水稻二化螟CsAQP1基因的克隆與表達(dá).pdf

1、水稻二化螟Chilosuppressalis(Walker)是水稻上的重要害蟲之一，在我國分布廣泛，對環(huán)境有很強(qiáng)的適應(yīng)性。研究表明，昆蟲的許多生理活動與其體內(nèi)參與調(diào)節(jié)水分運輸和滲透壓的水通道蛋白（Aquaporins，AQPs）有關(guān)。為此，本研究對水稻二化螟水通道蛋白Ⅰ型（CsAQP1）基因的全長序列進(jìn)行了克隆，檢測了水稻二化螟不同生長發(fā)育階段、不同性別和不同組織中的CsAQP1基因的表達(dá)情況，初步探討了水通道蛋白在水稻二化螟生長發(fā)育過

2、程中的重要作用。研究主要結(jié)果如下:
　　 (1)采用RACE技術(shù)克隆出CsAQP1基因的2種轉(zhuǎn)錄類型CsAQP1transcriptvariantA和CsAQP1transcriptvariantB的全長cDNAs序列。CsAQP1transcriptvariantA基因全長1416bp，開放閱讀框為777bp，編碼258個氨基酸;5’和3'非編碼區(qū)分別為342bp和300bp;CsAQP1transcriptvariantB基

3、因全長1825bp，開放閱讀框為777bp，編碼258個氨基酸;5’和3'非編碼區(qū)分別為327bp和724bp。同源性分析表明，水稻二化螟的AQP1的氨基酸序列與家蠶的AQP1有80％的相似性，與梨小食心蟲的AQP1有75％的相似性。
　　 (2)DNAMAN軟件分析發(fā)現(xiàn)，CsAQP1有2個NPA單元、1個靠近C端的SYDF簽名序列和由四個保守殘基區(qū)域空間上毗鄰形成的壓縮區(qū)域Ar/R（苯丙氨酸Phe、組氨酸His、絲氨酸Ser和

4、精氨酸Arg組成）;用TCDB軟件分析表明，CsAQP1擁有和其它MIP家族成員蛋白一樣的6個疏水性橫跨膜區(qū)域，5個連接螺旋環(huán);CBS預(yù)測服務(wù)系統(tǒng)的預(yù)測表明，CsAQP1具有1個糖基化區(qū)域和2個磷酸化位點。
　　 (3)采用實時定量PCR方法，檢測了CsAQP1在水稻二化螟卵、1-6齡幼蟲、蛹（雌和雄）、成蟲（雌和雄）以及5齡幼蟲的前腸、中腸、后腸、馬氏管、頭部、表皮、脂肪體、血淋巴中的表達(dá)量。結(jié)果表明，在水稻二化螟5齡幼蟲的不