維生素c及制劑的質(zhì)量控制研究綜述

1、<p>　　摘要：維生素C，是一種無(wú)法通過(guò)人體自身合成的必需維生素，當(dāng)軀體缺乏此類維生素時(shí)將導(dǎo)致多種疾病，尤其是壞血病，其制劑在醫(yī)療保健各方面均發(fā)揮不可忽視的作用，因此，對(duì)各種維生素C制劑進(jìn)行質(zhì)量控制，對(duì)其能否更好地進(jìn)入機(jī)體、發(fā)揮相應(yīng)的療效具有重要意義。目前用于維生素C質(zhì)量控制的方法有很多，如滴定法、光度分析法、高效液相色譜法等，各方法各有各的特點(diǎn)，本文將對(duì)近年來(lái)有關(guān)維生素C制劑的質(zhì)量控制研究方法進(jìn)行綜述。</p>

2、<p>　　關(guān)鍵詞：維生素C；質(zhì)量控制；含量測(cè)定；</p><p>　　維生素C（vitaminC）又稱L-抗壞血酸（L-ascorbic acid），是一種水溶性維生素，能促進(jìn)骨膠原的生物合成，利于組織創(chuàng)傷口的更快愈合、促進(jìn)膠原蛋白的合成，防止牙齦出血、促進(jìn)牙齒和骨骼的生長(zhǎng)，防止牙床出血，防止關(guān)節(jié)痛、腰腿痛。還能促進(jìn)氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代謝，延長(zhǎng)肌體壽命、同時(shí)能改善鐵、鈣和葉酸的利用、改善脂肪

3、和類脂特別是膽固醇的代謝，能夠預(yù)防心血管疾病，堅(jiān)固結(jié)締組織，增強(qiáng)肌體對(duì)外界環(huán)境的抗應(yīng)激能力和免疫力，其參與體內(nèi)多種生化反應(yīng)，在生物氧化和還原作用以及細(xì)胞呼吸中起重要作用。最近更有科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，維生素C在預(yù)防癌癥、心臟病等都起了很重要的作用。市場(chǎng)上對(duì)維生素C的需求量在不斷增加，因此生產(chǎn)多種維生素C制劑以應(yīng)對(duì)各種需求，具有一定的必要性，而各種制劑能否更好地發(fā)揮相應(yīng)的醫(yī)療保健作用，則與其質(zhì)量息息相關(guān)，故對(duì)維生素C及其制劑的質(zhì)量控制研究勢(shì)在必行

4、，而又不可馬虎松懈。</p><p><b>　　1. 維生素C概況</b></p><p>　　維生素C是一種水溶性維生素，純品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無(wú)臭、味酸，久置色漸變微黃，水溶液呈酸性,具有較強(qiáng)的還原性，加熱或在溶液中易氧化分解，在堿性條件下更易被氧化，為己糖衍生物。易溶于水，能溶于乙醇，而不溶于氯仿或乙醚，熔點(diǎn)為190～192℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。</

5、p><p>　　分子結(jié)構(gòu)中具有二烯醇和內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)，且有兩個(gè)手性碳原子（C4、C5），不僅使維生素C性質(zhì)極為活潑，且具有旋光性,比旋度+20.5°至+21.5°。其分子中的二烯醇基具有極強(qiáng)的還原性，易被氧化為二酮基而成為去氫抗壞血酸，加氫又可還原為抗壞血酸，在堿性溶液或強(qiáng)酸性溶液中能進(jìn)一步水解為二酮古羅糖酸[1]。由于雙鍵使內(nèi)酯環(huán)穩(wěn)定，和碳酸鈉作用可生成單鈉鹽，不致發(fā)生水解，但在強(qiáng)堿中，內(nèi)酯環(huán)可水解

6、，生成酮酸鹽。具有糖類的性質(zhì)和反應(yīng)。</p><p>　　本品具有共軛結(jié)構(gòu)，在稀鹽酸溶液中于243nm波長(zhǎng)處有最大吸收，為560，可用于鑒別和含量測(cè)定。若在中性或者堿性條件中，最大吸收波長(zhǎng)紅移至265nm。</p><p>　　維生素C常見的劑型主要有注射劑、片劑、顆粒劑、泡騰片及膠囊劑等，由于維生素C特殊的化學(xué)特性，故總體的質(zhì)量控制及含量測(cè)定方法大同小異，大多是基于其具有強(qiáng)的還原性，可被

