水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)畢業(yè)論文-南美白對蝦大棚養(yǎng)殖池弧菌檢測與分析

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文</b></p><p><b>　?。?0 屆）</b></p><p>　　南美白對蝦大棚養(yǎng)殖池弧菌檢測與分析</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專業(yè)班級 水產(chǎn)養(yǎng)

2、殖學(xué) </p><p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號 </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p><b>　　目錄</b>&l

3、t;/p><p>　　中文摘要………………………………………………………………………………1</p><p>　　英文摘要………………………………………………………………………………2</p><p>　　1.前言…………………………………………………………………………………3</p><p>　　1.1南美白對蝦…………………………………………

4、…………………………3</p><p>　　1.2大棚水產(chǎn)養(yǎng)殖的特點(diǎn)…………………………………………………………4</p><p>　　1.3弧菌對水產(chǎn)養(yǎng)殖的關(guān)系……………………………………………………5</p><p>　　1.4本研究的目的和意義…………………………………………………………5</p><p>　　2.材料與方法………………

5、…………………………………………………………6</p><p>　　2.1實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)與時(shí)間………………………………………………………………6</p><p>　　2.2樣品采集………………………………………………………………………6</p><p>　　2.3培養(yǎng)基…………………………………………………………………………6</p><p>　　

6、2.4培養(yǎng)和計(jì)數(shù)……………………………………………………………………6</p><p>　　2.5實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理與分析………………………………………………6</p><p>　　2.6菌種的鑒定……………………………………………………………………6</p><p>　　3.結(jié)果與分析………………………………………………………………………7</p>&l

7、t;p>　　3.1環(huán)境因數(shù)及對蝦生長的關(guān)系…………………………………………………7</p><p>　　3.2 弧菌總數(shù)及其變化……………………………………………………………8</p><p>　　3.3弧菌的種類組成……………………………………………………………11</p><p>　　4.小結(jié) ………………………………………………………………………………1

8、1</p><p>　　4.1南美白對蝦大棚養(yǎng)殖池弧菌總數(shù)變化情況…………………………………11</p><p>　　4.2大棚養(yǎng)殖池與室外養(yǎng)殖池弧菌數(shù)量的比較…………………………………12</p><p>　　4.3 TCBS培養(yǎng)基在蝦病治監(jiān)測中的應(yīng)用……………………………………… 12</p><p>　　致謝……………………………………

9、…………………………………………12</p><p>　　參考文獻(xiàn)……………………………………………………………………………13</p><p>　　南美白對蝦大棚養(yǎng)殖池弧菌檢測與分析</p><p>　　[摘要] 南美白對蝦是當(dāng)今世界上養(yǎng)殖產(chǎn)量最高的三大優(yōu)良蝦種之一。南美白對蝦是集約化高產(chǎn)養(yǎng)殖的優(yōu)良品種具有適應(yīng)性廣、抗病能力強(qiáng)、生長快、加工出肉率高、肉味鮮美等優(yōu)點(diǎn)

10、。南美白對蝦引進(jìn)初期，生長主要受到細(xì)菌性疾病的影響，后來逐步發(fā)展為受到病毒性疾病影響。目前，南美白對蝦養(yǎng)殖過程中的細(xì)菌性疾病和病毒性疾病共存，同時(shí)影響著南美白對蝦的生長?；【悄厦腊讓ξr養(yǎng)殖池中的自然菌群之一，當(dāng)對蝦健壯、環(huán)境條件優(yōu)良時(shí)，一般不會引起發(fā)病。但當(dāng)環(huán)境條件對病原菌的生長適宜時(shí)，病原菌大量滋生繁殖，表現(xiàn)致病性。2010年8月至2010年11月期間，對集約化大棚養(yǎng)殖南美白對蝦室內(nèi)和室外養(yǎng)殖池水樣及底部進(jìn)行弧菌檢測。通過對南美白對

11、蝦大棚養(yǎng)殖池弧菌的檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行研究與分析，將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與養(yǎng)殖狀況相比較，當(dāng)弧菌數(shù)量在1.2×103個(gè)/ml的范圍內(nèi)，南美白對蝦大棚集約化養(yǎng)殖可以正常進(jìn)行，當(dāng)弧菌數(shù)量達(dá)到1.5×103個(gè)/ml以上時(shí)，南美白對蝦大棚集約化養(yǎng)殖潛在疾病爆發(fā)的可能。</p><p>　　[關(guān)鍵詞] 南美白對蝦 大棚養(yǎng)殖 弧菌檢測 疾病防控 </p><p>　　Detecti

12、on And Analysis Of To Vibrio InPenaeus</p><p>　　Vannamei Greenhouse Farming Ponds</p><p>　　[Abstract] South American white shrimp is one of the world top three most productive elite shrimps. Th

