěn)定的電解電流,稱之為極限擴(kuò)散電流 I0 。,I0 ∝ PO2(樣本),通過測定電流變化即可測定血液標(biāo)本中
9、的氧氣分壓。,在外加電壓超過0.8V時(shí),即使PO2 = 0 mmHg,水本身也會被電解而產(chǎn)生電流。 外加在PO2電極上的工作電壓通常為0.65V。,四、PCO2 電極的工作原理,PCO2電極是氣敏電極(gas sensing electrode),是由pH玻璃電極和銀-氯化銀電極組裝在一起的復(fù)合電極。,§7-3 電解質(zhì)分析儀,電解質(zhì)分析儀(electrolyte analyzer) : 采用離子選擇性電極(I
10、SE)測量溶液中離子濃度的儀器 。,測定指標(biāo): 生物樣品中的K+、Na+、Cl-、Ca2+、Li+、pH值等。,具有設(shè)備簡單、操作方便、靈敏度和選擇性好、成本低、快速、準(zhǔn)確、微量、不破壞被測試樣和不用進(jìn)行復(fù)雜的預(yù)處理等優(yōu)點(diǎn)。,優(yōu)點(diǎn):,如 Nova 電解質(zhì)/化學(xué)分析儀: Na+、K+、Cl-、Ca2+、Mg2+、Li+、TCO2、TCa、Glu、BUN、Hct、pH、Creat。,一、電解質(zhì)分析儀的分類,(一)按自動化程度分
11、類,半自動電解質(zhì)分析儀全自動電解質(zhì)分析儀,,(二)按工作方式分類,濕式電解質(zhì)分析儀 – 臨床上常用 干式電解質(zhì)分析儀,,(三)常見電解質(zhì)分析的儀器分類,電解質(zhì)分析儀 — 只進(jìn)行單獨(dú)的電解質(zhì)分 析 ,分析血清、血漿、 全血和稀釋尿液標(biāo)本 。血?dú)夥治鰞x — 含H+、Na+、K+、Ca2+、Cl-
12、 等電解質(zhì)分析,既可以做 急診化驗(yàn)又可批量分析。 自動生化分析儀 — 含電解質(zhì)分析。,,二、電解質(zhì)分析儀的結(jié)構(gòu),(一)濕式電解質(zhì)分析儀,離子選擇性電極參比電極分析箱測量電路控制電路驅(qū)動電機(jī)顯示器,濕式電解質(zhì)分析儀,,基本組成,結(jié)構(gòu)框圖,測定原理,樣品通過某離子選擇性電極時(shí)由某相應(yīng)的電解質(zhì)滲過電極膜時(shí)產(chǎn)生了電流,通過對該電流的放大,同標(biāo)準(zhǔn)液 A 標(biāo)及 B 標(biāo)通過電極時(shí)產(chǎn)生的電流進(jìn)行
13、對數(shù)及斜率比較,計(jì)算出樣品中某一電解質(zhì)的值。,① 由動力泵將 A 標(biāo)準(zhǔn)液抽入電極池(抽樣長度由光電開關(guān)檢測),并停留幾秒進(jìn)行 A 標(biāo)標(biāo)定,然后由動力泵將 A 標(biāo)準(zhǔn)液抽回廢液瓶。,測定過程,② 分配閥動作將通道接向 B 標(biāo)準(zhǔn)液,由動力泵將 B 標(biāo)準(zhǔn)液抽入電極池進(jìn)行斜率測定。B 標(biāo)定標(biāo)完成后,由動力泵將 B 標(biāo)準(zhǔn)液抽回廢液瓶。,③ 由動力泵將樣品吸入電極池進(jìn)行樣品的測定,測量數(shù)據(jù)經(jīng)前置放大器放大送入CPU 板,與 A 標(biāo)、B 標(biāo)測量值進(jìn)行
14、比較,計(jì)算結(jié)果通過 CRT 顯示器顯示或打印機(jī)輸出。,測定過程框圖,不同的電解質(zhì)分析儀在儀器板面上都具有人機(jī)對話的操作鍵。在分析檢測樣品時(shí),操作者可以通過按鍵操作控制分析檢測過程。,1.板面系統(tǒng),例如:汽巴·康寧644 電解質(zhì)分析儀,只有 yes/no 兩個(gè)按鍵,yes 鍵用來接收顯示屏上的提問,no 鍵用來否定顯示屏上的提問,通過這兩個(gè)鍵可對儀器進(jìn)行各種操作和參數(shù)設(shè)定。,2.電極系統(tǒng),電極系統(tǒng)是測定樣品結(jié)果的關(guān)鍵,決定測定結(jié)
