糙皮側(cè)耳優(yōu)良雜交子篩選與側(cè)耳屬野生菌株馴化栽培研究.pdf

1、本試驗以糙皮側(cè)耳（Pleurotus ostreatus）4個栽培菌株HP（華平特白）、PG30（平高30）、JG3（姬菇3號）、PG981（平菇981）為試驗材料，采用單單雜交與雙單雜交兩種不同雜交方式獲得雜交子進(jìn)行育種試驗，經(jīng)過秋栽和春栽篩選農(nóng)藝性狀優(yōu)良的雜交子。野外采集得到兩野生菌株子實體并進(jìn)行組織分離，基于ITS序列分析對兩野生菌株進(jìn)行鑒定，期望能馴化栽培出菇獲得新的種質(zhì)資源。
　　 以鎖狀聯(lián)合為遺傳標(biāo)記，利用原生質(zhì)體單

2、核化技術(shù)得到4個栽培菌株兩種不同交配型的單核體，用單單雜交與雙單雜交兩種不同雜交方式將4個栽培菌株之間相互進(jìn)行完全配對雜交，結(jié)合拮抗試驗和ISSR分子標(biāo)記鑒定雜交子。運用灰色關(guān)聯(lián)度法對供試菌株的8個農(nóng)藝性狀進(jìn)行綜合比較，結(jié)合鮮菇總產(chǎn)量鄧肯多重比較篩選雜交子?；贗TS序列構(gòu)建兩野生菌株的同源進(jìn)化樹，對兩野生菌株進(jìn)行鑒定。對未能出菇的張家界野生菌株利用原生質(zhì)體技術(shù)再生出雙核體，將再生雙核體萌發(fā)的雙核菌絲進(jìn)行馴化栽培出菇試驗。
　　

3、 試驗結(jié)果表明，華平特白、平高30、平菇981兩種交配型單核體的比例存在偏分離現(xiàn)象。4個供試菌株的8個單核體相互完全配對雜交，結(jié)合與雙親本的拮抗試驗單單雜交配對得到13個雜交子。正反雙單雜交完全配對得到13個雜交子。運用ISSR分子標(biāo)記對雜交子進(jìn)行了遺傳分析，從40個引物中篩選出5個條帶重復(fù)性好、譜帶清晰的引物，擴(kuò)增結(jié)果采用軟件NTSYS2.10e計算菌株間的遺傳相似系數(shù)，并進(jìn)行聚類分析。聚類結(jié)果顯示33個雜交子GS值變化范圍0.31～

4、0.94，進(jìn)一步驗證了雙單雜交子的可靠性。灰色關(guān)聯(lián)度與鮮菇產(chǎn)量鄧肯多重比較結(jié)果確定了雜交菌株27號，26號、19號、37號，28號、30號等6個優(yōu)良雜交子，春季栽培觀察結(jié)果顯示該6個雜交菌株性狀表現(xiàn)穩(wěn)定。采用PCR產(chǎn)物克隆測序獲得兩野生菌株ITS序列，測序后與其相似系數(shù)最高的前10位菌株進(jìn)行同源性分析，鑒定出武當(dāng)山野生菌株為佛羅里達(dá)側(cè)耳，張家界野生菌株為鳳尾菇。
　　 上述研究表明單單雜交及雙單雜交均可獲得農(nóng)藝性狀優(yōu)于親本的雜交