攜帶Cry1Ac-CPTi基因野生稻的適合度及外源基因遺傳表達(dá)分析.pdf

1、隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展,水稻轉(zhuǎn)基因技術(shù)已漸趨成熟,科學(xué)家已成功培育出一大批抗病、抗蟲、抗除草劑等轉(zhuǎn)基因水稻新品種,并于2009年首次獲得農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全證書,這標(biāo)志著轉(zhuǎn)基因即將走向商品化生產(chǎn)。野生稻是水稻育種的基礎(chǔ)資源,具有許多珍貴的優(yōu)良性狀,是保證糧食安全的重要因素。在轉(zhuǎn)基因水稻大面積種植之后,轉(zhuǎn)基因向野生稻轉(zhuǎn)移將是不可避免的大概率事件,對(duì)攜帶外源轉(zhuǎn)基因野生稻的安全性進(jìn)行評(píng)估,對(duì)于保障野生稻資源和生態(tài)安全都具有重要意義。
　　

2、 本論文通過(guò)人工強(qiáng)制雜交構(gòu)建轉(zhuǎn)基因水稻與野生稻雜交及回交后代為材料,將Cry1Ac／CPE基因?qū)胍吧?對(duì)Cry1Ac／CPE基因在野生稻中的遺傳表達(dá)進(jìn)行了分析,對(duì)攜帶Cry1Ac／CPE基因野生稻的適合度進(jìn)行了評(píng)估,取得了以下重要研究結(jié)果:
　　 1.轉(zhuǎn)基因水稻外源基因Cry1Ac／CPE逃逸后能在野生稻中穩(wěn)定整合、遺傳。潮霉素抗性試驗(yàn)表明,外源基因在野生稻中遵循孟德爾遺傳規(guī)律。對(duì)潮霉素抗性野生稻DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,均能

3、獲得符合目的大小的外源轉(zhuǎn)基因片段；
　　 2.外源基因Cry1Ac／CPE在野生稻傳代過(guò)程中插入位點(diǎn)穩(wěn)定,在RNA水平可穩(wěn)定表達(dá),Somhern-blot結(jié)果表明:外源基因在野生稻傳代過(guò)程中都以單拷貝方式存在；
　　 3.ELISA結(jié)果表明:外源基因Cry1Ac殺蟲蛋白在野生稻各部位均得到了表達(dá),但表達(dá)水平存在時(shí)空差異；
　　 4.攜帶Cry1Ac／CPE基因野生稻并未獲得明顯的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì),與野生稻具有相似的適合度