15、果的準(zhǔn)確度和靈敏度。,指示電極參比電極,電極系統(tǒng),,指示電極: pH、Na+、K+、Li+、Cl-、Ca2+、Mg2+等 離子選擇性電極。,參比電極: 銀/氯化銀電極,,指示電極:流動式離子感應(yīng)透明膜電極,新型儀器的測量電極,參比電極:流動式透明接頭電極,,Na電極結(jié)構(gòu)示意圖,K、Ca、Cl、Li電極結(jié)構(gòu)示意圖,參比電極結(jié)構(gòu)示意圖,3.液路系統(tǒng),液路系統(tǒng)通常由標(biāo)本盤、溶液瓶、吸樣針、三通閥、電極系統(tǒng)、蠕動泵等
16、組成,蠕動泵的作用:為各種試劑的流動提供動力。,液路系統(tǒng)中的通路:由定標(biāo)液(calibration solutions )/沖洗液(Rinse)通路、標(biāo)本通路、廢液通路、回水通路、電磁閥通路等組成。,液路系統(tǒng)直接影響到樣品濃度測定的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。,標(biāo)本盤、三通閥和蠕動泵的轉(zhuǎn)動、轉(zhuǎn)換均由微機(jī)自動控制。,MEDICA全自動電解質(zhì)分析儀,4.電路系統(tǒng),電解質(zhì)分析儀的電路系統(tǒng)由五個(gè)模塊組成,電源電路模塊微處理器模塊輸入輸出模塊信號放大及
17、數(shù)據(jù)采集模塊蠕動泵和三通閥控制模塊,,GF-982 型電解質(zhì)分析儀的電路邏輯框圖,提供分析儀的打印機(jī)接口電路、蠕動泵控制電路、電磁閥控制電路和其它各種部件所需的電源。,電源電路模塊作用:,微處理器模塊及其作用:,包括主機(jī) CPU芯片,通過地址總線、數(shù)據(jù)總線與顯示板、打印機(jī)、觸摸控制板相連,通過系統(tǒng)總線與模擬通道液壓系統(tǒng)相連。,包括主信號放大器變換器(電極、標(biāo)本檢測器)和其它電子系統(tǒng)間的界面,它除了鈉、鉀、氯等測量通道外,其余模擬信號也
18、在放大系統(tǒng)上處理,所有這些信號被傳輸?shù)紺PU板上的主A/D變換器上。,信號放大模塊,AVL 9181型電解質(zhì)分析儀內(nèi)部結(jié)構(gòu)示意圖,5.軟件系統(tǒng),提供儀器微處理系統(tǒng)操作、儀器設(shè)定程序操作、儀器測定程序操作和自動清洗等操作程序。,分析儀的軟件系統(tǒng),是控制儀器運(yùn)作的關(guān)鍵。,軟件系統(tǒng)的作用:,監(jiān)察分析儀的穩(wěn)定性、調(diào)校自動定標(biāo)頻率和自動測定質(zhì)控標(biāo)本,并自動將結(jié)果與預(yù)期的數(shù)據(jù)作比較評估,也能指導(dǎo)操作者日常保養(yǎng)和幫助解決故障問題。,微處理系統(tǒng)操作
19、程序:,在測定質(zhì)控范圍、質(zhì)控時(shí)間,設(shè)定密碼及選擇自動或手動定標(biāo)方式時(shí),都需要設(shè)定程序。,儀器設(shè)定程序操作:,儀器測定程序操作:,測定操作的控制采用人機(jī)對話方式,由操作者按鍵控制,運(yùn)行過程包括啟動運(yùn)作、吸取樣本、自動分析檢測、數(shù)據(jù)處理及結(jié)果打印、自動清洗吸樣針等測量組件以及復(fù)位等待下次檢測分析等。,(二)干式電解質(zhì)分析儀,電解質(zhì)的干化學(xué)測定法目前主要有兩類:,基于反射光度法干化學(xué)測定,基于離子選擇性電極(ISE)方法干化學(xué)測定,,SPOT
