玉米C4型pepc基因在轉(zhuǎn)基因小麥中表達特性的研究.pdf

1、本研究以轉(zhuǎn)玉米C4型pepc基因T3代不同受體類型的轉(zhuǎn)基因株系及其對照為試驗材料，測定了大田生長條件下不同生育時期旗葉凈光合速率，并同時測定轉(zhuǎn)基因植株及其對照不同器官PEPC酶活性，隨后進行Western雜交分析;且對轉(zhuǎn)基因植株旗葉凈光合速率和酶活性進行相關(guān)性分析，并用DCDP處理轉(zhuǎn)基因植株對pepc基因功能進行驗證;在小麥成熟收獲后，隨機選取相同數(shù)目的轉(zhuǎn)基因植株及其對照進行有關(guān)農(nóng)藝性狀的調(diào)查，獲得以下研究結(jié)果:
　　1.對T3代

2、轉(zhuǎn)基因植株進行分子檢測，檢測結(jié)果表明，不同受體轉(zhuǎn)基因后代遺傳穩(wěn)定性不同，陽性率變幅在2.76％-67％，其中以周麥19、01H186-20-24和17-1為受體的轉(zhuǎn)基因后代植株具有較好的遺傳穩(wěn)定性;以00H97-54-2-7和鄭麥9023為受體的轉(zhuǎn)基因后代植株遺傳穩(wěn)定性較差。
　　2.經(jīng)過分子檢測，選擇以周麥19為受體的1-27-3和1-51-4、以01H186-20-24為受體的2-2-2和以17-1為受體的5-32-2四個轉(zhuǎn)基

3、因株系及其對照為試驗材料，于拔節(jié)期、抽穗期和灌漿期測定其旗葉凈光合速率，結(jié)果表明，各轉(zhuǎn)基因株系旗葉凈光合速率均高于對照，不同生育時期凈光合速率的總體變化趨勢為抽穗期＞灌漿期＞拔節(jié)期;抽穗期，各轉(zhuǎn)基因株系凈光合速率達最大值，灌漿期轉(zhuǎn)基因株系凈光合速率較對照的增幅最大，分別提21.4％、13.7％、13.5％和13.9％，差異達顯著水平，其中1-27-3表現(xiàn)突出。
　　3.對轉(zhuǎn)基因株系及其對照PEPC活性的測定結(jié)果顯示，不同生育時期酶

4、活性變化趨勢表現(xiàn)為抽穗期＞灌漿期＞拔節(jié)期，與旗葉凈光合速率變化趨勢一致。其中抽穗期各轉(zhuǎn)基因株系酶活性達最大值，灌漿期與對照相比增幅最大，轉(zhuǎn)基因株系1-27-3、1-51-4、2-2-2和5-32-2較對照分別增加2.4、2.3、1.3和1.6倍;對各轉(zhuǎn)基因株系不同器官酶活性測定結(jié)果表明，拔節(jié)期各器官間酶活性無明顯差異，抽穗期葉片酶活性高于非葉器官，灌漿期葉片中酶活性仍能維持較高水平，且高于其它非葉器官。對表現(xiàn)較為突出的1-27-3進行W

5、estern雜交分析的結(jié)果與酶活測定結(jié)果相一致。
　　4.對各轉(zhuǎn)基因株系旗葉凈光合速率和酶活性數(shù)據(jù)分析表明，兩者之間呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.8957**;用PEPC酶專一性抑制劑處理轉(zhuǎn)基因植株及其對照，結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因株系旗葉凈光合速率明顯下降，證明凈光合速率的提高確實是外源pepc基因?qū)氲慕Y(jié)果。
　　5.收獲后對轉(zhuǎn)基因植株及其對照有關(guān)農(nóng)藝性狀的調(diào)查結(jié)果表明，不同受體類型的轉(zhuǎn)基因株系產(chǎn)量性狀表現(xiàn)不同，轉(zhuǎn)基因株系1-5