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文檔簡介
1、碭山酥梨(Pyrus bretschneideri cv.)原產(chǎn)安徽省碭山縣,是我國梨的主栽品種和主要出口品種之一。但是由于近年來管理不善、品種退化等原因,使得石細(xì)胞含量明顯增加,肉質(zhì)變粗、多渣,口感變差,嚴(yán)重降低了碭山酥梨的品質(zhì)及其經(jīng)濟(jì)價值。因此,通過生物學(xué)等手段降低石細(xì)胞含量,提高碭山酥梨品質(zhì),以增強(qiáng)碭山酥梨市場競爭力成為亟待解決的問題。本實驗以碭山酥梨果實為材料,研究碭山酥梨果實發(fā)育過程中石細(xì)胞含量、木質(zhì)素含量及木質(zhì)素合成關(guān)鍵酶苯
2、丙氨酸解氨酶(PAL)活性變化,找到梨石細(xì)胞發(fā)育與PAL的關(guān)系。并對PAL的酶學(xué)特性進(jìn)行研究,以期了解梨PAL的性質(zhì),同時克隆PAL基因,為從生理生化及分子生物學(xué)水平調(diào)控碭山酥梨石細(xì)胞發(fā)育提供理論基礎(chǔ),主要研究結(jié)果如下:
1、通過對五種梨果實切片觀察發(fā)現(xiàn)碭山酥梨、貢梨和豐水梨石細(xì)胞團(tuán)較大,分布較密集;碭山酥梨石細(xì)胞團(tuán)最大,分布最密集;庫爾勒香梨石細(xì)胞團(tuán)較小,分布較疏散。蘋果梨,石細(xì)胞團(tuán)最小,分布最疏散。
2、
3、在碭山酥梨果實整個發(fā)育過程中,石細(xì)胞含量于花后51天出現(xiàn)高峰,高峰值為17.83%;木質(zhì)素含量于花后47天和花后63出現(xiàn)兩個高峰,峰值分別為6.47%和7.00%;PAL活性最大值出現(xiàn)在花后27天,最大值為85.53U/g·h。三者高峰期的出現(xiàn)在時間上表現(xiàn)出一定的時序性,PAL活性的高峰期最先出現(xiàn),然后木質(zhì)素含量出現(xiàn)高峰期,石細(xì)胞含量的高峰期最后出現(xiàn)。它們?nèi)叩淖兓厔莼鞠嗤?,總體上均呈先升高后下降的趨勢,且三者之間均呈顯著正相關(guān)。<
4、br> 3、碭山酥梨果實PAL的最適pH為9.2;在pH9.0左右時穩(wěn)定性較高;用pH4.0和pH10.0的緩沖液處理均導(dǎo)致酶分子結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,活性降低;PAL最適反應(yīng)溫度為60℃左右,較耐熱;當(dāng)反應(yīng)時間在180min內(nèi)PAL的活性與反應(yīng)時間呈線性關(guān)系;PAL對L-苯丙氨酸有較高的專一性,對L-酪氨酸也表現(xiàn)出一定的活性;最適底物濃度為0.0004~0.0012mol/L;碭山酥梨果實PAL的Km值有兩個,Km1為0.7500mmo
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