20、CHEM EL SE-1520,基于ISE法干式電解質(zhì)分析儀的結(jié)構(gòu)示意圖,,通常每測一個(gè)項(xiàng)目需要用一個(gè)干片,每個(gè)干片上帶有條形識別碼,儀器將自動識別所進(jìn)行的測定項(xiàng)目。,測定時(shí),用雙孔移液管取10μl 血清和10μl 參比液滴入兩個(gè)加樣孔內(nèi),即可測定二者的差示電位。,三、電解質(zhì)分析儀的維護(hù)保養(yǎng)與故障排除,(一)儀器的維護(hù)保養(yǎng),1. 電極系統(tǒng)的保養(yǎng),儀器在工作過程中,由于電極的內(nèi)充液與樣品之間存在著不同程度的離子交換,使電極內(nèi)充液的濃度逐漸
21、降低,從而使膜電位下降,導(dǎo)致測量結(jié)果偏低。需要定期對電極內(nèi)充液中的離子含量進(jìn)行調(diào)整。,鈉電極內(nèi)充液的濃度降低最為嚴(yán)重,要經(jīng)常檢查調(diào)整內(nèi)充液濃度。,許多儀器的程序設(shè)計(jì)中已包含每日保養(yǎng)(daily maintenance)一項(xiàng)。堅(jiān)持每日用廠家提供的清潔液和鈉電極調(diào)整液進(jìn)行清洗和調(diào)整是最基本的保養(yǎng)。,調(diào)整液含有氟化鈉----玻璃腐蝕劑。,(1)鈉電極,鉀電極為選擇性膜電極,使用過程中會吸附蛋白質(zhì),影響電極的響應(yīng)靈敏度。每月至少更換一次內(nèi)充液。
22、,(2)鉀電極,氯電極為選擇性膜電極,使用過程中亦會吸附蛋白質(zhì),影響電極的響應(yīng)靈敏度。最好用物理法進(jìn)行膜電極的清潔。,(3)氯電極,每周均需檢查電極內(nèi)是否有足夠的飽和氯化鉀溶液及氯化鉀殘片。如果不夠或沒有,則需及時(shí)添加。一般三個(gè)月要換一次參比電極膜。,(4)參比電極,清洗電極套,保持毛細(xì)管通透,使鹽橋?qū)?電極芯無需保養(yǎng),但不能用水洗或使其干燥。,2.流路系統(tǒng)的保養(yǎng),儀器在測量過程中,由于血清中含有部分纖維蛋白,蛋白將附著在液流通道 (
23、flowpath)的泵、管路和電極系統(tǒng)毛細(xì)管的內(nèi)壁上,當(dāng)測量工作量較大時(shí),內(nèi)壁所附的蛋白增厚,造成阻塞管路和影響樣品與電極之間的測量電位,影響正常工作和測試結(jié)果的準(zhǔn)確性。,(1)流路保養(yǎng),多數(shù)儀器都有儀器流路保養(yǎng)程序,可以根據(jù)保養(yǎng)程序進(jìn)行保養(yǎng)工作。當(dāng)流路保養(yǎng)程序結(jié)束后,應(yīng)當(dāng)對儀器進(jìn)行重新定標(biāo)。,流路清洗是為了保證儀器流路中沒有蛋白質(zhì)、脂類沉積和鹽類結(jié)晶。,(2)全流路清洗,儀器進(jìn)入流路程序進(jìn)行清洗,吸入或注射清洗液、去蛋白液或蒸餾水沖洗
24、流路,重復(fù)2?3次。沖洗完畢,應(yīng)當(dāng)對儀器進(jìn)行重新定標(biāo)。,(二)日常維護(hù)保養(yǎng),儀器維護(hù)保養(yǎng),每日維護(hù)每周維護(hù)半年維護(hù)停機(jī)維護(hù),,檢查試劑量,如不足1/4液面,應(yīng)及時(shí)更換;清潔儀器表面灰塵及吸樣探針,保持探針的暢通;及時(shí)棄去廢液瓶中的廢液。,1.每日維護(hù),儀器應(yīng)進(jìn)行流路清洗,除去蛋白質(zhì)、脂類沉積和鹽類結(jié)晶,對儀器進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)。,2.每周維護(hù),清潔泵管,用酒精棉球清潔泵管和不銹鋼轉(zhuǎn)軸,在泵管的彎處涂硅油或白色凡士林等潤滑劑。,3.每月維
