秤錘樹組織培養(yǎng)及其內(nèi)生菌的分離鑒定.pdf

1、本研究分別從植物組織培養(yǎng)、愈傷組織的生理生化特征以及內(nèi)生菌和植物的相互關(guān)系等方面入手，為探索秤錘樹快速繁殖提供有益的線索。以秤錘樹幼嫩葉片作為外植體，添加不同種類不同濃度配比的植物生長(zhǎng)調(diào)劑，誘導(dǎo)獲得不同形態(tài)、不同質(zhì)地的愈傷組織。對(duì)獲得的愈傷組織做酶活性分析，分析添加不同激素作用下，抗氧化酶酶活性的變化。從室外取樣葉片中分離秤錘樹內(nèi)生菌株，通過無菌苗回接實(shí)驗(yàn)，研究秤錘樹與其內(nèi)生菌之間的相互關(guān)系。研究結(jié)果如下：
　　 秤錘樹葉片愈傷

2、組織的誘導(dǎo)：在供試條件下，不同的激素組合都能誘導(dǎo)出愈傷組織，愈傷組織的質(zhì)量及出愈率和出愈時(shí)間都同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類和濃度密切相關(guān)。在培養(yǎng)基中添加不同濃度的2，4-D，與0.25-2mg/L的KT組分時(shí)，能夠獲得致密、團(tuán)塊狀且生長(zhǎng)快速的愈傷組織。而6-BA和NAA組合誘導(dǎo)獲得的愈傷組織雖然生長(zhǎng)比較慢，但獲得的愈傷顏色呈白色，較為干燥，近球形，致密，顆粒比較小，而且愈傷組織上有不定根的發(fā)生，在愈傷組織形態(tài)上與由2，4-D作用的差別很大。在

3、以另一株幼齡秤錘樹作為研究材料時(shí)發(fā)現(xiàn)：添加低濃度的生長(zhǎng)素誘導(dǎo)不定根的發(fā)生，高濃度的生長(zhǎng)素誘導(dǎo)愈傷組織的形成。
　　 室內(nèi)無菌苗的擴(kuò)繁與生根：無菌苗擴(kuò)繁其適宜的培養(yǎng)基為WPM+6-BA（1.0mg/L）+NAA（1.0mg/L），無菌苗生根其適宜的培養(yǎng)基為WPM+6-BA（0.05mg/L）+NAA（2.0mg/L）+AC（0.05％），生根率80％。
　　 在不同濃度2，4-D和KT組合下，隨著2，4-D濃度的提高，SO

4、D活性逐漸降低，而POD活性卻相差不大，PPO活性呈先升高后降低的趨勢(shì)，MDA含量呈逐漸升高的趨勢(shì)。PPO活性和可溶性蛋白含量呈反相關(guān)，MDA含量同SOD活性也呈反相關(guān)。
　　 從秤錘樹室外葉片中共分離獲得11株菌株，7株為真菌，4株為細(xì)菌，對(duì)其中的6株真菌菌株做ITS測(cè)序，在NCBI網(wǎng)上進(jìn)行比對(duì)，有5株菌株為球毛殼菌（Chaetomiumglobosum），另一株為子囊菌（ascomycete）。回接秤錘樹組培苗實(shí)驗(yàn)表明：分離