7、不同氧化劑定量氧化而進(jìn)行。因容量分析法簡(jiǎn)便快速、結(jié)果準(zhǔn)確，被各國(guó)藥典所采用，中國(guó)藥典中維生素C含量測(cè)定采用碘量法，此法測(cè)定時(shí)在判斷終點(diǎn)時(shí)可能產(chǎn)生人為的誤差，且新版藥店中碘滴定液的標(biāo)定改用硫代硫酸鈉反標(biāo)，增加了移液和判斷滴定終點(diǎn)的二重誤差。加上維生素C在含水介質(zhì)中，由于受光、空氣、溫度和pH影響，樣品溶液不穩(wěn)定使測(cè)定結(jié)果不理想[2]。故不少學(xué)者也嘗試著使用其他方法來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，2，6-二氯靛酚滴定法，電位滴定法、二甲苯二氯靛酚比色法、2，4

8、-二硝基苯肼比色法、熒光分光光度法、HPLC法、毛細(xì)管電泳法、比濁測(cè)定法、極譜法等也相繼發(fā)展。整體看來(lái)，近年來(lái)使用色譜法的文獻(xiàn)報(bào)道比較多，以下將對(duì)多年來(lái)的文獻(xiàn)報(bào)道進(jìn)行綜述。</p><p><b>　　2.含量測(cè)定方法</b></p><p>　　2.1 2，6-二氯靛酚滴定法</p><p>　　2，6-二氯靛酚為一染料，其顏色反應(yīng)表現(xiàn)為兩

9、種特性，一是取決于其氧化還原狀態(tài)，氧化態(tài)為深蘭色，還原態(tài)為無(wú)色；二是受其介質(zhì)的酸度影響，在堿性溶液中呈深蘭色，在酸性介質(zhì)中呈淺紅色。用蘭色的堿性指示劑標(biāo)準(zhǔn)溶液，對(duì)含有維生素C的酸性浸取液進(jìn)行氧化還原滴定，指示劑被還原為無(wú)色，當(dāng)?shù)竭_(dá)滴定終點(diǎn)時(shí)，多余的指示劑在酸性介質(zhì)中則表現(xiàn)為紅色，由指示劑的用量就可以計(jì)算樣品中還原性抗壞血酸的含量。</p><p>　　為解決2,6-二氯靛酚滴定法不適合用于有色溶液中的抗壞血酸測(cè)點(diǎn)

10、問(wèn)題，可以利用2,6-二氯靛酚能溶于有機(jī)溶劑的特點(diǎn)，以1,2-二氯乙烷為有機(jī)溶劑，用2,6-二氯靛酚滴定抗壞血酸，當(dāng)還原性抗壞血酸消耗殆盡，多滴入的2,6-二氯靛酚就會(huì)進(jìn)入有機(jī)層呈粉紅色，以此來(lái)判斷滴定終點(diǎn)。</p><p>　　2，6-二氯靛酚滴定法特別適宜用于測(cè)定還原型維生素C，新鮮果品中以還原型V c為主[3]。故此法也僅用于測(cè)定果蔬或果汁飲料內(nèi)的維生素C含量。</p><p>&l

11、t;b>　　2.2 薄層掃描法</b></p><p>　　薄層色譜法又稱原位定量薄層色譜掃描法，是指用一定的波長(zhǎng)的光照照射在薄層板或試紙上，對(duì)薄層色譜中有紫外或可見吸收的斑點(diǎn)或經(jīng)照射能激發(fā)發(fā)生熒光的斑點(diǎn)進(jìn)行掃描，將掃描得到的圖譜及積分值用于藥品定性定量的分析方法。</p><p>　　利用維生素C與2，6-二氯靛酚的特征反應(yīng)，制備2，6-二氯靛酚試紙，點(diǎn)樣后用薄層掃描法