25、護(hù),4.每季度進(jìn)行MV值試驗(yàn),電極的MV值由儀器使用說明書給出。,(三)常見故障及其排除方法,一些常見故障、產(chǎn)生原因和排除方法如下:,電極沒有穩(wěn)定,可以在電極穩(wěn)定30min后定標(biāo)。,是否停電、電源線未插入插座中、保險(xiǎn)絲熔斷等。,1.儀器不工作,2.定標(biāo)不能穩(wěn)定,3.重復(fù)性不良,(1)電極未活化,應(yīng)活化電極; (2)電極間有漏液,應(yīng)裝緊電極或更換密封圈; (3)電極間有血樣凝塊,需拆開電極,用吸球吹凈電極;
26、(4)參比電極有KCl結(jié)晶,應(yīng)擦凈;電極毫伏偏低,更換電極內(nèi)液或電極; (5)電極斜率(electrode slope)低于規(guī)定值,應(yīng)更換電極或重新校準(zhǔn);,(6)試劑太少或變質(zhì),應(yīng)更換試劑; (7)系統(tǒng)校準(zhǔn)沒有進(jìn)行,應(yīng)運(yùn)行系統(tǒng)校準(zhǔn)2?3次; (8)系統(tǒng)校準(zhǔn)能通過,但電極斜率SLOPE值超出規(guī)定,重新運(yùn)行系統(tǒng)校準(zhǔn)2?3次或更換相應(yīng)電極或試劑。,為保證實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,建議操作者每天做一次質(zhì)控。,4.準(zhǔn)
27、確性不夠,如果所有測定項(xiàng)目準(zhǔn)確性差,應(yīng)更換參比電極。,5.樣品不能吸入、管路有氣泡,(1)進(jìn)樣針堵塞,應(yīng)拆下進(jìn)樣針用注射器疏通沖洗; (2)三通堵塞,拆下電極用注射器疏通沖洗三通; (3)電極堵塞,拆下電極,并分解單個(gè)電極用吸球吹凈電極; (4)泵管老化,應(yīng)更換泵管; (5)管道有破裂或松動,應(yīng)更換管道或裝好管道。,6.管路堵塞,血液中的蛋白、脂類、纖維及血凝塊在管路中積聚,造成阻塞。,易堵塞的地方主要有下面的4
28、個(gè)部分:,(1)采樣針與空氣檢測器部分,若確定為這部分阻塞后,可直接用清洗液進(jìn)行保養(yǎng)管路,如達(dá)不到目的,可拆下空氣檢測器,用注射器注入NaClO溶液反復(fù)沖洗進(jìn)樣針和空氣檢測器,通暢后再用蒸餾水沖洗干凈即可。,(2)電極腔前端與末端部分,平時(shí)可用清洗液進(jìn)行管路清洗保養(yǎng);亦可將電極全部拆下,將電極腔用NaClO溶液浸泡2分鐘左右,再反復(fù)清洗,用蒸餾水沖洗干凈,擦干水份裝回即可。,(3)混合器部分,主要用清洗液或去蛋白液進(jìn)行混合器清洗程序,如
29、達(dá)不到目的,可將混合器拆下,用注射器將NaClO溶液注入混合器浸泡幾分鐘,然后反復(fù)沖洗,待看上去干凈后,用蒸餾水沖洗干凈,擦干水份即可。,(4)泵管和廢液管的堵塞,可用注射器吸入清洗液或蒸餾水沖吸管路,看是否通暢,如無阻力,證明管路已通,按原樣裝回管路即可。,7.電極漂移與失控,① 電極漂移的最常見的原因是地線未接好,應(yīng)檢查地線;檢查漂移的電極銀棒是否未插入信號插座或接觸不良; ② 電壓不穩(wěn)定,最好接UPS不間斷電源或質(zhì)量較好的
30、穩(wěn)壓電源(質(zhì)量差的穩(wěn)壓電源會引起電極漂移);,③ 避免電磁干擾,功率較大的設(shè)備應(yīng)盡量遠(yuǎn)離本儀器,獨(dú)立設(shè)置電源; ④ 檢查標(biāo)準(zhǔn)液及清洗液是否已用完;檢查流通池中參比內(nèi)充液是否太少,應(yīng)及時(shí)注滿;,⑤ Na、pH電極漂移時(shí)應(yīng)用玻璃電極清洗液清洗,再用蒸餾水反復(fù)沖洗即可;,⑥ 如果電極全部漂移,則應(yīng)檢查參比電極是否到期; ⑦ 定位不好,造成溶液未全部浸沒電極,應(yīng)重新進(jìn)行定位操作;,⑧ 參比電極上方有氣泡,應(yīng)輕拍流通池,將氣泡移
