葡萄高溫脅迫對(duì)水楊酸誘導(dǎo)的蛋白激酶活性的影響.pdf

1、本研究以葡萄品種克瑞森無核（Vitis vinifera L.cv.Crimson Seedless）二年生扦插苗為試材，分三組處理，第一組，在25℃條件下，噴施水楊酸（Salicylic Acid，SA）濃度為150μmol·L-1，30 min后取樣，并以噴施蒸餾水為對(duì)照（CK）；第二組，在45℃高溫處理30min，并以25℃為對(duì)照；第三組，噴施SA濃度為150μmol·L-1后，在45℃高溫下處理30 min后取樣，并以噴施蒸餾水

2、后45℃處理30 min為對(duì)照（CK）。采用體外底物磷酸化方法對(duì)三組處理的葡萄葉片中蛋白激酶的活性進(jìn)行了測定，探討三組處理對(duì)葡萄葉片蛋白激酶活性的影響，為進(jìn)一步研究SA、高溫引起的葡萄植株體內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)提供依據(jù)。 試驗(yàn)結(jié)果表明，三組處理均激活了葡萄葉片中能將底物MBP磷酸化的蛋白激酶，當(dāng)MBP（myelin basic protein）濃度為0.5mg·ml-1時(shí)，三組處理的蛋白激酶活性達(dá)到最大值，而后，隨底物濃度的增加，活性開

3、始出現(xiàn)下降趨勢。該蛋白激酶對(duì)底物Histone-Ⅲ的作用很微弱，即使反應(yīng)體系中有Ca2+存在時(shí)，蛋白激酶活性仍然沒有提高，因此可以初步表明此蛋白激酶不是CDPK家族中的成員。在以MBP為底物的反應(yīng)體系中，ATP濃度為50μmol·L-1時(shí)，蛋白激酶活性活性最高，當(dāng)ATP濃度為70μmol·L-1時(shí)，蛋白激酶活性下降到最低點(diǎn)；反應(yīng)時(shí)間以10min為宜，反應(yīng)10min時(shí)，三組處理（水楊酸處理、高溫處理、交叉處理）的蛋白激酶活性分別達(dá)到最大值