耐鹽促生和生防細菌的鑒定及混合培養(yǎng)研究.pdf

1、新疆屬干旱半干旱地區(qū)，現(xiàn)有耕地面積的31.1％受到鹽堿危害，而鹽漬化耕地的80％屬次生鹽漬化，嚴重影響了棉花和番茄種子的萌發(fā)與出苗，成為制約新疆棉花和番茄發(fā)展的主要因素。為了解決這一地區(qū)性問題，本文在微生物對棉花、番茄促生防病的前期工作基礎(chǔ)上，研究5株菌的混合培養(yǎng)，旨在為復(fù)合菌劑的規(guī)?；a(chǎn)和應(yīng)用提供科學(xué)理論依據(jù)。其中，2株細菌為耐鹽促生細菌，能夠提高農(nóng)作物在鹽堿土壤環(huán)境下的耐受性；3株細菌為生防細菌，能夠防治農(nóng)作物苗期病害。實驗主要包

2、含以下5方面內(nèi)容： 1、菌株的鑒定和拮抗共生性研究：利用菌株的形態(tài)特征、生理生化特征和16S rDNA序列同源性對具有耐鹽促生和防病作用的細菌Rs-198、SL-13、SL-14和SL-44進行鑒定。初步鑒定結(jié)果表明，Rs-198為熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)，SL-13、SL-14和SL-44均為萎縮芽孢桿菌(Bacillus atrophaeus)；將Rs-5、Rs-198、SL-13、SL

3、-14和SL-44五株細菌兩兩組合測試菌株問的相互作用，結(jié)果顯示Rs-5拮抗SL-13； Rs-198拮抗SL-13、SL-14； SL-13拮抗SL-14； SL-44拮抗SL-13、SL-14；其余任意組合均能共生。 2、混合培養(yǎng)條件研究：選取可以共生的耐鹽促生細菌Rs-198和Rs-5組合進行混合培養(yǎng)。首先，根據(jù)菌株Rs-5和Rs-198在不同溫度和不同初始pH培養(yǎng)基中的生長情況，確定混合培養(yǎng)溫度為28℃和初始pH為6.5

4、；其次，通過分析Rs-198和Rs-5在不同比例混合方式下，葡萄糖的殘余量、生物量的生成及pH的變化，揭示菌株間具有協(xié)同增長作用，確定最佳混合濃度比為106:106。 3、培養(yǎng)基優(yōu)化：Rs-198和Rs-5以每毫升含活菌數(shù)106:106的濃度配比混合，通過多因素正交實驗優(yōu)化混合培養(yǎng)基為：葡萄糖25g/L；蛋白胨35g/L；酵母粉15g/L；Na2 HPO4·12H2O10g/L； MgSO4-7H2O1.2g/L； KH2PO4

5、3.63g/L。 4、混合防效試驗：盆栽試驗表明，使用混合菌劑可提高發(fā)芽率22.1％，大田實驗表明，混合菌劑可使畝產(chǎn)量提高10.05％，進而驗證了混合菌劑的防效作用。 5、混合菌劑的貨架期：將不同菌體制成水劑置于常溫避光處保存，每隔一個月檢測一次活菌數(shù)。結(jié)果表明，貯存5個月后，Rs-5、SL-14、BCL-8水體菌劑的活菌濃度分別升高1.63、1.72、1.20個對數(shù)級；而Rs-198、SL-13、SL-44的水體菌劑的