外源亞精胺緩解黃瓜幼苗鹽脅迫傷害的蛋白質組學及抗氧化機制研究.pdf

1、南京農業(yè)大學博士學位論文外源亞精胺緩解黃瓜幼苗鹽脅迫傷害的蛋白質組學及抗氧化機制研究姓名：杜長霞申請學位級別：博士專業(yè)：蔬菜學指導教師：郭世榮201006外源亞精胺緩解黃瓜幼苗鹽脅迫傷害的蛋白質組學及抗氧化機制研究47)]裂解后按800“g上樣，梯度低壓除鹽進行第一向等電聚焦達到總時間電壓積為35000Vh，膠條平衡后進行第二向垂直的SDSPAGE(125％)電泳，考馬斯亮藍染色后獲得背景清晰、蛋白質分辨率較高的雙向電泳圖譜。外源Spd

2、對鹽脅迫下黃瓜幼苗根系蛋白質組影響的研究：比較對照和鹽脅迫處理的根系2DE圖譜發(fā)現(xiàn)了34個差異表達蛋白點，29個蛋白點成功得到鑒定，其中21個蛋白點在鹽脅迫下上調，spot12(液泡ATP合成酶催化亞基A)、spot13(熱激蛋白70)、spot21(類GRP蛋白2)和spot34(線粒體蘋果酸脫氫酶)，表現(xiàn)出強烈的鹽誘導特性；8個蛋白點在鹽脅迫下下調，spot19(丙酮酸脫氫酶E1組分B亞基)、spot24(果糖二磷酸醛縮酶)和spo

3、t33(抗壞血酸過氧化物酶)，表現(xiàn)出強烈的鹽抑制特性。外源Spd處理改變鹽脅迫介導的差異蛋白質的積累特性，2759％的差異蛋白參與代謝、2413％參與防御脅迫反應、1724％是調節(jié)蛋白，其它為能量和轉運、蛋白質生物合成和功能未知等蛋白這些結果暗示：外源Spd介導鹽脅迫下黃瓜幼苗根系蛋白質的差異調節(jié)，可能通過修正代謝途徑響應鹽脅迫，增強黃瓜植株耐鹽性外源Spd對黃瓜幼苗鹽逆境應答蛋白基因表達的影響：除apx和叼，其它8個候選轉錄子與對應的

4、蛋白豐度表現(xiàn)出了一致的轉錄積累特性，且hsp70、apx、czsod、ela和cat3對鹽脅迫反應最大，推測這幾個轉錄子與黃瓜植株耐鹽性有關。除napod、uq和apx，其它7個候選轉錄子響應外源Spd積累特性與它們相應蛋白響應Spd的積累特征一致，且5a11哩5、napod和cat3對外源Spd處理反應最大，推測外源Spd增強黃瓜植株耐鹽性可能與這幾個轉錄子關系密切表明大多數(shù)候選蛋白轉錄積累特性與誘導蛋白積累特性一致，外源Spd從轉錄

5、水平上調節(jié)了鹽脅迫下差異蛋白的表達，增強黃瓜植株耐鹽性外源Spd對鹽脅迫下黃瓜幼苗活性氧代謝的影響：NaCI脅迫下，葉片和根系自由基的產(chǎn)生速率、H202和MDA含量顯著增加，POD和SOD活性提高。外源Spd處理進一步提高鹽脅迫下黃瓜幼苗葉片乖根系中POD和SOD的活性，同時降低自由基的產(chǎn)生速率、H202和MDA含量，在葉片中分別檢測到5條IsOD同工酶、5條SOD同工酶和2條CAT同工酶條帶，在根系中分別檢測到7條POD同工酶、4條S