擬南芥AtMYB44和LWT1基因在水稻中的遺傳轉(zhuǎn)化及功能驗證.pdf

1、水稻是世界1/3人口的主食，非生物脅迫諸如干旱、鹽堿、高溫和過氧化影響著植物的生長發(fā)育，導(dǎo)致作物減產(chǎn)。世界糧食安全受到了日趨減少的耕地面積和激增人口的嚴重威脅。因此，提高水稻產(chǎn)量，改良稻米品質(zhì)關(guān)系到人類的生存和發(fā)展。
　　 長期以來，改善作物的抗逆性一直是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的主要目標。培育具有抗逆性的水稻品種對全球的糧食生產(chǎn)會產(chǎn)生重要影響。近年來，已有許多能使植株具有抗逆性的相關(guān)基因轉(zhuǎn)入水稻并獲得了很多抗逆的轉(zhuǎn)基因植株。在改善水稻的抗逆性

2、方面，轉(zhuǎn)基因比傳統(tǒng)育種更有發(fā)展?jié)摿?。目前運用最廣泛的轉(zhuǎn)基因水稻方法之一是農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法。本實驗討論了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法將抗逆基因轉(zhuǎn)入水稻及目的基因在逆境脅迫下的表達，研究結(jié)果如下：
　　 1、以水稻日本晴品種的幼胚為材料，用于農(nóng)桿菌遺傳轉(zhuǎn)化，運用此方法，將MYB44和LWT1基因?qū)胨局?，獲得了一批轉(zhuǎn)基因水稻植株，PCR分析表明目的基因已經(jīng)整合進了水稻的基因組中。實驗發(fā)現(xiàn)，共培養(yǎng)時在共培養(yǎng)基上加濾紙有利于后續(xù)的除菌工作

3、，能夠提高轉(zhuǎn)化效率。
　　 2、用RT-PCR的方法研究了水稻MYB44基因在低溫、高鹽、干旱和ABA脅迫下的表達模式，結(jié)果顯示，MYB44基因能被誘導(dǎo)。對各種脅迫處理后的水稻各組織進行RT-PCR分析，得出結(jié)果表明MYB44基因在干旱和高鹽的脅迫下存在過量表達。生理功能分析表明轉(zhuǎn)基因水稻中MYB44基因的過量表達明顯提高了水稻對低溫脅迫的耐受性，而且轉(zhuǎn)基因陽性植株的干旱和鹽漬生理實驗表明，與非轉(zhuǎn)基因的植株相比，大部分轉(zhuǎn)基因陽性

4、植株都能夠耐受干旱和鹽漬脅迫。
　　 3、用RT-PCR的方法研究了水稻LWT1基因在低溫、高鹽和干旱脅迫下的表達模式，結(jié)果顯示，LWT1基因能被低溫和干旱誘導(dǎo)而對高鹽不敏感。對各種脅迫處理后的水稻各組織進行RT-PCR分析，得出結(jié)果表明LWT1基因在干旱脅迫下存在過量表達。生理功能分析表明轉(zhuǎn)基因水稻中LWT1基因的過量表達明顯提高了水稻對干旱脅迫的耐受性，而且轉(zhuǎn)基因陽性植株的干旱生理實驗表明，與非轉(zhuǎn)基因的植株相比，大部分轉(zhuǎn)基因