實驗微生物無菌接種分離和純化

1、實驗八 微生物無菌接種、分離和純化技術(shù),實驗?zāi)康?學(xué)習(xí)和掌握微生物無菌接種技術(shù)學(xué)習(xí)和掌握超凈工作臺的使用方法學(xué)習(xí)和掌握涂布分離和劃線分離等微生物分離純化技術(shù),實驗原理,微生物無菌接種技術(shù)在無菌條件下，用接種工具從原菌種中挑取少許菌體，接入到新培養(yǎng)基上擴大培養(yǎng)的技術(shù) 常用接種工具接種環(huán)：劃線、斜面轉(zhuǎn)接、液體培養(yǎng)基接種針：固體穿刺培養(yǎng)接種勾：多用于絲狀微生物轉(zhuǎn)接接種鏟：多用于絲狀微生物轉(zhuǎn)接 無菌移液管： 液體培養(yǎng)基間的接

2、種,實驗原理,無菌接種技術(shù)的注意事項要點：防止污染，嚴(yán)格的無菌操作接種場所必須進行嚴(yán)格的消毒處理（接種間）實驗室：在超凈工作臺上進行接種者的雙手要進行消毒處理，一般用75%酒精或0.01%新潔而滅擦洗接種工具、管、瓶口接種前后要通過灼燒滅菌塞子不能脫手,實驗原理,于接種之前打開接種室和超凈工作臺紫外燈消毒30min，同時打開風(fēng)機接種時必須關(guān)閉紫外燈,無菌接種技術(shù)的基本操作,轉(zhuǎn)接斜面 （斜面接種）,演示：斜面轉(zhuǎn)接,1、標(biāo)記,

3、2、左手持斜面,3、灼燒接種環(huán),4、取塞，灼燒管口,5、冷卻，取菌轉(zhuǎn)接,6、重?zé)芸冢w塞,7、重?zé)臃N環(huán),微生物的分離純化技術(shù),分離：從混雜的群體中把各種微生物分開純化：進一步分離，得到純培養(yǎng)物菌落純：由一個或幾個相同種細(xì)胞所得到的群體形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生物學(xué)特性基本相同的群體研究一般特性菌株純：由一個細(xì)胞繁殖得到的后代（純培養(yǎng)）應(yīng)用研究、生產(chǎn),微生物的分離,常用菌種分離方法——固體平板分離 倒平板法 （Pour-plate

4、Technique）涂布平板法（Spread-Plate Technique）平板劃線法 （Streak-Plate Technique）,倒平板法,,涂布平板法,1、取樣,2、沾燃燒酒精,3、灼燒,4、涂布,平板劃線法,分區(qū)劃線分離要點：僅第1次劃線需要取菌。其他每區(qū)劃線之前一定要把殘余的菌體燒掉；待接種環(huán)完全能卻后通過前1區(qū)劃線相隔的區(qū)域不要交叉接種環(huán)要在培養(yǎng)基表面劃線，不要空劃，也不要劃破培養(yǎng)基整個過程要無菌操作,實

5、驗內(nèi)容,1、倒平板：每人倒至少2個牛肉膏蛋白胨平板2、細(xì)菌斜面接種：每人1支，牛肉膏蛋白胨固體斜面培養(yǎng)基3、涂布法分離混合微生物：每組4個牛肉膏蛋白胨平板，不同稀釋度菌懸液4、劃線法純化分離：每人一個牛肉膏蛋白胨平板,實驗報告,1、培養(yǎng)基的配制和消毒滅菌（過程）2、微生物的無菌接種、分離和純化技術(shù)3、結(jié)果：劃線及涂布分離的效果4、分析討論 操作過程及結(jié)果中遇到的問題，解決方法,思考題,微生物接種時，采取哪些措施來防止雜