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1、環(huán)境和諧型綠色農(nóng)藥是當(dāng)代農(nóng)藥發(fā)展的必然趨勢(shì),從天然化合物中篩選農(nóng)藥活性物質(zhì)或農(nóng)藥先導(dǎo)化合物是綠色農(nóng)藥研發(fā)的重要途徑之一。本試驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn),來自小孢擬盤多毛孢的代謝產(chǎn)物對(duì)多種田間常見雜草均有較強(qiáng)的殺滅活性,且持續(xù)期長(zhǎng),具有作為生物除草劑的開發(fā)潛力。本試驗(yàn)對(duì)固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)產(chǎn)生除草活性物質(zhì)的能力進(jìn)行了比較,探討了小孢擬盤多毛孢高效產(chǎn)毒的條件,對(duì)代謝產(chǎn)物中具有除草活性的組分進(jìn)行了分離研究,并初步確定了除草活性物質(zhì)的除草機(jī)理以期為該病菌
2、的高效開發(fā)利用提供一定的理論依據(jù)。試驗(yàn)結(jié)果如下:
1.對(duì)液體培養(yǎng)和固體培養(yǎng)進(jìn)行了比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與液體發(fā)酵相比,固體發(fā)酵具有發(fā)酵周期短、除草效果強(qiáng)、成本低廉等特點(diǎn)。因此確定固體發(fā)酵培養(yǎng)是小孢擬盤多毛孢最為適合的培養(yǎng)方式。
2.對(duì)固體培養(yǎng)的條件進(jìn)行優(yōu)化分析。發(fā)現(xiàn),小米和玉米渣是小孢擬盤多毛孢最為適合的固體培養(yǎng)基,最適培養(yǎng)時(shí)間為8 d,最適宜溫度為30℃,pH值對(duì)除草活性物質(zhì)的產(chǎn)生沒有顯著影響,此外,在培養(yǎng)基中加
3、入0.5 g葡萄糖可以顯著提高除草活性物質(zhì)的產(chǎn)量。
3.通過對(duì)小孢擬盤多毛孢代謝產(chǎn)物的萃取溶劑進(jìn)行摸索,發(fā)現(xiàn)利用乙酸乙酯直接萃取提取的粗毒素除草活性最好。TLC分離的最佳展開劑配方為乙酸乙酯∶石油醚=1∶1和丙酮∶石油醚=2∶1。以TLC分析結(jié)果為依據(jù)進(jìn)行連續(xù)柱層析分析,結(jié)果得到一種粉末狀固體。生物測(cè)定發(fā)現(xiàn),該物質(zhì)的除草活性與粗提物相比并沒有顯著降低。將該物質(zhì)進(jìn)行高效液相色譜分析后得到一個(gè)具有較高除草活性的純組分。
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