甘蔗己糖轉運蛋白基因啟動子pPST2a的功能研究.pdf

1、啟動子是基因表達調控的重要元件。在轉基因植物中,啟動子是影響轉基因表達效率的重要因素之一,選擇高效率的啟動子是高效率表達外源基因的關鍵。組成型啟動子,在轉基因植物的研究中得到了廣泛運用。但是組成型啟動子不能從時間和空間上有效地調控目的基因的表達,在作物的遺傳改良中存在一定的缺陷。組織特異啟動子作為一類專一性啟動子,能指導外源基因在植物發(fā)育過程中某一特定時空表達,它不僅能使目的基因的表達產物在一定空間積累,增加區(qū)域表達量,避免植物營養(yǎng)的浪

2、費。因此,尋找一個在甘蔗中高效表達或者特異的啟動子,對甘蔗遺傳改良有重要義。
　　 本實驗室克隆了甘蔗己糖轉運蛋白基因PST2a基因5'上游1968bp的啟動子序列,命名為pPST2a。為了進一步鑒定它的功能,我們構建了它一系列的缺失表達載體:pCBI1900、pCBI1600、pCBI1300、pCBI1100;又通過農桿菌介導法對甘蔗進行了遺傳轉化并獲得一批轉化植株;對這些轉化植株分別進行了GUS基因的PCR檢測,證實獲得轉

3、pCBI1900、pCBI1600、pCBI1300和pCBI1100的陽性植株分別為16、33、29、和21株;從每個載體獲得的轉基因植株中,選出生長良好的,進行根、莖、葉、葉芽、葉鞘、五個部位的GUS基因表達的檢測(GUS組織化學染色定位法),證明GUS基因在轉pCBI1900、pCBI1600和pCBI1300植株中的根部均有表達,而其余部位未見其表達;轉pCBI1100植株中,任何部位均沒有表達;證明了pCBI1900、pCBI