13、e South America white shrimp has a lot of advantages, such as outgrowing, adaptability, good anti-virus ability, well-tasted, and the higher percentage of the process; it is the intensive, high productive elite breed. Wh

14、en South American white shrimp were at initial stage, the main effect factor of the shrimp’s growth is the bacterial disease, and then the viral disease take influence later. Cur</p><p>　　[Keywords] Penaeus

15、vannamei Trellis breeding Detection of Vibrio Disease Control and Prevention</p><p>　　南美白對蝦大棚養(yǎng)殖池弧菌檢測與分析</p><p><b>　　前言</b></p><p><b>　　1.1南美白對蝦</b>&l

16、t;/p><p>　　1.1.1南美白對蝦生物學(xué)性狀及分布</p><p>　　南美白對蝦（Penaeus vannamei Boone，1931）學(xué)名凡納對蝦，屬節(jié)肢動物門（Arthropoda）、甲殼綱（Crustacea）、十足目（Decapoda）、游泳亞目（Natantia）、對蝦科（Penaeidae）、對蝦屬（Penaeus）、Lito-penaeus亞屬，是廣溫廣鹽性熱帶蝦類[

17、1]。俗稱：又稱白肢蝦（white－leg shrimp）、白對蝦（white shrimp），以前翻譯為萬氏對蝦，外形酷似中國對蝦、墨吉對蝦，平均壽命至少可以超過32個(gè)月。成體最長可達(dá)24cm，甲殼較薄，正常體色為淺青灰色，全身不具斑紋。步足常呈白堊狀，故有白肢蝦之稱。額角尖端的長度不超出第1觸角柄的第2節(jié)，其齒式為5-9/2-4；頭胸甲較短，與腹部的比例約為1：3；額角側(cè)溝短，到胃上剌下方即消失；頭胸甲具肝刺及鰓角剌；肝剌明顯；第1

18、觸角具雙鞭，內(nèi)鞭較外鞭纖細(xì)，長度大致相等，但皆短小（約為第1觸角柄長度的1/3）；第l-3對步足的上肢十分發(fā)達(dá)，第4-5對步足無上肢，第5對步足具雛形外肢；腹部第4-6節(jié)具背脊；尾節(jié)具中央溝，但不具緣側(cè)剌。南美白對蝦原產(chǎn)于美洲太平洋沿岸水域，主</p><p>　　1.1.2南美白對蝦的經(jīng)濟(jì)價(jià)值</p><p>　　南美白對蝦具有生長快、個(gè)體大、抗病力強(qiáng)、營養(yǎng)需求低等優(yōu)點(diǎn)，對水環(huán)境因子變化

19、的適應(yīng)能力較強(qiáng)，離水存活時(shí)間長、對飼料蛋白含量要求低、出肉率高達(dá)65%以上等優(yōu)點(diǎn)，是集約化高產(chǎn)養(yǎng)殖的優(yōu)良品種，也是目前世界上三大養(yǎng)殖對蝦中單產(chǎn)量最高的蝦種[4]。南美白對蝦殼薄體肥，含肉率高，肉質(zhì)鮮美，營養(yǎng)豐富。收成后其耐活力較差，所以大多是速凍上市的。南美白對蝦人工養(yǎng)殖可以采取純淡水、半咸水、海水多種養(yǎng)殖模式，且其生長速度快，60天即可達(dá)上市規(guī)格；適鹽范圍廣（0－40‰），從自然海區(qū)到淡水池塘均可生長，從而打破了地域限制，且具耐高溫，

20、抗病力強(qiáng)；食性雜，對飼料蛋白要求低，35%即可達(dá)生長所需。是“海蝦淡養(yǎng)”的優(yōu)質(zhì)品種，使其養(yǎng)殖地域范圍擴(kuò)大。</p><p>　　1.1.3南美白對蝦的養(yǎng)殖現(xiàn)狀</p><p>　　據(jù)農(nóng)業(yè)部漁業(yè)局統(tǒng)計(jì)：2005年南美白對蝦養(yǎng)殖面積lO．16萬公頃，產(chǎn)量4O．76萬噸，占對蝦養(yǎng)殖面積、產(chǎn)量分別為44．10％、65．30％。海水養(yǎng)殖南美白對蝦，主要集中在南海的廣東、廣西、海南三省(區(qū))，2005

21、年養(yǎng)殖面積5．92萬公頃，產(chǎn)量36．5O萬噸， 占全國南美白對蝦養(yǎng)殖面積、產(chǎn)量分別為58．27％、89．55％。僅廣東省海水養(yǎng)殖南美白對蝦面積就達(dá)3．43萬公頃，產(chǎn)量l3．95萬噸，占全國南美白對蝦養(yǎng)殖面積、產(chǎn)量的33．76％、34．23％，說明其單產(chǎn)是很高的。我國淡水養(yǎng)殖南美白對蝦發(fā)展很快，2005年淡水養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá)44．O8萬噸，為海水養(yǎng)殖產(chǎn)量的108．15％。全國海、淡水養(yǎng)殖南美白對蝦產(chǎn)量達(dá)84．84萬噸，從南至北、從東至西都在養(yǎng)殖

