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文檔簡介
1、Cyt蛋白是由蘇云金芽孢桿菌以色列亞種(Bacillus thuringiensis.subsp.Israelensis,Bti)在芽形成孢階段產(chǎn)生的δ-內(nèi)毒素組成。本研究根據(jù)己報道在NCBI上的cyt2B基因序列,設(shè)計特異引物對Bt LLP29菌株中總DNA進行PCR擴增,得到大小約為1,000bp的類似cyt2B基因,對該基因進行克隆、表達,確定了菌株中cyt2B基因的存在,以pGEX-KG為表達載體構(gòu)建cyt2B基因的表達重組質(zhì)粒
2、,并對其殺蚊活性進行測定,從而試圖探索Cyt2B蛋白的生物活性及其在菌株中的生物功能。
結(jié)果表明,經(jīng)PCR擴增、克隆、測序,獲得序列大小約為1,000bp的基因全序列,序列里包含兩個ORF,大小分別為789 bp和117 bp,其中789bp編碼約為262個氨基酸,與文獻中Cyt2B蛋白的氨基酸大小一致。利用NCBI上的Blast在線軟件進行比較,發(fā)現(xiàn)10個Bt cyt2B基因序列以及多個基因組片段,其中與己報道的cyt2
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