TRAP在評價棉花種質(zhì)資源多樣性中的應(yīng)用研究.pdf

1、本研究應(yīng)用目標(biāo)區(qū)域擴增多態(tài)性(Target Region Amplification Polymorphism，TRAP)分子標(biāo)記技術(shù)對來自國內(nèi)外的65份棉花種質(zhì)資源進行了遺傳多樣性分析。主要結(jié)果如下： 1.獲得適用于棉花的TRAP-PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)程序為： 反應(yīng)體系(15μl反應(yīng)體系)為：48ng模板DNA；0.9 mmol/L Mg2+；dNTP1.26 mmol/L；固定引物0.5pmol/L；隨機引物0.1p

2、.mol/L和0.75UTaq酶。 反應(yīng)程序為：94℃預(yù)變性4min；94℃變性45s，35℃退火45s，72℃延伸1 min；5個循環(huán)；94℃變性1 min，52℃退火1min，72℃延伸1 min；35個循環(huán)，72℃延伸7min；4℃保存。 2.對65份棉花材料進行TRAP標(biāo)記分析的結(jié)果表明，被測材料間TRAP標(biāo)記多態(tài)性較高，10個引物共擴增出252條帶，其中210條(占83.33％)具有多態(tài)性。每對引物平均可擴增出

3、21條多態(tài)性。在NTSYS-pc Version2.11統(tǒng)計分析軟件系統(tǒng)中，用UPMGA法進行聚類分析，遺傳相似性系數(shù)(GS)為0.8431時，65份種質(zhì)資源可以分為6類。TRAP標(biāo)記可將其中的61份材料區(qū)分開。 3.基于TRAP標(biāo)記數(shù)據(jù)的聚類結(jié)果與材料形態(tài)特征和材料地理分布有一定的關(guān)系?？偟膩碚f，TRAP技術(shù)可以為棉花的系統(tǒng)演化和遺傳背景的研究提供幫助。 4.對于新海16與新海20上出現(xiàn)的特異性條帶進行回收克隆測序，4