22、，新疆高原地區(qū)養(yǎng)殖南美白對蝦也獲得成功，我國不愧是南美白對蝦養(yǎng)殖的大國[2]。內(nèi)陸水域養(yǎng)殖南美白對蝦，改變了養(yǎng)殖品種結(jié)構(gòu)，大大提高了水產(chǎn)養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益，但是內(nèi)陸大力發(fā)展南美白對蝦養(yǎng)殖，對生態(tài)的影響是喜憂參半。主要存在問題有：（1）南美白對蝦苗種退化（2）養(yǎng)成規(guī)范化操作有待提高（3）受疾病威脅嚴(yán)重[4]。</p><p>　　1.2大棚水產(chǎn)養(yǎng)殖的特點(diǎn)</p><p>　　傳統(tǒng)養(yǎng)殖模式對天氣、

23、海域和季節(jié)的依賴性強(qiáng)，市場需求、疾病暴發(fā)和受自然災(zāi)害影響等因素增加了產(chǎn)業(yè)管理的難度。生產(chǎn)率低是傳統(tǒng)養(yǎng)殖模式的癥結(jié)。而新型的大棚集約化養(yǎng)殖呈現(xiàn)出其綜合性的優(yōu)勢。在人為控制比較高的情況下，其穩(wěn)定性和可控性很強(qiáng)。第一，完全擺脫了對海域和天氣的依賴性，變室外露天養(yǎng)殖為封閉式室內(nèi)養(yǎng)殖。第二，養(yǎng)殖行為發(fā)生在人工的小環(huán)境中，具有很強(qiáng)的人為操作性和可控性，通過調(diào)整和改變養(yǎng)殖對象的放養(yǎng)時(shí)間或收獲時(shí)間，可以進(jìn)行反季節(jié)性生產(chǎn)，做到產(chǎn)品全年供給市場。達(dá)到增產(chǎn)增

24、值的目的。第三，通過全天候的生產(chǎn)控制，大棚集約化養(yǎng)殖可進(jìn)行循環(huán)式養(yǎng)殖，一年內(nèi)可進(jìn)行多茬生產(chǎn)。其高投入和高產(chǎn)出的特點(diǎn)，表現(xiàn)出集約化生產(chǎn)的高生產(chǎn)率，也帶來了極高的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。大棚集約化養(yǎng)殖符合了產(chǎn)業(yè)發(fā)展的方向，所以在某種程度上對傳統(tǒng)的養(yǎng)殖模式有取而代之之勢。利用塑料大棚養(yǎng)殖南美白對蝦簡便易行，具有養(yǎng)殖周期短、產(chǎn)量高、易管理等特點(diǎn)[4,24]。與傳統(tǒng)養(yǎng)殖模式相比，每年可養(yǎng)殖兩茬或三茬，產(chǎn)量提高數(shù)倍以上；由于錯(cuò)開了上市旺季，對蝦的價(jià)格較

25、高。但是大棚集約化養(yǎng)殖是高投入高產(chǎn)出的生產(chǎn)模式，其生產(chǎn)水體是高有機(jī)質(zhì)環(huán)境，具有高生物量，高有機(jī)成分，</p><p>　　傳統(tǒng)的養(yǎng)殖模式中養(yǎng)殖用水追求的是使用優(yōu)質(zhì)海水、新鮮海水進(jìn)行養(yǎng)殖，而大棚集約化養(yǎng)殖模式采用的是用穩(wěn)定海水進(jìn)行養(yǎng)殖。穩(wěn)定的海水不僅能減少了水環(huán)境因子的變化幅度，構(gòu)建成一個(gè)相對獨(dú)立的生態(tài)環(huán)境，降低發(fā)病率，還可以節(jié)約用水，帶來更大的經(jīng)濟(jì)效益。 但是，這種集約化生產(chǎn)是在有限水體中放養(yǎng)高密度的養(yǎng)殖對

26、象；大飼料量投喂；養(yǎng)殖期間水環(huán)境持續(xù)在高水溫狀態(tài)下。這就使得大棚集約化養(yǎng)殖的水環(huán)境表現(xiàn)出高生物量、高有機(jī)成分、高微生物量。例如殘留的餌料、大量的糞便和排泄物、死亡的個(gè)體、大量繁生的單細(xì)胞藻類和細(xì)菌。這種養(yǎng)殖用水的排放對自然環(huán)境是一種直接的污染，或是潛在的危害。</p><p>　　1.3弧菌與水產(chǎn)養(yǎng)殖的關(guān)系</p><p>　　在水產(chǎn)養(yǎng)殖初期，主要受到細(xì)菌性疾病的影響，后來逐步發(fā)展為受到病

