黃柏炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)的研究.pdf

1、黃柏（CortexPhellodendri）為蕓香科(Rutaceae)黃檗屬(PhellodendronRupr.)植物黃皮樹（P.chinenseSchneid.）和黃檗(P.amarenseRupr.)的干燥樹皮，是著名的川產(chǎn)地道藥材之一。黃柏炭疽病(PhellodendronAnthracnose)是四川黃柏產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生的一種病害，病原為炭疽菌屬膠胞炭疽菌（Colletotrichumgloeosporioides）。本試驗(yàn)對(duì)黃

2、柏炭疽病病原菌的分離與鑒定、生物學(xué)特性和室內(nèi)藥劑篩選進(jìn)行了研究。研究結(jié)果如下：1.黃柏炭疽病病原菌的分離與鑒定
　　 采用組織分離法，從采集到的具有炭疽病癥狀的黃柏葉片上分離到黃柏炭疽病的病原菌。將分離到的病原菌進(jìn)行了傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)鑒定和分子生物學(xué)鑒定，根據(jù)對(duì)病原菌的形態(tài)特征和培養(yǎng)性狀觀察以及rDNA-ITS區(qū)段序列分析，將病原菌鑒定為炭疽菌屬膠孢炭疽菌（Colletotrichumgloeosporioides）。病原菌分生孢子

3、盤散生或聚生，初埋生，后突破表皮，具剛毛；剛毛暗褐色，有分隔，剛毛大小為2.2～3.2μm×70～112μm.分生孢子梗無(wú)色，具分隔；產(chǎn)孢細(xì)胞無(wú)色，圓柱狀，內(nèi)部芽生瓶體式產(chǎn)孢；分生孢子無(wú)色，單胞，短圓柱狀，有時(shí)含1～2個(gè)油球，兩端鈍圓或-端略尖，分生孢子大小為4～6×12～18.5μm。
　　 2.黃柏炭疽病菌的生物學(xué)特性研究
　　 本文研究了黃柏炭疽病病原菌膠孢炭疽菌菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢以及孢子萌發(fā)的溫度、濕度、時(shí)間、pH值

4、、光照和營(yíng)養(yǎng)條件等環(huán)境因素的影響，明確了菌絲生長(zhǎng)、產(chǎn)孢和孢子萌發(fā)的最適條件。
　　 研究結(jié)果表明：病原菌在10～35℃均能生長(zhǎng)，最適溫度為30℃；產(chǎn)孢的溫度范圍為15～30℃，最適溫度為25℃。在PDA、10％和20％黃柏葉片煎汁+PDA三種培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)較快，在高氏一號(hào)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最慢；在PDA上產(chǎn)孢最好，在查氏培養(yǎng)基上產(chǎn)孢最差。在pH5～11范圍內(nèi)菌絲均能生長(zhǎng)和產(chǎn)孢，菌絲生長(zhǎng)最適pH5～8：產(chǎn)孢最適pH5～7。碳源利用上，

5、菌絲生長(zhǎng)以蔗糖和木糖最好，而產(chǎn)孢以淀粉為佳。氮源利用上，菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢均以有機(jī)氮源蛋白胨為最適氮源；而在銨態(tài)氮上生長(zhǎng)最差，菌落畸形，無(wú)氣生菌絲，且不產(chǎn)孢。光照對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響不大，但對(duì)產(chǎn)孢有利。
　　 病原菌分生孢子在無(wú)菌水中的萌發(fā)率很低，加入糖分有利于孢子的萌發(fā)，而加入1～2％的寄主葉片煎汁能顯著提高孢子的萌發(fā)率。在15～35℃范圍內(nèi)分生孢子均能萌發(fā)，最適溫度范圍為25～35℃。在最適條件下，病菌分生孢子4h開始萌發(fā)。分生孢子

6、萌發(fā)對(duì)濕度的要求極高，只有當(dāng)相對(duì)濕度達(dá)到100％以上時(shí)，分生孢子才開始萌發(fā)，在100％+水滴中的萌發(fā)率最高。pH4～11范圍內(nèi)孢子均能萌發(fā)，pH5～7孢子萌發(fā)較好。孢子對(duì)光照敏感，全黑暗有利于孢子萌發(fā)和芽管及菌絲的伸長(zhǎng)。另外，菌絲的致死溫度為49℃，分生孢子的致死溫度為54℃。
　　 3.黃柏炭疽病菌的室內(nèi)藥劑毒力測(cè)定
　　 采用藥皿法和玻片萌發(fā)法測(cè)定了多菌靈、烯唑醇、三唑酮和抑霉唑四種殺菌劑對(duì)黃柏炭疽病菌菌絲生長(zhǎng)和分生