福建柑桔種質(zhì)的RAPD分析及龍眼LEAFY基因克隆和表達(dá)的研究.pdf

1、本論文中“福建柑桔種質(zhì)的RAPD分析”部分，對柑桔基因組DNA的提取方法作出探索。在參考有關(guān)RAPD分析的反應(yīng)體系和程序的基礎(chǔ)上，對影響PCR擴(kuò)增的重要參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)，確立了適合柑桔大量樣品PCR反應(yīng)的優(yōu)化體系和反應(yīng)程序。篩選出擴(kuò)增多態(tài)性較高的引物21條，對從福建各地所采集的54份柑桔材料(包括雜柑種質(zhì))進(jìn)行RAPD鑒定分析，并探討了它們之間的差異和親緣關(guān)系；此外，對聚類結(jié)果中幾個(gè)品種間的差異和親緣關(guān)系進(jìn)行了再次聚類分析，以

2、驗(yàn)證第一次的聚類結(jié)果。結(jié)果表明，在遺傳距離D值=0.45水平上，54份柑桔材料基本上可以聚為三大類，與常規(guī)的柑桔屬分類相同，即金柑屬、枳屬、柑桔屬，表現(xiàn)出較遠(yuǎn)的親緣關(guān)系；在遺傳距離D值=0.39水平上，柑桔屬種質(zhì)又可分成三類。這充分表明了福建柑桔種質(zhì)的遺傳背景復(fù)雜，種質(zhì)資源遺傳差異大；同時(shí)也說明了使用RAPD技術(shù)對柑桔種質(zhì)資源遺傳多樣性及其之間的親緣關(guān)系鑒定的可行性和可靠性。 本論文中“龍眼LEAFY基因克隆和表達(dá)的研究”部分，

3、對龍眼總RNA和基因組DNA的提取方法進(jìn)行了優(yōu)化；根據(jù)柑桔、葡萄、梨、蘋果和芒果等果樹上已克隆得到的LFY同源基因的保守區(qū)序列，設(shè)計(jì)合成兼并引物，在龍眼果樹上克隆得到了長度分別為425bp和1816bp龍眼中的LFYcDNA和DNA片段，且都已經(jīng)在GenBank中登錄，其登記號分別是DQ247694和DQ307391；利用定量RT-PCR方法，將兼并引物重新合成特異引物，對此基因在龍眼不同器官組織中的表達(dá)情況進(jìn)行了研究分析，實(shí)驗(yàn)得知LF