27、毒性疾病影響。目前，水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中的細(xì)菌性疾病和病毒性疾病共存，一同影響著南美白對蝦的生長。</p><p>　　我國較為常見的對蝦疾病有紅腿?。t肢?。€眼病、爛鰓病、褐斑?。讱儾。?、弧菌病等[3,8,9]。其病原體主要有革蘭氏陰性桿菌：鰻弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、嗜水氣單胞菌等[5,23]。弧菌是一種水產(chǎn)養(yǎng)殖系統(tǒng)中的重要致病細(xì)菌，弧菌蝦病是一個(gè)的主要因素，糞大腸菌群（后進(jìn)先出糞合作室）是水質(zhì)監(jiān)測的一

28、個(gè)重要生物指標(biāo)，污染主要來自人類和動物糞便，糞大腸菌群對養(yǎng)殖水體結(jié)合因子試驗(yàn)和化學(xué)分析，集約化農(nóng)業(yè)生產(chǎn)條件和水的污染評價(jià)度提供了科學(xué)依據(jù)[9]。病原傳播途徑多為水質(zhì)惡化，光線過強(qiáng)等[5]。此外,通過合理施肥,繁殖小球藻等單細(xì)胞藻類,應(yīng)用光合細(xì)菌、凈水EM 菌等進(jìn)行生態(tài)調(diào)控,凈化水質(zhì)。整個(gè)養(yǎng)殖期間水質(zhì)始終保持“肥、爽、活、嫩”,可明顯減少蝦病,避免蝦池發(fā)生大批死亡的現(xiàn)象[6]。</p><p>　　倪純治，林燕順等

29、人于1995年發(fā)表的《海水養(yǎng)殖蝦池的幾種致病弧菌生態(tài)》，研究長毛</p><p>　　對蝦養(yǎng)成期間幾種弧菌致病生態(tài)變化規(guī)律及其與病害的關(guān)系。[8] Yossi Tal, Joy E. M. Watts, Harold J. Schreier于2005年8月發(fā)表《Anaerobic Ammonium-Oxidizing (Anammox) Bacteria and Associated Activity in Fi

30、xed-Film Biofilters of a Marine Recirculating Aquaculture System》，研究海水養(yǎng)殖系統(tǒng)中微生物的活動情況[6]。靳明建 ,季小敏 ,周亞文于2010年發(fā)表《塑料大棚養(yǎng)殖南美白對蝦技術(shù)要點(diǎn)》，在飼養(yǎng)管理中闡述了大棚養(yǎng)殖水體細(xì)菌控制對南美白對蝦生長的影響[5]。中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所、暨南大學(xué)水生生物研究所,水體富營養(yǎng)化與赤潮防治廣東省教育廳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 自2008年4

31、月至8月, 在廣東省汕尾市紅海灣凡納濱對蝦( Lito-penaeus vannamei) 高位池養(yǎng)殖基地全程采集養(yǎng)殖池塘水樣, 檢測水體細(xì)菌類群和理化因子, 分析養(yǎng)殖過程中細(xì)菌類群的數(shù)量變化規(guī)律及其與環(huán)境因子的關(guān)系[10]。</p><p>　　1.4本研究的目的及意義</p><p>　　大棚集約化養(yǎng)殖是新型的，是可進(jìn)行循環(huán)式養(yǎng)殖，一年內(nèi)可進(jìn)行多茬生產(chǎn)。其高投入和高產(chǎn)出的特點(diǎn)，表現(xiàn)出集

32、約化生產(chǎn)的高生產(chǎn)率，也帶來了極高的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。大棚集約化養(yǎng)殖是利用塑料大棚養(yǎng)殖南美白對蝦，具有簡便易行，具有養(yǎng)殖產(chǎn)量高、周期短、易管理等特點(diǎn)，符合產(chǎn)業(yè)發(fā)展的方向。與傳統(tǒng)養(yǎng)殖模式相比，每年可養(yǎng)殖兩茬或三茬，產(chǎn)量提高數(shù)倍以上。所以對其水環(huán)境的控制具有很大的意義。維持南美白對蝦養(yǎng)殖水環(huán)境除了理化指標(biāo)的控制外，維持一個(gè)小環(huán)境的微生物系統(tǒng)是十分重要的。顯然微生物的生物指標(biāo)是一個(gè)表現(xiàn)其水環(huán)境的一個(gè)很好指標(biāo)[1,11,15]。通過對養(yǎng)殖池水體

