ABA誘導(dǎo)的玉米葉片ZmCCaMK活性研究及亞細(xì)胞定位.pdf

1、在植物生長(zhǎng)過(guò)程中，脫落酸（ABA）是一種重要的調(diào)節(jié)因子。從脫落酸的產(chǎn)生到激發(fā)生理反應(yīng)要經(jīng)過(guò)一系列相互緊密聯(lián)系的級(jí)聯(lián)環(huán)節(jié)。蛋白激酶所催化的蛋白質(zhì)磷酸化過(guò)程在細(xì)胞生命活動(dòng)的許多過(guò)程中都起著重要的調(diào)節(jié)作用，并在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中處于核心地位。Ca2+/CaM依賴蛋白激酶（Calcium and Calmodulin dependent kinase或稱CCaMK）是真核細(xì)胞中普遍存在的信號(hào)組分，由逆境脅迫、細(xì)胞因子、植物激素、生長(zhǎng)因子等誘導(dǎo)，并在

2、植物信號(hào)中發(fā)揮重要的作用。因此，揭示脫落酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中相關(guān)CCaMK的生理功能具有重要科學(xué)意義。
　　 本研究以玉米（Zea/714225 L.）雜交種農(nóng)大108為材料，研究了ABA、H2O2和NO誘導(dǎo)玉米ZmCCaMK在葉片中翻譯后活性調(diào)節(jié)情況。主要研究結(jié)果如下：
　　 外源ABA（100μM）和PEG（10％）處理均能夠顯著誘導(dǎo)ZmCCaMK的激酶活性上調(diào)；而ABA合成抑制劑fluridon（FLU）的施用明顯抑制

3、了干旱脅迫下ZmCCaMK的活性，暗示干旱脅迫下ZmCCaMK表達(dá)增強(qiáng)依賴于干旱脅迫誘導(dǎo)的ABA積累。
　　 外源H2O2（10 mM）能夠顯著誘導(dǎo)ZmCCaMK的激酶活性。采用H2O2清除劑DMTU（10 mM）和NADPH氧化酶抑制劑DPI（100μM）預(yù)處理發(fā)現(xiàn)ABA誘導(dǎo)的ZmCCaMK活性被抑制，暗示ABA誘導(dǎo)的H2O2參與ABA誘導(dǎo)的ZmCCaMK活性的調(diào)控作用。
　　 采用Ca2+螯合劑EGTA（5 mM）和

4、通道阻斷劑LaCl3（5 mM）抑制劑，CaM抑制劑W7、TFP，CaMK專(zhuān)一性抑制劑KN-93預(yù)處理發(fā)現(xiàn)ABA和H2O2誘導(dǎo)的ZmCCaMK活性被抑制，暗示玉米葉片中ABA誘導(dǎo)的ZmCCaMK屬于鈣和鈣調(diào)素依賴的蛋白激酶成員。
　　 NO供體SNP（100μM）能夠顯著誘導(dǎo)ZmCCaMK的激酶活性。采用NO清除劑cPTIO和NOS抑制劑L-NAME預(yù)處理明顯抑制ABA和H2O2誘導(dǎo)玉米葉片的ZmCCaMK活性，表明NO參與了A