31、至Na電極上方; ⑨ 試劑過期或被污染,檢查A、B標(biāo)準(zhǔn)液及清洗液瓶,是否有絮狀沉淀。,8.測試血樣出現(xiàn)異常值,① 附近是否有大功率電器開動或漏電(如離心機(jī)、電冰箱),造成電壓波動; ② 測試時(shí)吸入凝血;,③ 溶液未到位,可查看定位是否良好,如果溶液到位不好,可用服務(wù)程序中重新定位程序來進(jìn)行重新定位; ④ 檢查盛血樣的容器是否污染,是否殘留了消毒液等物質(zhì); ⑤ 查看校正因子是否正確,如有
32、異常,可將校正因子清除; ⑥是否長時(shí)間未標(biāo)定,可重新標(biāo)定后再測。,電極斜率低,將造成測試線性不好,有時(shí)也影響電極的重復(fù)性,其主要原因有: ① 電極膜板上吸附蛋白過多; ② 空氣濕度太大; ③ 溫度太低; ④ 壽命將至。,9.電極斜率降低,血?dú)夥治鰞x(blood gas analyzer)是利用電極對人全血中的酸堿度(pH)、二氧化碳分壓(PCO2)和氧分壓(PO2)進(jìn)行測
33、定的儀器。,§7-4 血?dú)夥治鰞x,根據(jù)所測得的pH、PCO2、PO2參數(shù)及輸入的血紅蛋白值,血?dú)夥治鰞x可進(jìn)行計(jì)算而求出血液中的其它參數(shù),如:,實(shí)際碳酸氫根濃度(AB)標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫根濃度(SB)血液緩沖堿(BB)血漿二氧化碳總量(T-CO2)血液堿剩余(BEblood)細(xì)胞外液堿剩余(BEECF)血氧飽和度(SO2),,人體血?dú)馑釅A生理指標(biāo)常用參數(shù),,,,一、工作原理,電極系統(tǒng)管路系統(tǒng)電路系統(tǒng),血?dú)夥治鰞x種類型號
34、很多,其基本結(jié)構(gòu)均可分為三大部分:,,血?dú)夥治鰞x的工作原理圖,測量室必須是一個(gè)恒溫系統(tǒng)。通常測量室的溫度被恒定在37℃±0.1℃。,在血?dú)夥治鰞x中,為了完成對樣品的自動定標(biāo)、自動測量和自動沖洗等功能,裝有一套比較復(fù)雜的管路系統(tǒng)以及配合管路工作的泵體和電磁閥。,泵和電磁閥的轉(zhuǎn)、停、開、閉、溫度的高低;定標(biāo)氣及定標(biāo)液的有、無、供、停等,均由微機(jī)進(jìn)行控制或監(jiān)測。,血?dú)夥治龇椒ㄊ且环N相對測量方法。在測量樣品之前,需用標(biāo)準(zhǔn)液及標(biāo)準(zhǔn)氣體確
35、定pH、PCO2和PO2三套電極的工作曲線。,通常把確定電極系統(tǒng)工作曲線的過程叫做定標(biāo)或校準(zhǔn)(Calibration)。,每種電極都要有兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來進(jìn)行定標(biāo),以便確定建立工作曲線最少需要的兩個(gè)工作點(diǎn)。,使用7.383和6.840兩種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液進(jìn)行定標(biāo)。,pH系統(tǒng):,氧和二氧化碳系統(tǒng):,用兩種混合氣體來進(jìn)行定標(biāo)。,5% CO2和20% O2,10% CO2,,定 標(biāo),二、儀器結(jié)構(gòu),(一)電極系統(tǒng),電極是血?dú)夥治鰞x的電化學(xué)傳感器。,離子