33、弧菌數(shù)量的檢測與分析 ，表現(xiàn)養(yǎng)殖水環(huán)境病原生物的狀態(tài)，為南美白對蝦集約化養(yǎng)殖疾病的防治提供有效的依據(jù)。 </p><p><b>　　2.材料與方法</b></p><p>　　2.1試驗(yàn)地點(diǎn)與時(shí)間</p><p>　　從2010年8月至2010年11月，每半個(gè)月到舟山旭旺養(yǎng)殖場定時(shí)定點(diǎn)采集一次，共6次，時(shí)間為8月16日，9月1日，9月16日，

34、10月1日，10月16日，11月1日，分別記為a、b、c、d、e、f。采集樣品的次數(shù)與時(shí)間對照情況，如表1所示，</p><p>　　表1 實(shí)驗(yàn)次數(shù)與日期對照表</p><p>　　Table 1 Number of experiments with the date table</p><p>　　采集養(yǎng)殖蝦池的水樣和水底沉積物。

35、預(yù)先選定三個(gè)養(yǎng)殖池，分別編號為1#，2#，3#。其中1#和2#池塘為室內(nèi)塑料大棚養(yǎng)殖池塘，3#池塘為室外露天養(yǎng)殖池塘。</p><p><b>　　2.2樣品采集</b></p><p>　　分別采集1#和2#池塘的水樣，3#池塘的水樣及底沉積物，于每次采樣時(shí)間為10:00--14:00，盛于滅菌的三角玻璃瓶中，放入泡沫箱中，在3h內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室立即進(jìn)行處理，并對上述池

36、塘的水溫、水體PH、水色、鹽度、蝦體生長情況進(jìn)行測定記錄。</p><p><b>　　2.3培養(yǎng)基 </b></p><p>　　分離弧菌的選擇培養(yǎng)基（TCBS）　酵母粉 5.0 , 蛋白胨10.0, 硫代硫酸鈉10.0, 枸櫞酸鈉10.0, 牛膽粉5.0, 牛膽酸鈉3.0 , 蔗糖20.0 , 氯化鈉10.0, 檸檬酸鐵1.0 , 溴麝香草酚蘭0.04, 麝香草酚

37、蘭0.04, 瓊脂15.0, pH值調(diào)制8.6 </p><p><b>　　2.4培養(yǎng)和計(jì)數(shù)</b></p><p>　　平板涂布計(jì)數(shù)法檢測水樣中細(xì)菌和弧菌數(shù)量。對采集來的樣品,各取0. 1 ml 稀釋液和原水樣至平板上,用滅菌玻珠滾動涂布,再按梯度稀釋到10-1、10-2、10-3濃度，分別將原樣、10-1、10-2、10-3濃度樣品及蒸餾水（空白對照組）接種到平

38、面培養(yǎng)基上（每種接種三個(gè)平面培養(yǎng)基以求平均）。接種后，把平板培養(yǎng)基置于30℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),培養(yǎng)24h和48h后，對TCBS平板上生成的黃色和綠色菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),選取30-300之間的培養(yǎng)基板進(jìn)行計(jì)數(shù)，同一組的數(shù)據(jù)求平均后，減去空白組換算出水樣和泥樣的數(shù)據(jù)，再計(jì)算出原水樣和原沉積物樣本的弧菌總數(shù)并分離出單菌落供種類鑒定。</p><p>　　2.5 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理與分析</p><p>　　整

39、理記錄下全部數(shù)據(jù)，結(jié)合采樣時(shí)間制作弧菌總數(shù)隨時(shí)間變化趨勢圖，直觀分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。發(fā)現(xiàn)24h培養(yǎng)與48h培養(yǎng)，無明顯差距。用excel制作表格，再制圖。將所得數(shù)據(jù)根據(jù)南美白對蝦養(yǎng)殖情況，經(jīng)行分析。</p><p><b>　　2.6菌種的鑒定</b></p><p>　　菌株純化后,先作培養(yǎng)特征,經(jīng)革蘭染色,細(xì)胞形態(tài)、運(yùn)動性、菌落顏色觀察，用杭州天和微生物制劑有限公司生產(chǎn)

40、的弧菌生化鑒定管，按“革蘭氏陰性桿菌新編碼鑒定”系統(tǒng)，結(jié)合《常見細(xì)菌系鑒定冊》[12]對菌株進(jìn)行檢索,鑒定到種。</p><p><b>　　3.結(jié)果與分析</b></p><p>　　3.1環(huán)境因素及對蝦生長關(guān)系</p><p>　　水質(zhì)環(huán)境是南美白對蝦養(yǎng)殖的根本基礎(chǔ)，水質(zhì)直接影響南美白對蝦的養(yǎng)成和收獲。由表2監(jiān)測結(jié)果可以知道，</p&

41、gt;<p>　　表 2 養(yǎng)殖池溫度、pH值、水色、鹽度、蝦長的變化</p><p>　　Table 2 The variation of temperature, pH, water color、salinity and shrimp long</p><p>　　檢測期間，南美白對蝦養(yǎng)殖池水溫變化總體是從8月上旬投入蝦苗開始逐漸下降，溫度范圍為33.5℃-19℃。1