12、測(cè)定維生素C片中的維生素C的含量，選擇290nm，420nm，雙波長(zhǎng)反射式鋸齒掃描結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，樣品中的其它輔料不干擾。王迎春等在利用此法測(cè)定維生素C片劑中維生素C含量后總結(jié)出，點(diǎn)樣時(shí)各點(diǎn)間距應(yīng)大于10mm，點(diǎn)樣量在3-8μl之間線性關(guān)系較好，當(dāng)點(diǎn)樣量為10μl時(shí)，線性關(guān)系較差[4]。</p><p><b>　　2.3 薄層色譜法</b></p><p>　　

13、薄層色譜法（TLC），系將適宜的固定相涂布于薄層板上，成一均勻薄層。待點(diǎn)樣、展開后，根據(jù)比移值（Rf）與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖的比移值（Rf）作對(duì)比，用以進(jìn)行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定的方法。</p><p>　　如維生素C銀翹片這類成分復(fù)雜的制劑中維生素C的檢驗(yàn)，可以用薄層色譜法，取相當(dāng)于維生素C1mg的制劑配成1ml的溶液，點(diǎn)樣5μg就能得到滿意的效果。蔡毓瓊等就采用硅膠GF254—CM C-Na

14、薄層板, 以正戊醇- 氯仿- 甲酸( 6∶2∶1) 為展開劑，在紫外燈( 254nm )下檢測(cè), Rf 值約0.6, 最低檢出量1μg,驗(yàn)證了此方法直觀可靠, 能得到滿意的結(jié)果。使用此法能使維生素C與制劑中其他成分完全分離，互不干擾。還能以斑點(diǎn)顏色深淺和大小初步判斷維生素C的含量高低，比化學(xué)方法檢測(cè)專屬性強(qiáng)，而且用量少，可適用于含維生素C的中藥制劑的鑒別[5]。</p><p>　　2.4 紫外分光光度法<

15、/p><p>　　紫外分光光度法的基礎(chǔ)是物質(zhì)對(duì)紫外光的選擇性吸收，是基于分子里價(jià)電子的能級(jí)之間的躍遷所產(chǎn)生的吸收。運(yùn)用此法具有分析速度快，重復(fù)性好，無(wú)污染等的特點(diǎn)，紫外吸收法除了與可見吸收光譜一樣，可以進(jìn)行定量分析，可以測(cè)定物質(zhì)的物理化學(xué)常數(shù)之外，還可以對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性的分析和結(jié)構(gòu)的分析。韓春雨[6]等人基于分光光度法測(cè)定雙組份的原理，在紫外光區(qū)測(cè)定了維生素C與維生素B混合物的含量，掃描雙組分樣品的吸收峰，根據(jù)吸收度的

16、加和性原理，以維生素C和維生素B的濃度為未知項(xiàng)組成的二元一次方程組，通過(guò)求解方程得到各自的真實(shí)值。</p><p>　　此外，還有重鉻酸鉀分光光度法以及磷鉬藍(lán)分光光度法。蔡卓等人以重鉻酸鉀為顯色劑，利用其與維生素C的褪色反應(yīng)，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)體系吸光度變化值，確定維生素C含量[7]。</p><p>　　磷鉬藍(lán)法是一種常用來(lái)測(cè)定微量磷含量的分光光度方法，利用磷鉬酸銨定量地與維生素C反應(yīng)，生成磷

17、鉬藍(lán)來(lái)測(cè)定其含量。該方法用過(guò)量的磷鉬酸銨測(cè)定微量的還原型維生素C，不會(huì)生成鉬藍(lán)，測(cè)試條件允許范圍較寬，抗干擾能力強(qiáng)，分析結(jié)果準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好[8]。適合于分析生物、藥物等試樣中微量維生素C的含量。</p><p>　　2.5 紅外分光光度法</p><p>　　紅外分光光度法是利用物質(zhì)對(duì)紅外光的選擇吸收特性來(lái)進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析、定性鑒定和定量測(cè)定的一種儀器分析方法。李銳等人以無(wú)水乙醇為溶劑對(duì)維