36、極----主要有K+、Na+、Li+、Ca2+、 Cl-、pH和pCO2 電極 伏安型傳感器----主要是PO2 電極,,電化學(xué)傳感器主要包括兩大類:,一般的血?dú)夥治鰞x使用四支電極: pH 電極 PCO2 電極 PO2 電極 pH 參比電極。,,1.pH電極和pH參比電極,血?dú)夥治鰞x使用毛細(xì)管pH
37、玻璃電極和甘汞電極測量溶液的酸堿度。,pH 測量系統(tǒng)示意圖,毛細(xì)管玻璃pH電極與甘汞電極結(jié)構(gòu)示意圖,此種電極的標(biāo)本用量為2?l,pH測定范圍為0?10。,,羅氏公司使用的參比電極,1958年使用的第一個(gè)三功能血?dú)夥治鰞x及其電極。,,2.PCO2電極,PCO2電極是根據(jù)J.Severinghaus原理設(shè)計(jì)的,故也稱為“Severinghaus”電極。,PCO2 測量系統(tǒng)示意圖,PCO2電極的基本組成部分----玻璃電極。,pH敏感的薄層玻
38、璃膜----厚約0.1mm,電極內(nèi)充溶液----含有KCl的磷酸鹽緩沖液, 其中浸有桿狀A(yù)g/AgCl電極,內(nèi)參比電極----環(huán)狀A(yù)g/AgCl電極,位于玻璃 電極桿的近側(cè)端。,玻璃電極與參比電極外面充滿PCO2電極外緩沖液,它的pH值隨血液的PCO2而改變。,玻璃電極膜與其有機(jī)玻璃外套一端的滲透膜之間放一片尼龍網(wǎng)或擦鏡紙,使兩者之間保證有一薄層電極溶液間隔。,作用原理:它將測
39、量室內(nèi)的血液與玻璃電極及其外面的HCO3-溶液分隔開,血液與玻璃電極及其外面的HCO3-溶液分隔開,只允許血液樣品中CO2分子通過,讓其溶解、水化,并建立電離平衡,使溶液中氫離子(H+)增加,因而使膜內(nèi)溶液pH值下降。由二氧化碳分壓電極的工作原理可知,待測溶液中pH值的變化與lgPCO2有線性關(guān)系。由pH電極測得pH值的變化量,經(jīng)反對數(shù)放大器轉(zhuǎn)換為PCO2,再用數(shù)字顯示。,滲透膜,---聚四氟乙烯膜、聚丙烯膜或硅橡膠膜,3.PO2電極,
40、PO2 電極是一種氣敏電極。O2 滲透膜用約20?m的聚丙烯膜或聚四氟乙烯膜,也有用聚乙烯、聚酯作電極膜。,PO2電極測量系統(tǒng)示意圖,PO2電極電流信號的產(chǎn)生原理見第一節(jié)所述。,電流的大小通常只有幾十納安(10-9A),故PO2電極所配的放大器為高輸入阻抗、低噪聲的微電流放大器。,當(dāng)PO2的值為零時(shí),電路中電流并不為零,存在一個(gè)微小的電流值,通常稱其為基流。在校準(zhǔn)PO2電極時(shí),需采用兩種氣體。先用不含氧的純CO2氣體通過測量管,將電路中
41、的基流調(diào)為零;用第二種標(biāo)準(zhǔn)氣體去測定PO2,便可得出PO2和電流的標(biāo)準(zhǔn)曲線。,(二)管路系統(tǒng),血?dú)夥治鰞x的管路系統(tǒng)比較復(fù)雜,是血?dú)夥治鰞x很重要的組成部分。 功能有完成自動定標(biāo)、自動測量、自動沖洗等。,管路系統(tǒng)結(jié)構(gòu),通常由氣瓶、溶液瓶、連接管道、電磁閥、正壓泵、負(fù)壓泵和轉(zhuǎn)換裝置等部分組成。,,血?dú)夥治鰞x的管路系統(tǒng)示意圖,1.氣路系統(tǒng),氣路系統(tǒng)用來提供PCO2和PO2兩種電極定標(biāo)時(shí)所用的兩種氣體。每種氣體中含有不同比例的氧和二氧化碳