42、#養(yǎng)殖池病害發(fā)生于九月下旬死亡，清池。2#養(yǎng)殖池在10月中旬大棚封頂，養(yǎng)殖水溫控制在22℃-25℃左右，溫度范圍為22℃-33.3℃,3#養(yǎng)殖池是室外養(yǎng)殖池，其溫度變化相對比較大，為19℃-33.5℃。養(yǎng)殖期間溫度穩(wěn)定下降。養(yǎng)殖水體PH變化比較平穩(wěn)，一般維持在,6.4-7.7之間。1#養(yǎng)殖池PH范圍為7-7.7，2#養(yǎng)殖池PH范圍為6.4-7.7，3#養(yǎng)殖池PH范圍為7.2-7.7，隨著養(yǎng)殖時(shí)間的增長，PH平穩(wěn)降低，其中2#養(yǎng)殖池在接近

43、捕撈時(shí)，PH降到最低為6.4，這期間的原因可能是因?yàn)槲r的有機(jī)代謝、排泄物等有機(jī)堆積，導(dǎo)致水質(zhì)環(huán)境PH降低。在養(yǎng)殖期間，大棚養(yǎng)殖池內(nèi)鹽度變化不是很明顯，維持在1.018-1.017之間。對養(yǎng)殖南美白對蝦生長狀況的測量，1#南美白對蝦在養(yǎng)殖中期死亡，養(yǎng)殖長度只為5cm，另外2個(gè)養(yǎng)殖池都正常捕撈，其中2#室內(nèi)養(yǎng)殖池蝦長為10cm左右,3#室外養(yǎng)殖池蝦長為7cm左右，室內(nèi)大棚養(yǎng)殖池的蝦長明顯大于室外養(yǎng)殖池。水色變化不大，沒有出現(xiàn)突變或異常現(xiàn)象。

44、</p><p>　　3.2弧菌總數(shù)及其變化</p><p>　　弧菌病是養(yǎng)殖南美白對蝦較常見的細(xì)菌性疾病。而弧菌的存在及其數(shù)量的多少是產(chǎn)生細(xì)菌性疾病的基本條件。由于大棚養(yǎng)殖需要定期排污，所以其底沉積物檢測不穩(wěn)定，因此只對室外養(yǎng)殖池進(jìn)行底沉積物檢測，數(shù)據(jù)列于如表3，</p><p>　　表3 水樣及底沉積物所含弧菌數(shù)</p><p>　　Ta

45、ble 3 Vibrio data records contained in water samples</p><p>　　檢測結(jié)果表明：3個(gè)采樣點(diǎn)均有弧菌檢出，檢出率100%。</p><p>　　圖1 1號池弧菌總數(shù)（10月上旬全池死亡）</p><p>　　Figure 1 Total vibrio of Pond No. 1 (Oct. 1 de

46、ath of the whole pool)</p><p>　　圖1表明，1#室內(nèi)養(yǎng)殖池內(nèi)水體弧菌數(shù)量變化為230～1840個(gè)/ml，養(yǎng)殖池半個(gè)月時(shí)間內(nèi)（a-b），弧菌數(shù)量突然爆發(fā)，從原來的230個(gè)/ml增到1840個(gè)/ml，9月下旬，南美白對蝦全池蝦病死亡。</p><p>　　圖2 2號池弧菌總數(shù)</p><p>　　Figure 2 Total vib

47、rio of Pond No. 2</p><p>　　圖2表明，2#室內(nèi)養(yǎng)殖池水體弧菌數(shù)量變化為46～1130個(gè)/ml，養(yǎng)殖池內(nèi)弧菌數(shù)量穩(wěn)定上升，在10月中旬達(dá)到最高值，在11月初南美白對蝦成功收獲。</p><p>　　圖3 3號池弧菌總數(shù)</p><p>　　Figure 3 Total vibrio of Pond No. 3</p>&

48、lt;p>　　圖3表明，3#室外養(yǎng)殖池水體弧菌數(shù)量變化為15～1180個(gè)/ml，養(yǎng)殖池內(nèi)弧菌數(shù)量穩(wěn)定上升，在10月初達(dá)到最高值，在10月下旬南美白對蝦成功收獲。</p><p>　　圖4 3號池沉積物弧菌總數(shù)</p><p>　　Figure 4 The total vibrio of sediments in Pond No. 3</p><p>　　

