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文檔簡介
1、黃瓜(Cucumis sativus L.)以水蘇糖作為體內(nèi)同化物的主要運輸形式，但其果實中卻只含有蔗糖、葡萄糖和果糖等可溶性糖。經(jīng)韌皮部遠距離運輸而來的水蘇糖到達庫器官后，如何卸載并轉(zhuǎn)化為蔗糖這一生理學(xué)過程一直不明。在亞細胞水平研究水蘇糖分解為蔗糖過程中的關(guān)鍵酶-α-半乳糖苷酶(EC3.2.1.22)的空間表達模式可為闡明該問題提供重要線索。 為此，本實驗構(gòu)建了由CaMV35S啟動子調(diào)控的、2種黃瓜α-半乳糖苷酶的增強型綠色熒
2、光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)融合表達載體。運用聚合酶鏈式反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)技術(shù)，以質(zhì)粒pCambia1303為模板擴增了CaMV35S啟動子序列；以質(zhì)粒pEGFP-N1為模板擴增了EGFP編碼序列；運用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(Reverse transcript-PCR，RT-PCR)技術(shù)，以黃瓜總RNA為模板擴增了黃瓜酸性α-半乳
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