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1、通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控功能基因的表達(dá)是植物抗逆應(yīng)答反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。MYB轉(zhuǎn)錄因子是植物體內(nèi)最大的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,它在植物抗逆反應(yīng)中起著重要的作用。本文首次從中間錦雞兒中克隆到MYB68基因并對(duì)其進(jìn)行表達(dá)分析,具體結(jié)果如下:
1.運(yùn)用RT-PCR及RACE技術(shù)從中間錦雞兒中克隆到MYB68基因的全長(zhǎng)cDNA序列1,209 bp(命名為CiMYB68),具有852bp的完整開(kāi)放閱讀框(ORF); gDNA的長(zhǎng)度也為1209bp,無(wú)內(nèi)含
2、子。生物信息學(xué)分析顯示:CiMYB68蛋白由284個(gè)氨基酸組成,是親水蛋白,分子量為31,459.4Da,理論等電點(diǎn)為8.95。
2.利用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)中間錦雞兒幼苗在不同脅迫處理下CiMYB68基因的轉(zhuǎn)錄水平,發(fā)現(xiàn)在干旱和低溫的處理下CiMYB68的表達(dá)量顯著增加。
3.克隆得到了CiMYB68的啟動(dòng)子區(qū)域,長(zhǎng)1,458 bp,具有基本的啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄元件和響應(yīng)生物和非生物脅迫的順式作用元件。
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