49、圖4表明，3#室外養(yǎng)殖池底沉積物弧菌數(shù)量變化為52～9800個(gè)/ml，9初月最高，為9.8×103mL-1，但之后迅速下降，趨于穩(wěn)定。</p><p>　　其中1#南美白對蝦養(yǎng)殖池內(nèi)的弧菌數(shù)目比其它養(yǎng)殖池高出1個(gè)數(shù)量級。弧菌繁殖速度迅速，弧菌數(shù)量在1.5×103個(gè)/ml以上，最后爆發(fā)細(xì)菌性疾病。2#室內(nèi)養(yǎng)殖池和3#室外養(yǎng)殖池都成功收獲，其弧菌數(shù)量都在1.2×103個(gè)/ml以下，沒有發(fā)

50、生全池死亡。2#南美白對蝦室內(nèi)養(yǎng)殖池弧菌數(shù)量的變化幅度比1#南美白對蝦室外養(yǎng)殖池穩(wěn)定，且養(yǎng)殖周期更長。3#南美白對蝦室外養(yǎng)殖池沉積物弧菌數(shù)量高于其水樣，且其變化幅度很大，通過對養(yǎng)殖過程的調(diào)查了解可知，在養(yǎng)殖過程中不定期施用了生石灰等底質(zhì)處理劑，這些物質(zhì)會沉積到池底，對沉積物中的細(xì)菌有明顯的殺滅作用，導(dǎo)致弧菌數(shù)量變化起伏很大，養(yǎng)殖中前期后迅速下降，趨于穩(wěn)定。大棚集約化養(yǎng)殖池需要定期排污，所以只對室外養(yǎng)殖池底沉積物進(jìn)行了檢測。</p&

51、gt;<p>　　3.3弧菌的種類組成</p><p>　　3個(gè)試驗(yàn)池獲得的弧菌菌株，通過生化鑒定管進(jìn)行細(xì)菌的生化鑒定，結(jié)果表明其弧菌種類為溶藻弧菌、副溶血弧菌和鰻弧菌，其共同的生化特征為革蘭氏陰性，具有運(yùn)動性。如表4所示，</p><p>　　表 4 弧菌的形態(tài)和大小</p><p>　　Tab 4 The shape and size of vi

52、brionic species</p><p>　　各池出現(xiàn)的弧菌雖存在著差異，但溶藻弧菌和副溶血弧菌為各持的優(yōu)勢種，各弧菌種的檢出率，如表5所示，</p><p>　　表5 養(yǎng)殖池弧菌的種類組成</p><p>　　Tab 5 Species composition of Vibrio in various ponds</p><p>　

53、　注：“﹢”表示存在的種，“﹣”表示不存在。</p><p>　　水體中溶藻弧菌的檢出率最高，其次是副溶血弧菌。</p><p><b>　　4．小結(jié)</b></p><p>　　4.1 南美白對蝦大棚養(yǎng)殖池弧菌總數(shù)變化情況</p><p>　　養(yǎng)殖系統(tǒng)中細(xì)菌數(shù)量與各種環(huán)境因子的關(guān)系并不是獨(dú)立存在, 而是相互影響、互相制

54、約。在養(yǎng)殖前期, 浮游微藻密度低[18], 光合作用放氧量低, 而細(xì)菌繁殖旺盛, 水體中生物都要耗氧; 隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長, 系統(tǒng)的營養(yǎng)物質(zhì)和生物代謝物不斷聚集,養(yǎng)殖動物耗氧顯著增加, 而浮游微藻密度呈指數(shù)增加[16,19,20], 光合作用產(chǎn)氧量增多, 這些環(huán)境因子的變化都直接影響細(xì)菌數(shù)量與分布。更值得注意的是, 養(yǎng)殖過程中氣候的變化(降雨、低溫、陰天等) 以及人為操作措施對養(yǎng)殖池塘中微生態(tài)變化都具有極其重要的影響, 乃至破壞養(yǎng)殖平衡

55、系統(tǒng)[14]?；【丘B(yǎng)殖池中的自然菌群之一，有些種類是魚、蝦、貝類的致病菌或條件致病菌。國內(nèi)外有過不少的報(bào)道，但是關(guān)于大棚養(yǎng)殖南美白對蝦及其水中弧菌數(shù)目與對蝦疾病的關(guān)系，國內(nèi)尚未有見有關(guān)報(bào)道[17,21,22]。試驗(yàn)期間測得正常捕撈養(yǎng)殖池的弧菌范圍是15～1180 mL-1, 結(jié)果表示，南美白對蝦出現(xiàn)異?；蛩劳雠c弧菌數(shù)量有密切關(guān)系，1#養(yǎng)殖池弧菌數(shù)目突發(fā)性增長，導(dǎo)致蝦池內(nèi)大量死亡。經(jīng)過對表2 數(shù)據(jù)的分析與總結(jié)，當(dāng)南美白對蝦大棚養(yǎng)殖池弧菌

