長(zhǎng)白豬通城豬HP-PRRSV抗性差異的機(jī)制探討及利用PB構(gòu)建Marc145突變細(xì)胞庫(kù).pdf

1、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Highly pathogenic PRRSV，HP-PRRSV)是一種嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的傳染病，不同品種豬對(duì)HP-PRRSV存在抗性(或易感性)差異為抗病育種提供了有價(jià)值的研究材料。為研究抗性(或易感性)差異可能的機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)以前期感染試驗(yàn)篩選得到兩個(gè)對(duì)HP-PRRSV抗性(或易感性)存在較大差異的品種長(zhǎng)白豬(易感型)、通城豬(抗病型)為材料，利用流式技術(shù)研究了感染前、感染后各時(shí)期兩個(gè)品種豬肺泡巨噬細(xì)胞(

2、Porcine alveolar macrophages，PAMs)凋亡率、受體CD169蛋白表達(dá)以及CD169+巨噬細(xì)胞數(shù)量的變化，利用Q-PCR技術(shù)分析了兩個(gè)品種PAMs中凋亡相關(guān)基因P53、Bc12L1、Bax和受體基因CD169轉(zhuǎn)錄水平差異，利用免疫組化的方法比較兩個(gè)品種肺組織中CD169+巨噬細(xì)胞數(shù)量差異。
　　 另外，為篩選PRRSV抗性(易感性)相關(guān)基因，本實(shí)驗(yàn)還構(gòu)建了有PiggyBac(PB)轉(zhuǎn)座子插入的Marc

3、145突變細(xì)胞庫(kù)，為進(jìn)一步利用病毒感染篩選抗性或易感性相關(guān)基因打下了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：
　　 1、感染HP-PRRSV后兩個(gè)品種豬PAMs凋亡率的變化趨勢(shì)基本一致，都經(jīng)歷了降低升高再降低的波動(dòng)過(guò)程，在感染第7天通城豬PAMs凋亡率顯著低于長(zhǎng)白。
　　 2、隨著HP-PRRSV感染時(shí)間的延長(zhǎng)，凋亡基因P53基因表達(dá)在長(zhǎng)白豬和通城豬中均呈下調(diào)趨勢(shì)，基因表達(dá)在兩個(gè)品種之間無(wú)顯著差異。在感染HP-PRRSV前通城豬Bax和

4、Bc12L1基因表達(dá)均顯著高于長(zhǎng)白豬；在感染第3天，Bax和Bc12L1基因表達(dá)在兩個(gè)品種間無(wú)顯著差異；在感染第5天通城豬Bax和Bcl2L1基因表達(dá)均顯著低于長(zhǎng)白豬；在感染第7天通城豬Bcl2L1基因表達(dá)高于長(zhǎng)白豬，而Bax表達(dá)在兩個(gè)品種間無(wú)差異。
　　 3、隨著HP-PRRSV感染時(shí)間的延長(zhǎng)，兩個(gè)品種豬CD169表達(dá)呈下調(diào)的趨勢(shì)。感染HP-PRRSV的不同時(shí)期通城豬PAMs CD169基因轉(zhuǎn)錄和翻譯水平均高于長(zhǎng)白豬。