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文檔簡介
1、東方山羊豆是一種優(yōu)良的豆科牧草,有著非常重要的利用價值。超氧化物歧化酶(SOD)是一種廣泛存在于真核生物中的金屬酶類,在植物的抗逆性中起到重要的作用。本研究為了探討SOD基因?qū)|方山羊豆抵抗氧化損傷,提高抗逆性方面的影響,采用RACE(rapidamplification of cDNA ends)方法,依據(jù)東方山羊豆鹽脅迫cDNA文庫中的EST序列,克隆了Cu／ZnSOD基因,并對其進行了初步分析。
東方山羊豆Cu／Zn
2、SOD基因全長cDNA序列為935 bp,開放閱讀框核苷酸序列600bp,編碼199個氨基酸,所編碼的蛋白質(zhì)分子量為20.35 KDa,該蛋白理論等電點為5.88。將該基因命名為GoCu／ZnSOD,NCBI登錄號為HM777020。
利用protein blast程序和ScanProsite服務器分析GoCu／ZnSOD氨基酸序列,其中Cu離子結(jié)合位點是組氨酸91,93,108和165,Zn離子結(jié)合位點是組氨酸108,1
3、16,125和天冬氨酸128,GNAGGRIACGVV(183-194 bp)中的C(半胱氨酸)可以形成二硫鍵。
利用實時熒光定量PCR方法分析GoCu／ZnSOD基因的表達情況,組織表達特異性結(jié)果證明其在葉片中的表達量顯著高于根和莖；NaCl和PEG能夠誘導GoCu／ZnSOD基因的表達量上調(diào),低溫對于GoCu／ZnSOD基因的表達無明顯影響,外源激素ABA則抑制GoCu／ZnSOD基因的表達。
構(gòu)建了植物
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