閩花6號花生果皮應答黃曲霉菌侵染的蛋白質組學分析.pdf

1、蛋白質組學研究在功能基因組時代發(fā)揮著越來越重要的作用。雙向電泳是其中的關鍵技術之一?；ㄉ?Arachis hypogeae L.)容易受到黃曲霉菌(Aspergillus flavus)侵染和黃曲霉毒素(Aflatoxin)的污染。當濕度、溫度等環(huán)境條件適合時,花生在收獲前、收獲中和收獲后的儲藏、運輸及加工過程中都可能被黃曲霉毒素污染。極大影響了國民經濟的提高。同時在黃曲霉菌侵染過程中,干旱的環(huán)境會更有助于病菌的侵入。
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2、確花生果皮對黃曲霉菌的抗性機理,闡明其抗病基因功能,對實現(xiàn)花生高產、抗病分子育種具有十分重要意義。很多學者在黃曲霉菌侵染花生的檢測及防治方法、品種抗性鑒定方法、電鏡觀察超微結構、抗性生理機制方面、分標記及基因克隆連同原核表達進行了研究。但關于花生果皮方面的研究不是很多,然而在基因和蛋白表達水平上對花生果皮侵染黃曲霉菌機制的研究就更是很少,特別是蛋白質組學方面的研究。為更進一步了解花生果皮侵染黃曲霉菌機制提供了一些依據(jù)。
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3、研究以抗黃曲霉菌花生種質閩花6號花生果皮為試驗材料,以雙向電泳技術聯(lián)用質譜技術為試驗方法,對花生植株進行干旱脅迫的同時,協(xié)同黃曲霉菌脅迫花生果皮過程中的病程相關蛋白、植物凝集素蛋白、以及其它作用的差異蛋白進行質譜分析和鑒定,這些信息有利于在分子水平上研究花生果皮與黃曲霉菌的互作機制,為進一步克隆花生果皮與黃曲霉菌互作中的相關重要基因及功能分析、以及為研究抗黃曲霉菌的花生新品種奠定基礎。具體結果如下:
　　 1應用蛋白質組學研究技

4、術,分析了花生果皮在不同處理下的病程相關蛋白的變化。通過觀察雙向電泳圖譜可知,聚集在同一區(qū)域的幾個低分子量蛋白顯著差異表達。通過MALDI-TOF-TOF-MS／MS鑒定及數(shù)據(jù)庫檢索,鑒定其為抗性相關蛋白(PR10蛋白)。研究結果表明:磷酸化的PR10蛋白在黃曲霉菌和干旱脅迫過程可能起到主要作用。這些信息有利于在分子水平上研究花生果皮與黃曲霉菌的互作機制,為研究花生過敏機制及設計低致敏原疫苗奠定基礎。
　　 2對花生果皮進行黃曲

5、霉菌以及干旱脅迫過程中的植物凝集素相關差異蛋白進行分析和鑒定。分析了花生果皮侵染黃曲霉菌的不同處理的蛋白質組變化,共有23個植物凝集素相關的差異蛋白點。本研究中凝集素蛋白可能參與了黃曲霉菌侵染花生果皮過程,有助于了解果皮中凝集素蛋白對黃曲霉菌的抗性機制,為以后的抗性育種奠定基礎。
　　 3對花生植物進行干旱脅迫的同時,使用黃曲霉菌脅迫花生果皮過程中的差異蛋白進行分析和鑒定。應用蛋白質組學研究技術,分析了花生果皮侵染黃曲霉菌的3個