鏈霉菌702所產(chǎn)抗真菌活性物質(zhì)的分離提取和制劑工藝研究.pdf

1、本文從鏈霉菌702發(fā)酵液中分別用溶媒提取抗真菌活性物質(zhì)粗品和利用柱層析從粗品中分離純化抗真菌活性物質(zhì)農(nóng)抗702，然后分別對農(nóng)抗7021％可濕性粉劑和1％水劑制劑工藝進行研究以及進行了制劑對防治植物病原真菌的應(yīng)用研究。
　　 為了獲得鏈霉菌702所產(chǎn)抗真菌活性物質(zhì)農(nóng)抗702，從鏈霉菌702罐上發(fā)酵生產(chǎn)的具有抗真菌活性單位10000mg/L發(fā)酵液200L中經(jīng)乙醇浸提液濃縮后得到含抗真菌活性單位22500mg/L的油狀物80L，浸提率

2、為90％；80L油狀物經(jīng)乙酸乙酯萃取濃縮得含抗真菌活性單位120000mg/L的12L浸膏，萃提率為80％。500g浸膏經(jīng)硅膠柱層析，獲得含抗真菌活性單位達750mg/g的粗品48.0802g。經(jīng)250mm×500mm硅膠(G200-300目)層析柱得到含抗真菌活性物質(zhì)9.274g。
　　 1.0％農(nóng)抗702可濕性粉劑制劑工藝研究，利用單因素實驗對4種載體進行篩選，確定最佳載體配比，并通過正交實驗優(yōu)化制劑中助劑羧甲基纖維素鈉、N

3、NO、0903、阿拉伯樹膠的最佳組合配比。得到農(nóng)抗7021％可濕性粉劑優(yōu)選配方為農(nóng)抗702:10％；羧甲基纖維素CMC：2％；奈磺酸鹽NNO：10％；濕展劑0903:6％；阿拉伯樹膠：0.2％；硅藻土/高嶺土6/4：補足至100％。樣品外觀為黃色或淡黃色疏松粉末，質(zhì)量符合國家相應(yīng)標準。
　　 1.0％農(nóng)抗702水劑劑制劑工藝研究，通過單因素試驗考察不同水質(zhì)(水：自來水、標準硬水、去離子水)、乳化劑(0203B、2201、OP-7

4、、OP-10、農(nóng)乳500、農(nóng)乳600)及不同濃度增稠劑黃原膠的影響進行助劑和配方篩選。得到農(nóng)抗7021％水乳劑制劑優(yōu)選配方為農(nóng)抗702的有效成分10％，十二烷基苯磺酸鈣5.0％，黃原膠0.2％，標準硬水補足至100％。制成的農(nóng)抗7021％水乳劑各項理化性能指標均達到國家標準。
　　 為了探索農(nóng)抗7021％制劑對香蕉枯萎病菌尖孢鐮刀菌作用效果，試驗分別以農(nóng)抗7021％制劑、鏈霉菌702發(fā)酵液，農(nóng)抗702兩個單體組分和和那他霉素為陽

5、性對照抗生素，采用菌絲生長速率法，對香蕉枯萎病菌尖孢鐮刀菌古巴?；?號和4號生理小種(FOC1、FOC4)的抗菌活性的毒力測定。結(jié)果那他霉素對FOC1，F(xiàn)OC4的EC50和EC90分別為2.08μg/mL、1.71μg/mL和6.6μg/mL、11.96μg/mL；樣品Dzp9對FOC1，F(xiàn)OC4的EC50和EC90分別為4.67μg/mL、3.41μg/mL和21.54μg/mL、53.09μg/mL；農(nóng)抗702對FOC1，F(xiàn)OC4

6、的EC50和EC90分別為20.98μg/mL、16.84μg/mL和50.68μg/mL、62.18μg/mL；1％農(nóng)抗702可濕性粉劑對FOC1，F(xiàn)OC4的EC50、EC90分別為26.99μg/mL，76.59μg/mL和14.67μg/mL，33.27μg/mL；1％農(nóng)抗702水劑對FOC1，F(xiàn)OC4的EC50、EC90分別為23.77μg/mL，40.01μg/mL和45.15μg/mL，143.54μg/mL。試驗結(jié)果表明：