黃瓜CsMAPK基因的植物病毒載體構(gòu)建及長春花種質(zhì)資源多樣性分析.pdf

1、本文利用簡并引物PCR和RACE 技術(shù)，從黃瓜中克隆到CsMAPKcDNA的保守序列，運用NCBI 中Blastx 進行氨基酸同源比對結(jié)果表明，克隆的這個保守區(qū)序列與其他植物的MAPK基因有很高的同源性（>80％），其中與擬南芥ATMPK20基因同源性最高（90％）。同源性比對結(jié)果表明已成功克隆到了黃瓜CsMAPK 保守序列。另外，利用軟件做出的一個保守區(qū)同源進化樹，同樣說明克隆到了黃瓜CsMAPK 保守序列。 為進一步驗證該序列

2、的功能，基于病毒誘導(dǎo)基因沉默的原理，將構(gòu)建煙草花葉病毒載體，建立黃瓜RNA 干擾體系，對該基因進行功能驗證。 由于長春花具有很強的觀賞價值，開花時期長，品種多樣，花色鮮艷，將廣泛應(yīng)用于2010年上海市世博會。本文利用分子標記分析了長春花種質(zhì)資源遺傳多樣性，為長春花的遺傳育種研究提供一定參考。 本論文優(yōu)化了長春花ISSR-PCR 體系，并利用ISSR 分子標記技術(shù)對40個長春花種質(zhì)資源進行了遺傳關(guān)系分析，多態(tài)性PCR 擴增

3、結(jié)果表明：在115個位點，其中多態(tài)位點78個，多態(tài)位點百分率為67.8％，多態(tài)性較高；POPGENE32軟件計算結(jié)果表明，40個長春花品種平均有效等位基因數(shù)為1.6384，Nei 遺傳多樣性指數(shù)平均為0.3735，平均Shannon 信息指數(shù)為0.5546；應(yīng)用NCSYS軟件計算得到品種間的遺傳相似系數(shù)介于0.150～0.900，平均為0.584。通過聚類分析將這40個長春花種質(zhì)分成7組，該聚類結(jié)果與以前根據(jù)形態(tài)進行的分類結(jié)果有極大的相