不同蘿卜抗源抗黑腐病相關(guān)基因差異表達比較研究.pdf

1、黑腐病是嚴重影響十字花科蔬菜生產(chǎn)的世界性細菌病害。為了篩選蘿卜黑腐病抗源和挖掘抗病優(yōu)異基因,本文采用三種不同的鑒定方法對蘿卜種質(zhì)資源進行了鑒定,并采用DDRT-PCR和cDNA-AFLP對不同蘿卜抗源抗黑腐病相關(guān)基因表達進行了研究,主要研究結(jié)果如下:
　　 1.對40份初選蘿卜種質(zhì)分別接種Xcc8004和XccBJ兩個菌株,進行黑腐病苗期抗性鑒定；對其中的8份代表性蘿卜種質(zhì)采用肉質(zhì)根切片接種Xcc8004進行抗性鑒定；對其中的2

2、7份蘿卜種質(zhì)接種8個含有效應(yīng)物基因的農(nóng)桿菌,進行過敏反應(yīng)鑒定。結(jié)果表明:不同蘿卜種質(zhì)苗期對黑腐病的抗性存在顯著差異,篩選出對Xcc8004表現(xiàn)高抗的材料3份,對XccBJ表現(xiàn)高抗的材料1份。蘿卜苗期不同材料對Xcc8004和XccBJ的抗性表現(xiàn)極顯著相關(guān),蘿卜苗期和肉質(zhì)根對Xcc8004的抗病性極顯著相關(guān)。穩(wěn)定可靠抗病資源的獲得為蘿卜抗病育種和抗病機理深入研究提供了基礎(chǔ)材料。篩選出17份對不同效應(yīng)物表現(xiàn)過敏反應(yīng)的蘿卜種質(zhì)。不同抗源對不同

3、效應(yīng)物的過敏反應(yīng)程度有所不同。
　　 2.利用cDNA-AFLP技術(shù),研究了4份蘿卜抗病材料KB09-1、KB09-12、KB09-17、KB09-16和1份感病材料KB09-29接種和未接種黑腐菌Xcc8004的基因差異表達。256對引物組合在參試材料中擴增出790個差異表達條帶?？寺〉玫降?4個差異片段按其功能分為8類。在多份蘿卜種質(zhì)中都涉及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)代謝、光合作用、抗病防御及轉(zhuǎn)運等序列的差異表達。不同蘿卜抗源表達的抗

4、性相關(guān)基因不完全相同。
　　 3.對高抗黑腐病蘿卜種質(zhì)KB09-12分別接種效應(yīng)物xopXccN和xopXccX2,利用cDNA-AFLP方法獲得153個差異表達條帶。25個測序條帶分析表明,接種xopXccN和xopXccX2公共差異表達條帶主要涉及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和抗病防御,接種xopXccN的特異差異表達條帶主要涉及光合作用,接種xopXccX2的特異表達差異條帶主要涉及蛋白質(zhì)合成、加工。比較KB09-12接種效應(yīng)物與接種Xcc8