番茄抗葉霉病基因Cf-9的SNP分子標(biāo)記篩選及種質(zhì)資源鑒定.pdf

1、番茄葉霉病是一種侵染性病害，由番茄葉霉菌(Cladosporium fulvum(Cook)Ciferri)侵染引起，番茄葉霉病菌很容易分化出新的生理小種，抗病品種一旦開始投入生產(chǎn)很快會被新的生理小種所克服，成為感病品種，經(jīng)實(shí)踐證明，培育抗病品種是目前防治番茄葉霉病的最有效措施。但是由于常規(guī)育種周期較長，因此利用分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行分子標(biāo)記輔助選擇從而提高育種效率，成為育種工作的首選途徑。
　　 本研究采用SNP分子標(biāo)記技術(shù)篩選抗病

2、基因Cf-9的單堿基突變位點(diǎn)，進(jìn)而開發(fā)分子標(biāo)記，并利用得到的標(biāo)記對63份種質(zhì)資源進(jìn)行鑒定，獲得含有番茄抗葉霉病基因Cf-9的番茄材料，為培育抗葉霉病新品種提供物質(zhì)基礎(chǔ)。本研究主要獲得以下成果：
　　 1.應(yīng)用課題組提供的以東農(nóng)712(F1代)自交構(gòu)建的F2離群體455個(gè)單株，通過對遺傳群體的抗病性鑒定分析，證明其遺傳模式符合孟德爾的顯性單基因遺傳規(guī)律。
　　 2.針對Cf9基因設(shè)計(jì)兩對嵌套引物，并對所有6份材料的Cf-9

3、基因進(jìn)行測序，將測序結(jié)果基因序列與GenBank上的Cf-9序列進(jìn)行比對，發(fā)現(xiàn)3個(gè)SNP位點(diǎn)S918、S1040、S2690和一個(gè)堿基插入位點(diǎn)I910。
　　 3.根據(jù)等位基因引物設(shè)計(jì)原理針對以上突變位點(diǎn)設(shè)計(jì)引物，經(jīng)過篩選，根據(jù)SNP位點(diǎn)S918設(shè)計(jì)的特異引物S918-1和上游公共引物CP-1引物對，可在抗病材料中產(chǎn)生250bp左右的特異性條帶，而感病材料中無此條帶，可應(yīng)用于抗病材料篩選；并且使用S918-1和S918-2引物對