油菜突變體庫構(gòu)建與激素反應基因克隆分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、激活標記技術(activation tagging)是構(gòu)建功能獲得突變體為研究對象,在植物功能基因組學的研究中具有重要的作用。該技術在模式植物擬南芥中已經(jīng)得到廣泛的應用,但是在油菜中還未見報道。
　　 本研究以優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的油菜品種1244W6為材料,采用浸花蕾方法,將含有激活標記和Basta篩選標記質(zhì)粒pSKI015的農(nóng)桿菌進行轉(zhuǎn)化,成功構(gòu)建了油菜激活標記突變體庫。通過Basta篩選,結(jié)果共獲得約30000個轉(zhuǎn)基因株系(T1代)。

2、轉(zhuǎn)化效率約為1％。對突變體庫的T1代轉(zhuǎn)基因植株表型進行觀察,共發(fā)現(xiàn)39個株系有明顯的表型變化,約占轉(zhuǎn)化植株總數(shù)的千分之五,包括葉色、分枝數(shù)、植株的育性以及開花期等方面的變異。這將為開展油菜分子遺傳學研究提供豐富的資源。將突變體T2代種子播種在含不同濃度植物激素的營養(yǎng)液中,結(jié)果篩選出激素反應突變體63個。這些激素反應突變體的獲得,為揭示油菜激素代謝調(diào)控及激素調(diào)控油菜生長發(fā)育、產(chǎn)量和含油量的分子機理提供了材料。采用TAIL-PCR技術,克隆

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