蛋雞J亞群禽白血病分子流行病學(xué)調(diào)查及致病性研究.pdf

1、J亞群禽白血病(Subgroup J Avian Leukosis)是由J亞群禽白血病病毒(Subgroup J AvianLeukosis Virus,ALV-J)引起的以髓細(xì)胞瘤和其他細(xì)胞惡性腫瘤為特征的腫瘤性傳染性疾病。起初,該病僅引起肉雞發(fā)病,蛋雞雖感染ALV-J,但并不誘導(dǎo)腫瘤產(chǎn)生。我國于2004年首次報道商品蛋雞骨髓瘤ALV-J病例,隨后僅有零星報道。然而,2009年以來我國多個省區(qū)養(yǎng)雞場爆發(fā)了ALV-J,部分雞場發(fā)病率和死

2、亡率高達(dá)50％,給我國蛋雞養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。為掌握本次我國蛋雞ALV-J的流行情況,本研究進(jìn)行了我國部分地區(qū)蛋雞J亞群禽白血病分子流行病學(xué)調(diào)查及致病性研究,取得了如下成果:
　　 采用ELISA抗原檢測、特異性PCR以及亞群特異性免疫熒光試驗(IFA)等方法,從我國8個省區(qū)40個蛋雞場180份病料中分離和鑒定出19株蛋雞ALV-J。
　　 為分析我國蛋雞ALV-J毒株來源,克隆了19株ALV-J gp85基因,序

3、列分析及遺傳進(jìn)化分析結(jié)果表明:各蛋雞分離株gp85基因編碼氨基酸間的同源性為71.3％～100％。大部分分離毒株(13／19)與英國原型肉雞株HPRS-103親緣關(guān)系較近；部分分離株(3／19)與美國肉雞株ADOL-7501關(guān)系較近；另有少數(shù)分離毒株(3／19)則處于獨立分支,其發(fā)生了較大變異。
　　 為了解蛋雞血管瘤型ALV-J的序列特征,本研究擴(kuò)增了3株來自不同地區(qū)血管瘤型蛋雞ALV-J分離株的全基因組序列。測序結(jié)果表明:S

4、D09DP03、JL09JL3-1、HLJ09MDJ-1全基因組長度分別為7677、7677、7635bp。與所有公布ALV-J參考毒株相比,3個毒株具有如下序列特征:(1)5'LTR和5'UTR序列具有急性轉(zhuǎn)化型病毒序列特征；5'LTR U3區(qū)缺失NFAP-1和AIB REP1元件,但增加1個C／EBP結(jié)合位點；(2)3’UTR區(qū)rTM完全缺失,E元件相對保守,DR元件非常保守；(3)gag和pol基因非常保守；env基因變異較大,呈

5、現(xiàn)高度多樣性,且出現(xiàn)氨基酸缺失(JL09JL3-1和SD09DP03株均缺失117S；而HLJ09MDJ-1出現(xiàn)缺失61N和116R)；同時伴隨env基因N-糖基化位點改變。
　　 為研究流行蛋雞ALV-J分離株的致病性,本研究以3株蛋雞ALV-J毒株(SD09DP03、JL09JL3-1、HUB0903)腹腔注射1日齡SPF白萊航蛋雞,在感染后的第3、5、7、9、11、13、17、21、24、28、32、34周采集棉拭子、抗凝

6、血、非抗凝血,進(jìn)行泄殖腔排毒、病毒血癥、ALV-J特異性抗體檢測；每次采樣時同時隨機(jī)剖解部分雞,進(jìn)行病理變化觀察。結(jié)果表明:(1)各毒株感染組雞只均存在病毒血癥,其陽性率高于60％；(2)各毒株感染組雞只從3W開始排毒率整體不斷上升,之后快速下降(13W～21W),但21W以后90％以上雞只均排毒；(3)各毒株感染組雞只產(chǎn)生ALV-J抗體的比例整體不斷上升,但21W后抗體快速消退直至最低。(4)各毒株均能誘導(dǎo)骨髓瘤產(chǎn)生,其腫瘤誘導(dǎo)率為6