18、生素C片進(jìn)行提取，采用溴化鉀壓片法對(duì)維生素C進(jìn)行紅外的定性鑒別[9]。得到的紅外吸收光譜與對(duì)照品的完全一致，并與《藥品紅外光譜集》中的維生素C光譜一致，證明此法可行。</p><p>　　2.6 菲林B近紅外分光光度法</p><p>　　在pH3的三氯乙酸酸性介質(zhì)中，菲林B可以定量地將還原型維生素C氧化成脫氫型維生素C，利用脫氫型維生素C在920nm處有最大吸光度，測(cè)定其含量，此法是一種

19、測(cè)定維生素C的新方法，它是基于Folin B試劑與抗壞血酸在pH=3的三氯乙酸酸性介質(zhì)中反應(yīng)生成脫氫抗壞血酸，該方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確。楊婷[10]等人利用此法對(duì)水果中的維生素C進(jìn)行了試驗(yàn)，經(jīng)樣品測(cè)定，結(jié)果令人滿意。</p><p>　　2.7 毛細(xì)管電泳法</p><p>　　毛細(xì)管電泳是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分

20、離的電泳分離分析方法。陳剛[11]等用毛細(xì)管電泳電化學(xué)柱端檢測(cè)法同時(shí)測(cè)定了復(fù)方蘆丁片中的蘆丁和維C，但電化學(xué)檢測(cè)法存在電極制備比較困難，操作繁瑣的缺點(diǎn)。故李向軍[12]等在此基礎(chǔ)上改用紫外檢測(cè)法測(cè)定復(fù)方蘆丁片，優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果令人滿意。</p><p>　　2.8 高效液相色譜法</p><p>　　高效液相色譜法是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同

21、極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。劉國(guó)如[13]等人以維生素C注射液為研究對(duì)象，采用氨基柱，用磷酸二氫鉀液和乙腈混合液（體積比1:1）為流動(dòng)相，測(cè)定維生素C含量，結(jié)果準(zhǔn)確。張國(guó)鋒[14]等人采用反向高效液相離子對(duì)色譜法，以對(duì)氨基苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，測(cè)定了復(fù)方蘆丁片中蘆丁與維生素C的量。李玉明[15]等人進(jìn)行了新型高效液相色譜分析法的研究，以

22、超純水為流動(dòng)相, 流動(dòng)相的速度為1.0ml/min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為267nm，柱溫在25～30℃的條件下分析維生素C，結(jié)果具有良好的線性關(guān)系, 其相關(guān)系數(shù)R2=0.9994；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差等于0.74%。</p><p><b>　　3.總結(jié)</b></p><p>　　維生素C制劑的質(zhì)量，從原料藥的選擇，生產(chǎn)中的實(shí)際操作到產(chǎn)后產(chǎn)品的貯存均受多種因素的影響，但本質(zhì)仍由其

23、結(jié)構(gòu)決定，結(jié)構(gòu)決定性質(zhì)，性質(zhì)決定分析方法。綜上，維生素C質(zhì)量控制的測(cè)定方法很多，各方法各特點(diǎn)，在含量測(cè)定方面，常用的方法為滴定法，該方法簡(jiǎn)單、簡(jiǎn)便，而碘量法更是被應(yīng)用于維生素C多種劑型的含量測(cè)定，但在滴定有色物質(zhì)時(shí)終點(diǎn)不易判斷，分光光度法快捷，但操作費(fèi)時(shí)，而高效液相色譜法是目前發(fā)展較快的一種方法，簡(jiǎn)便、靈敏、可靠，選擇性好，有較好的發(fā)展前景，相信隨著藥物分析技術(shù)的發(fā)展，將會(huì)發(fā)現(xiàn)更多具有效率高、分析時(shí)間短、樣品處理簡(jiǎn)單的分析方法，讓我們拭

24、目以待！</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　[1] 賽麗曼，苦爾班江.碘量法測(cè)水果蔬菜中維生素C的含量[J].伊犁師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，3（9）：28-29.</p><p>　　[2] 蔣江云.HPLC法測(cè)定維生素C片含量[J].齊魯藥事，2012，31（11）：642-644.</p><

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