42、。,壓縮氣瓶供氣方式,又叫外配氣方式氣體混合器供氣方式,又叫內(nèi)配氣方式,氣路系統(tǒng)的類型,,(1)壓縮氣瓶供氣方式,由兩個(gè)壓縮氣瓶供氣,一個(gè)含有5%的二氧化碳和20%的氧;另一個(gè)含10%的二氧化碳,不含氧。,經(jīng)過減壓后輸出的氣體,首先經(jīng)過濕化器飽和濕化后,再經(jīng)閥或轉(zhuǎn)換裝置送到測量室中,對PCO2和PO2電極進(jìn)行定標(biāo)。,濕化器是用水蒸氣將定標(biāo)氣體飽和濕化的裝置。,經(jīng)飽和濕化后的水蒸氣產(chǎn)生的壓力為恒定值。,(2)氣體混合器供氣方式,這種供氣
43、系統(tǒng)用儀器本身的氣體混合器產(chǎn)生定標(biāo)氣。,加到氣體混合器上來的空氣壓縮機(jī)產(chǎn)生的壓縮空氣和氣瓶送來的純二氧化碳?xì)怏w,二氧化碳的純度要求大于99.5%,氣體混合器將上述兩種氣體進(jìn)行配比、混合,最后產(chǎn)生類似于上述氣瓶內(nèi)氣體比例的兩種不同濃度的氣體。同氣瓶預(yù)混的供氣方式一樣,這兩種氣體也要經(jīng)濕化器后,才送給測量毛細(xì)管。,氣體混合器工作原理示意圖,2.液路系統(tǒng),液路系統(tǒng)具有兩種功能,一是提供pH值電極系統(tǒng)定標(biāo)用的兩種緩沖液,二是自動將定標(biāo)和測量時(shí)停
44、留在測量毛細(xì)管中的緩沖液或血液沖洗干凈。,需要四個(gè)盛放液體的瓶子,其中兩個(gè)盛放緩沖液1和緩沖液2,第三個(gè)盛裝沖洗液,第四個(gè)盛放廢液。,血?dú)夥治鰞x內(nèi)部具有兩個(gè)泵,一為真空泵,另一為蠕動泵。利用這兩個(gè)泵來完成儀器的定標(biāo)、測量和沖洗。,真空泵用來產(chǎn)生負(fù)壓,使廢液瓶內(nèi)維持負(fù)壓,靠此負(fù)壓去吸引沖洗液和干燥空氣,用于沖洗和干燥測量毛細(xì)管。真空泵還用于濕化器的快速充液。,蠕動泵用于抽吸樣品和定標(biāo)液。在定標(biāo)時(shí)用來抽取緩沖液到測量室。在測血樣時(shí)用來抽樣品
45、。,(三)電路系統(tǒng),將儀器測量信號進(jìn)行放大和模數(shù)轉(zhuǎn)換、對儀器實(shí)行有效控制、顯示和打印出結(jié)果,并通過鍵盤輸入指令。,作用:,某一血?dú)夥治鰞x的電路系統(tǒng)原理如下圖所示:,血?dú)夥治鰞x電路原理框圖,電極測量系統(tǒng)有選擇地檢測各種樣品成分,并轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的電極信號,這些信號經(jīng)各種的頻道被放大,再經(jīng)模數(shù)轉(zhuǎn)換后變成數(shù)字信號,經(jīng)微機(jī)處理、運(yùn)算后,由熒光屏顯示出來或從打印機(jī)打印出結(jié)果。,四、血?dú)夥治鰞x的維護(hù)、保養(yǎng)與故障排除,血?dú)夥治鰞x作為一種精密的分析儀器,操
46、作比較簡單,關(guān)鍵是日常的維護(hù)和出現(xiàn)問題后故障的排除。,(一)電極的保養(yǎng),電極是一種十分貴重的部件,應(yīng)注意保養(yǎng),盡量延長其壽命。,電極的保養(yǎng)一般是儀器自動進(jìn)行。,1.參比電極保養(yǎng),參比電極套需要定期更換。如果一天作100個(gè)樣品,每周應(yīng)更換一次;一般情況下兩周可更換一次;在樣品較少時(shí),可視具體情況延長更換時(shí)間。當(dāng)發(fā)現(xiàn)電極不再滲參比液,或滲漏孔處變成黃色或棕色時(shí),應(yīng)隨時(shí)更換。,更換鹽橋或電極內(nèi)的KCl溶液時(shí),除加入飽和的KCl溶液外,還需加入
47、少許的KCl結(jié)晶,使其在37℃ 恒溫條件下也達(dá)到飽和。,2.pH電極的保養(yǎng),不管是否使用pH電極,其使用壽命一般都為1?2年。,如果pH電極在空氣中暴露2h以上,應(yīng)將其放在緩沖液中浸泡6h?24h才能使用。,① 按血液→緩沖液(或生理鹽水)→水→空氣的順序進(jìn)行清洗。,蛋白質(zhì)粘附在電極表面:,② 或用隨機(jī)附送的含蛋白水解酶的清洗液或自配的0.1%胃蛋白酶鹽酸溶液浸泡30分鐘以上,用生理緩沖液洗凈后浸泡備用。,3.PCO2電極保養(yǎng),電極要經(jīng)
