脲酶-波氏法測定飼料中尿素及無機(jī)氮類物質(zhì)的研究.pdf

1、隨著我國集約化養(yǎng)殖業(yè)規(guī)模的擴(kuò)大，畜禽的存欄量迅速增長，但與此同時(shí)也帶來了諸如畜禽糞便環(huán)境污染、動(dòng)物性食品安全、人畜爭糧等問題，其中后者是限制畜禽養(yǎng)殖進(jìn)一步發(fā)展的主要瓶頸。據(jù)資料報(bào)道，我國2000年的蛋白質(zhì)飼料缺口為1190萬噸，相當(dāng)于3216萬噸餅粕或1.7萬噸谷物的蛋白含量，這一趨勢近年來還在發(fā)展。而要解決這一問題，一方面要大力推廣草食家畜(禽)的養(yǎng)殖，另一方面也要加大開發(fā)其他蛋白類飼料的力度。當(dāng)前國內(nèi)已經(jīng)有企業(yè)開始生產(chǎn)混有非蛋白氮物

2、質(zhì)的反芻動(dòng)物專用飼料，這些飼料一方面能夠以其低價(jià)格優(yōu)勢在市場競爭中贏得客戶，另一方面也降低了養(yǎng)殖行業(yè)對于蛋白質(zhì)類飼料的依賴程度。不過目前國內(nèi)并沒有很好地建立起非蛋白氮飼料生產(chǎn)的監(jiān)管體系，導(dǎo)致目前市場上產(chǎn)品類型眾多、產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，還有一些生產(chǎn)廠家沒有對產(chǎn)品應(yīng)用做出詳細(xì)說明致使在生產(chǎn)中出現(xiàn)了很多誤用、濫用的情況。
　　 尿素及硫酸銨等無機(jī)氮類物質(zhì)常被用來添加入反芻動(dòng)物等的飼料中作為蛋白質(zhì)補(bǔ)充料使用，一方面可以發(fā)揮反芻動(dòng)物利用非蛋

3、白氮類物質(zhì)的優(yōu)勢，另一方面能夠節(jié)約飼料成本。但也有一些不法廠商通過將此類物質(zhì)添加到魚粉等飼料原料或不能夠利用此類物質(zhì)的單胃動(dòng)物飼料中來替代其中的一些蛋白質(zhì)飼料，降低生產(chǎn)成本，以獲取不正當(dāng)利益。
　　 目前，有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對此類物質(zhì)的檢測主要是針對尿素，例如ISO66541991(E)和AOAC的動(dòng)物飼料中尿素含量的測定方法以及國家水產(chǎn)質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心制定的魚粉中摻加尿素含量的測定(GB/T19164-2003)等國際國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)。這些標(biāo)準(zhǔn)

4、中都一致推薦使用對二甲基苯甲醛法作為飼料中尿素含量檢測的首選方法，不過從查閱到的資料中發(fā)現(xiàn)，該方法應(yīng)用的并不是很多，且文章中報(bào)道的內(nèi)容大多數(shù)是對這些標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的延伸。從各標(biāo)準(zhǔn)及文章中關(guān)于該方法的描述來看，該方法的特異性較差且提供的樣品前處理過程復(fù)雜。這或許是限制該方法在生產(chǎn)中應(yīng)用的一個(gè)主要原因。
　　 本研究通過將廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)及其他領(lǐng)域的脲酶-波氏比色法進(jìn)行適當(dāng)改良，使其能夠適用于分別測定飼料中的尿素和其他無機(jī)氮類物質(zhì)的含量

5、。試驗(yàn)結(jié)果表明，該方法在實(shí)際飼料樣品測定中表現(xiàn)出了較好的效果，具有簡單、準(zhǔn)確、靈敏、特異等優(yōu)點(diǎn)。該反應(yīng)體系測定飼料樣品中尿素及其他無機(jī)氮類物質(zhì)含量時(shí)，反應(yīng)溶液中含氮量的最佳線性濃度范圍為0～40μg、方法的最低檢測限為0.095μgN，樣品中尿素最低檢測濃度為0.41mg/kg；反應(yīng)中飼料樣品的處理采用加水、酶解、離心的方式進(jìn)行；在實(shí)際飼料樣品的測定中該方法表現(xiàn)出了具有良好的準(zhǔn)確性、精密性和重復(fù)性，不同尿素濃度下，各樣品間的添加回收率均