土霉素高效降解菌的篩選及其降解特性研究.pdf

1、土霉素(Oxytetracycline)是全球銷量最大的抗生素之一，也是畜禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖中被廣泛應用的一種廣譜抗生素，大量的應用已導致該藥在環(huán)境中的殘留，其殘留不僅會引導耐藥菌株的形成，還會嚴重破壞生態(tài)環(huán)境，由此引發(fā)的污染問題必將出現(xiàn)。生物降解是近幾年來發(fā)展起來的處理環(huán)境中殘留獸藥的有效方法之一。本文以土霉素降解菌的篩選研究為主線，建立高效降解菌的篩選模型并進行菌株降解特性的研究。 本論文首先建立了無機鹽培養(yǎng)基中土霉素含量的HPL

2、C檢測方法，培養(yǎng)基采用Mcllvaine緩沖液為提取劑提取土霉素，以乙腈：KH2PO4溶液(0.05mol/L)(16:84，V/V)為流動相進行HPLC分析。土霉素在培養(yǎng)基中的回收率為86.95％～91.68％、日內(nèi)變異系數(shù)范圍為2.20％～3.70％、日間變異系數(shù)范圍為4.10％～6.10％，最低檢測限(LOQ)為0.01mg/L。 在相對貧乏的培養(yǎng)基中加入土霉素，以其為唯一碳源作為限制性條件構(gòu)建菌株篩選模型。采用直接涂布分

3、離法得到5株菌，1株有降解活性，命名為2＃菌株，該菌株降解土霉素能力穩(wěn)定且降解率較高，經(jīng)過革蘭氏染色觀察和生理生化試驗，初步鑒定該菌株為蠟樣芽孢桿菌。 以2＃菌株為目標菌，研究pH值、溫度、底物濃度、裝樣量、外加碳氮源、金屬離子對其生長量和降解特性的影響。2＃菌株在pH7.0，溫度為35℃，底物濃度在50mg/L，250mL三角瓶裝樣量為80mL時能夠維持較高的降解率。添加少量的外加碳、氮源能夠提高菌株對土霉素的降解率。在添加0

4、.5％可溶性淀粉的條件下，2＃菌株對初始濃度為50mgL/的土霉素3d的降解率為79.48％，在添加0.5％酵母浸液的條件下，2＃菌株對初始濃度為50mgL/的土霉素3d的降解率為87.65％。金屬離子對菌株降解土霉素的速率也有很大的影響。本實驗研究了K+，Ba2+，Cu2+，Mn2+，F(xiàn)e3+，Cr3+，2n2+，C03+和Pb2+共9種金屬離子對菌株降解土霉素的影響，其中添加0.1％的Fe3+和Zn2+時可提高菌株對土霉素的降解率，