家蠶突變體粘液腺的生物學(xué)特征及突變基因(Ng)的SSR定位研究.pdf

1、家蠶散卵性狀主要是粘液腺發(fā)生突變不分泌或分泌微量的膠著物質(zhì)所致，在遺傳方式上遵循偽母性遺傳，對(duì)粘著性卵顯性，而控制該突變性狀的是由第十二號(hào)染色體上的Ng基因調(diào)控，該基因位于家蠶經(jīng)典連鎖圖譜的28.0 位點(diǎn)。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)家蠶散卵性狀的研究報(bào)道不多，尤其是有關(guān)Ng基因及其調(diào)控機(jī)制方面的研究。
　　 本文以正常家蠶品種P50 為對(duì)照，對(duì)Ng（No-glue）突變品種H9的不同發(fā)育時(shí)期的粘液腺進(jìn)行了形態(tài)觀(guān)察，并且測(cè)定了不同時(shí)期粘液腺分

2、泌物中糖、游離氨基酸、脂肪和蛋白質(zhì)的含量變化。結(jié)果表明：粘液腺的形態(tài)大小等在不同發(fā)育時(shí)期存在較大差異，發(fā)育初期家蠶粘液腺整體相對(duì)較小，但分支發(fā)達(dá)；粘液腺隨著蛹期的發(fā)育而逐漸變大，到羽化當(dāng)日（第10日）達(dá)到最大，其中以正常型家蠶品種P50 最為明顯，而化蛾后內(nèi)容物迅速變少，粘液腺個(gè)體也有所變小；突變體品種H9 內(nèi)容物減少程度不如P50 明顯。且在羽化當(dāng)日，P50 粘液腺明顯增大膨脹，而H9 粘液腺也變大，但并未有明顯的膨脹。突變品種H9分

3、泌物中糖、游離氨基酸、脂肪和蛋白質(zhì)的含量在出蛾當(dāng)日達(dá)到最大，分別為9.32 μg/ml，0.086 mg/ml，0.007 mg/ml，8.7 mg/ml，而在對(duì)照品種P50中卻分別達(dá)到15.35μg/ml，0.117 mg/ml，0.024 mg/ml，15.3mg/ml。另外，SDS-PAGE分析顯示兩個(gè)品種的分泌蛋白存在差異，通過(guò)MALDI-TOFMS分析鑒定出兩種差異蛋白分別為內(nèi)皮單核細(xì)胞激活多肽II和肌球蛋白重鏈變種。

4、　　 在家蠶中，由于雌蠶不發(fā)生交換，我們利用正常家蠶品種P50和Ng 突變品種H9 構(gòu)建回交群體對(duì)Ng基因進(jìn)行連鎖和SSR 定位分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)有三個(gè)SSR 標(biāo)記與Ng基因連鎖，構(gòu)建了一個(gè)全長(zhǎng)為36.4 cM的分子連鎖圖，Ng基因被定位在15.9 cM處，位于標(biāo)記S1202和S1203 之間且距離S1202 最近，為7.4 cM。Kaikoblast分析結(jié)果表明：S1202與S1203 之間物理距離為181.7 Kb。進(jìn)一步分析顯示有三