白葉枯病菌脅迫下疣粒野生稻懸浮細胞的外分泌蛋白質組學分析.pdf

1、水稻白葉枯病是世界水稻生產中最嚴重的細菌性病害。該病由革蘭氏陰性菌黃單胞水稻變種(Xanthomonas oryzae pv.Oryzae,Xoo)引起，是我國水稻主產區(qū)的三大病害之一。目前，控制水稻白葉枯病最經濟有效的方法是種植抗病品種。然而白葉枯病菌的變異性很強，使得品種的抗病性很容易喪失。因此深入研究白葉枯病菌的致病機理和品種的抗性機制，并在此基礎上與育種、病害防控結合起來，對經濟有效的控制水稻白葉枯病爆發(fā)流行具有重要意義。

2、>　　 本研究以抗病品種疣粒野生稻（Oryza meyeriana）和感病品種日本晴(Oryzasativa L.ssp.japonica cv.Nipponbare)為研究對象，建立了熒光雙向電泳技術體系，分析抗病品種疣粒野生稻懸浮細胞在白葉枯病菌脅迫下24h的外分泌蛋白質組變化。主要研究內容如下:
　　 1.建立適用于雙向電泳分析的水稻懸浮細胞系外分泌蛋白質提取方法:利用苯酚結合甲醇醋酸銨沉淀法提取外分泌蛋白，此法在外分泌

3、蛋白的得率，雙向電泳的分辨率及重復性上均優(yōu)于三氯乙酸-丙酮沉淀法及硫酸銨沉淀法。
　　 2.利用熒光雙向電泳技術研究方法分析水稻抗病品種細胞系受水稻白葉枯脅迫后外分泌蛋白的變化:我們共發(fā)現有114個蛋白點的表達量發(fā)生顯著變化，其中34個蛋白點的表達量上調，70個蛋白點的表達量下調。質譜成功鑒定95個蛋白質，分類后獲得28個蛋白質點的相關信息，其中25個由疣粒野生稻合成。在這25個外分泌蛋白質中，18個蛋白點的表達量上調，7個蛋白