56、數(shù)量與疾病發(fā)生呈現(xiàn)對應(yīng)關(guān)系，當(dāng)南美白對蝦大棚</p><p>　　4.2大棚養(yǎng)殖池與室外養(yǎng)殖池弧菌數(shù)量的比較</p><p>　　以弧菌菌總數(shù)檢測的幾個(gè)樣本來看，塑料大棚養(yǎng)殖環(huán)境由于水況穩(wěn)定，弧菌總數(shù)呈逐漸上升趨勢。室外露天養(yǎng)殖池由于氣候、沉積物等理化因子變動較大，弧菌菌總數(shù)變化情況沒有規(guī)律，因此其代表性可能不如大棚養(yǎng)殖指標(biāo)明顯。</p><p>　　4.3 TCB

57、S培養(yǎng)基在蝦病治監(jiān)測中的應(yīng)用</p><p>　　在TCBS 平板上的菌落顏色:副溶血性弧菌 為蘭色菌落;溶藻菌為黃色菌落;河弧菌為淡綠色菌落。通過對菌落的顏色觀察，可初步判斷出分離的菌株為哪一種菌。對蝦養(yǎng)殖中水質(zhì)生態(tài)變化的一個(gè)指標(biāo)是通過TCBS培養(yǎng)基計(jì)數(shù)弧菌菌群。在養(yǎng)蝦水質(zhì)監(jiān)測的過程中,如果水中弧菌菌群數(shù)量在培養(yǎng)基上大量生長,超過1.2×103個(gè)/ml3以上時(shí),此時(shí)目測養(yǎng)蝦池水色也發(fā)生很大變化。此現(xiàn)象

58、說明病原菌的抑制已經(jīng)崩潰,病原菌在水中及蝦體內(nèi)已大量增殖[13] 。當(dāng)弧菌在蝦體內(nèi)達(dá)到致病量，并在水中形成優(yōu)勢種群時(shí)，時(shí)間約需2～3 周,此時(shí)采取適當(dāng)?shù)拇胧?將為防治蝦病贏得寶貴時(shí)間。對于從事南美白對蝦大棚集約化養(yǎng)殖的廠家和養(yǎng)殖戶，養(yǎng)殖池內(nèi)弧菌總數(shù)這一生物指標(biāo)對南美白對蝦能否成功養(yǎng)成有很大的影響[14]。由于養(yǎng)殖基地大多設(shè)施簡陋，不具備實(shí)驗(yàn)室檢測分析水體弧菌總數(shù)的條件?？梢匝邪l(fā)簡易工具，如密封消毒TCBS平板培養(yǎng)基[16]，撕去包裝即可

59、涂布接種養(yǎng)殖池水樣，此外需要恒溫培養(yǎng)箱，用于培養(yǎng)接種過的弧菌菌。菌落的計(jì)數(shù)較易完成，因此便于監(jiān)控水體弧菌總數(shù)。養(yǎng)殖戶可以直接利用這個(gè)指標(biāo)，對集約化大棚養(yǎng)殖水環(huán)境的監(jiān)測，從而能更好的了解養(yǎng)殖水質(zhì)情況，保持良</p><p><b>　　[參 考 文 獻(xiàn)]</b></p><p>　　[1] 王錫榮 肖光明 文樂元。南美白對蝦。湖南農(nóng)業(yè)，2008.7</p>

60、<p>　　[2] 劉凌云，鄭光美，普通動物學(xué).北京：高等教育出版社，1997.238-250.</p><p>　　[3] 何大慶, 張恒, 潘艷波。南美白對蝦產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及可持續(xù)發(fā)展。2004.2</p><p>　　[4] 石俊艷、劉中等，營口、盤錦地區(qū)中國對蝦養(yǎng)成期蝦池水體細(xì)菌含量的變化，書產(chǎn)科學(xué)，1998</p><p>　　[5] 百度百科：ht

61、tp://baike.baidu.com/view/80037.htm </p><p>　　[6] 徐曉津，我國養(yǎng)殖對蝦細(xì)菌性疾病，集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，36102</p><p>　　[7] 靳明建,季小敏,周亞文,塑料大棚養(yǎng)殖南美白對蝦技術(shù)要點(diǎn),如東縣漁業(yè)技術(shù)推廣站,江蘇南通226400</p><p>　　[8] Yossi Tal, Joy E. M. Wat

62、ts, and Harold J. Schreier, AnaerobiAmmonium-Oxidizing(Anammox) Bacteria and Associated Activity in Fixed-Film Biofilters of a Marine Recirculating Aquaculture System</p><p>　　[9] 徐曉津、王軍，我國養(yǎng)殖對蝦細(xì)菌性疾病，《河北漁業(yè)》20

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67、n oystens ( Crassost rea vi rgi nica)to a protozoan pathogen ( Perki nsus mari nus) after sublethalexposure to tributyltin oxide [ J ] . Marine Environmental Re2serch ,1999 ;</p><p>　　[18] HESHILWOOD K, GREE

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