正丁醇和異丙醇對溶菌酶毒性效應(yīng)及作用機(jī)理研究.pdf

1、作為揮發(fā)性有機(jī)污染物(VOC)的其中成員，正丁醇和異丙醇廣泛應(yīng)用于各種生產(chǎn)活動(dòng)，由此導(dǎo)致空氣的污染并進(jìn)一步危害人類健康。因此對二者進(jìn)行環(huán)境毒理學(xué)研究勢在必行。本文選取溶菌酶作為生物大分子的代表，以分子毒理學(xué)理論作為研究指導(dǎo)，采用多種光譜技術(shù)、酶活性檢測和分子對接技術(shù)，研究正丁醇和異丙醇與溶菌酶相互作用時(shí)溶菌酶的構(gòu)像、活性的變化、微環(huán)境以及兩者的結(jié)合位點(diǎn)和結(jié)合模式等，并制定了有效的實(shí)驗(yàn)方法。
　　熒光光譜結(jié)果顯示正丁醇能夠和溶菌酶分

2、子結(jié)合并且使溶菌酶中的熒光基團(tuán)遠(yuǎn)離猝滅劑（正丁醇）。同步熒光和三維熒光的結(jié)果表明正丁醇改變了色氨酸殘基的微環(huán)境。紫外-可見光譜和圓二色光譜結(jié)果表明正丁醇改變了溶菌酶的二級結(jié)構(gòu)，進(jìn)而導(dǎo)致Q-螺旋的含量增加和B-折疊的含量減少。分子對接研究結(jié)果展示了正丁醇和溶菌酶二者的結(jié)合位點(diǎn)和結(jié)合力。酶活性實(shí)驗(yàn)正丁醇對溶菌酶的酶活影響很小，表明正丁醇沒有結(jié)合到溶菌酶的酶活中心。
　　熒光光譜結(jié)果顯示異丙醇導(dǎo)致溶菌酶的熒光發(fā)生猝滅，同步熒光結(jié)果表明色