48、常用專用清潔劑清洗,如果經(jīng)清洗、更換緩沖液后仍不能正常工作時(shí),應(yīng)更換半透膜。,電極用久后,陰極端的磨砂玻璃上會有Ag或AgCl沉積。可用滴有外緩沖液的細(xì)砂紙磨去沉積物,再用外緩沖液洗干凈。,清洗沉積物、半透膜和電極的更換應(yīng)定期進(jìn)行。,4.PO2電極的保養(yǎng),PO2電極中干凈的內(nèi)電極端部和四個(gè)鉑絲點(diǎn)應(yīng)該明凈發(fā)亮。,每次清洗時(shí),都應(yīng)該用電極膏對PO2電極進(jìn)行研磨保養(yǎng)。,(二)儀器的日常保養(yǎng),1.每天檢查大氣壓力、鋼瓶氣體壓力; 2.每
49、天檢查定標(biāo)液、沖洗液是否過期,檢查氣泡室是否有蒸餾水; 3.每周更換一次內(nèi)電極液,定期更換電極膜; 4.每周至少沖洗一次管道系統(tǒng),擦洗分析室; 5.若電極使用時(shí)間過長,電極反應(yīng)變慢,可用電極活化液對pH、PCO2電極活化,對PO2電極進(jìn)行輕輕打磨,除去電極表面氧化層; 6.儀器避免測定強(qiáng)酸強(qiáng)堿樣品,以免損壞電極。若偏酸或偏堿液測定時(shí),可對儀器進(jìn)行幾次一點(diǎn)校正; 7.保持環(huán)境溫度恒定,避免高溫,以
50、免影響儀器準(zhǔn)確性和電極穩(wěn)定性。,(三)常見故障及其排除方法,蠕動泵管老化、漏氣或泵壞。需要更換管道或維修蠕動泵。,1.樣品吸入不良,2.樣品輸入通道堵塞,一般用強(qiáng)力沖洗程序?qū)⒀獕K沖出排除。如沖不走,可換上假電極,使轉(zhuǎn)換盤處于進(jìn)樣位置,用注射器向進(jìn)樣口中注蒸餾水,便可將血塊沖走。,(1)血塊堵塞,如毛細(xì)管斷在進(jìn)樣口內(nèi)等,可將樣品進(jìn)樣口取下來,將玻璃碎片捅出即可。,(2)玻璃碎片堵塞,3. pH定標(biāo)不正確,pH定標(biāo)液過期兩種定標(biāo)液接反儀
51、器接地不好。,,原因,4. PCO2定標(biāo)不正確,⑥ PCO2電極老化或損壞,應(yīng)更換電極。,① 鋼瓶中氣體壓力過低,應(yīng)更換氣瓶;,② 氣體管道破裂、脫落或氣路連接錯(cuò)誤,應(yīng)更換或重新連接管道;,③ PCO2內(nèi)電極液使用時(shí)間過長或內(nèi)電極液過期,應(yīng)更換內(nèi)電極液;,④ 氣室內(nèi)無蒸餾水或蒸餾水過少,使通過氣體未充分濕化,應(yīng)補(bǔ)充蒸餾水;,⑤ 電極膜使用時(shí)間過長或電極膜破裂,應(yīng)更換電極膜;,常見原因與PCO2定標(biāo)不正確的原因類似。,5. PO2定標(biāo)不正
52、確,6.定標(biāo)不正確,但取樣時(shí)不報(bào)警,標(biāo)本常被沖掉,③ 取樣不正確,混入微小氣泡,應(yīng)重新取樣。,① 分析系統(tǒng)管道內(nèi)壁附有微小蛋白顆?;蚣?xì)小血凝塊,使管道不通暢,應(yīng)沖洗管道;,② 連接取樣傳感器的連線斷裂,應(yīng)重新連接;,(1)了解常用的電解質(zhì)分析儀和血?dú)夥治鰞x。(2)了解電解質(zhì)分析儀和血?dú)夥治鰞x的日常維護(hù)常識。(3)了解電解質(zhì)分析儀和血?dú)夥治鰞x的常見故障排除方法。(4)熟悉pH電極、PCO2電極、PO2電極和參比電極的使用方法。(5
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