2008年--外文翻譯--茶多酚和維生素e以及維生素c在sds聚集體中的協(xié)同抗氧化作用（譯文）

1、<p>　　中文5500字,37500單詞，19000英文字符</p><p>　　出處:Dai F, Chen W F, Zhou B. Antioxidant synergism of green tea polyphenols with α-tocopherol and l-ascorbic acid in SDS micelles[J]. Biochimie, 2008, 90(10): 149

2、9-1505.</p><p>　　本科畢業(yè)設(shè)計(jì)(論文)</p><p>　　外文參考文獻(xiàn)譯文及原文</p><p>　　學(xué) 院 輕工化工學(xué)院 </p><p>　　專 業(yè) 食品科學(xué)與工程 </p><p>　　茶多酚和維生素E以及維生素C在SDS聚集體中的協(xié)同抗氧化作用</p&g

3、t;<p><b>　　戴芳 陳偉鋒 周波</b></p><p>　　蘭州大學(xué)功能有機(jī)分子化學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中國甘肅省蘭州市南天水路222號(hào)</p><p><b>　?。?30000）</b></p><p><b>　　摘要</b></p><p>　　從

4、綠茶中提取的多酚類物質(zhì)具有協(xié)同抗氧化作用，這些多酚類物質(zhì)包括即表兒茶素（EC），表?xiàng)攦翰杷?EGC)，表兒茶素棓酸酯(ECG)， (-)-表?xiàng)攦翰杷貤斔狨?EGCG)和沒食子酸（GA）。這些物質(zhì)與維生素E在十二烷基硫酸鈉（SDS）膠束的研究中出現(xiàn)的L -抗壞血酸（維生素C酸）對(duì)亞油酸的過氧化具有協(xié)同抑制作用。這種過氧化熱是由水溶性偶氮引發(fā)劑2, 2 -偶氮二(2-脒基丙烷)二鹽酸鹽(AAPH)引起的，通過監(jiān)測(cè)亞油酸氫過氧化物的結(jié)構(gòu)和抗氧

5、化劑消耗量來研究反應(yīng)動(dòng)力學(xué)。結(jié)果表明，在綠茶多酚的混合物中，維生素E和維生素C可以發(fā)揮協(xié)同作用來保護(hù)脂質(zhì)過氧化?？寡趸膭?dòng)力學(xué)和機(jī)理研究反映這種抗氧化的協(xié)同作用，這是由綠茶多酚和維生素C的再生而引起的。</p><p>　　關(guān)鍵詞：抗氧化，綠茶多酚，兒茶素，維生素E；增效</p><p><b>　　目 錄</b></p><p>

6、<b>　　1 引言1</b></p><p>　　2 材料與方法2</p><p><b>　　2.1實(shí)驗(yàn)材料2</b></p><p>　　2.2亞油酸氫過氧化物的測(cè)定2</p><p>　　2.3維生素E、維生素C及表沒食子兒茶素沒食子酸酯的測(cè)定2</p><

7、p>　　2.4兒茶素醅酸酯激進(jìn)程度的測(cè)定3</p><p>　　3 結(jié)果與討論3</p><p>　　3.1維生素E、維生素C和綠茶多酚抑制亞油酸過氧化反應(yīng)3</p><p>　　3.2表沒食子兒茶素沒食子酸酯，維生素C和維生素E的消耗量4</p><p>　　3.3表兒茶素棓酸酯(ECG)與維生素C的反應(yīng)的直接證據(jù)5<

8、;/p><p>　　3.4脂質(zhì)過氧化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)5</p><p>　　3.5抗氧化協(xié)同作用的維生素E、維生素C和茶多酚6</p><p><b>　　致 謝8</b></p><p><b>　　1 引言</b></p><p>　　幾千年來，綠茶一直是中國最普遍的飲料之

9、一。喝茶，特別是綠茶，被認(rèn)為能夠降低癌癥的發(fā)生率。例如，在西方，十分之一的女人會(huì)患乳癌，然而在常年喝綠茶的日本人中僅有四十分之一的女人患乳癌。我們最近發(fā)現(xiàn)綠茶多酚能反向惡性表型特征和誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞（再分化株SMMC - 7721）。因此，綠茶多酚對(duì)癌癥的抑制作用機(jī)理成為活躍的研究領(lǐng)域。表?xiàng)攦翰杷貤斔狨?EGCG)是綠茶多酚中最豐富的成分，相關(guān)研究表明它能防癌，主要是通過抑制血管生成，抑制尿激酶活性，能有效防癌，加速癌細(xì)胞死亡，同時(shí)不損害

10、健康細(xì)胞。最近還發(fā)現(xiàn)表?xiàng)攦翰杷貤斔狨?EGCG)的抗腫瘤活性的介導(dǎo)--A受體。綠茶多酚這一理想的和被公認(rèn)的治療癌癥的特性被認(rèn)為取決于他們的抗氧化性能的性質(zhì)。因?yàn)樽杂苫ぶ|(zhì)氧化損傷和DNA介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化，被認(rèn)為是與各種慢性疾病相關(guān)，如癌癥，動(dòng)脈硬化，神經(jīng)退行性疾病和衰老等問題。因此，在過去幾年有大量的致力于綠茶多酚的抗氧化活性的研究。</p><p>　　我們最近發(fā)現(xiàn)，綠茶多酚是自由基脂質(zhì)過氧化溶液中，在膠束中

11、的人類紅細(xì)胞，在人類低密度脂蛋白，并在大鼠肝微粒中有良好的抗氧化劑，而這些多酚類化合物抗氧化活性在很大程度上取決于分子結(jié)構(gòu)、反應(yīng)介質(zhì)的起始條件和微環(huán)境。</p><p>　　有人還發(fā)現(xiàn)，這些綠茶多酚可協(xié)同-維生素E來加強(qiáng)其抗氧化活性。據(jù)之前的報(bào)道，維生素E與L -抗壞血酸（維生素C）也具有協(xié)同抗氧化作用。然而，涉及3個(gè)抗氧化劑的抗氧化協(xié)同作用的研究還很少。綠茶還含有大量的維生素C，因此它對(duì)協(xié)同抗氧化成分的系統(tǒng)研究

12、從二成分系統(tǒng)到三成分系統(tǒng)有重大意義，三成分系統(tǒng)研究綠茶多酚，維生素E和維生素C如何相互作用。我們?cè)诖藞?bào)告氧化亞油酸誘導(dǎo)動(dòng)力學(xué)和機(jī)理研究，關(guān)于綠茶多酚（GOHs）與生育酚（維生素E）和L -抗壞血酸（維生素C）協(xié)同反對(duì)十二烷基硫酸鈉（SDS）中的自由基破壞的抗氧化作用。該項(xiàng)研究包括：表兒茶素（EC），表?xiàng)攦翰杷?EGC)，表兒茶素棓酸酯(ECG)， (-)-表?xiàng)攦翰杷貤斔狨?EGCG)和沒食子酸（GA）（圖1）。據(jù)發(fā)現(xiàn)，綠茶多酚，維生素E

13、和維生素C的混合能相互協(xié)同來抑制亞油酸過氧化。并對(duì)抗氧化劑協(xié)同作用機(jī)制的細(xì)節(jié)進(jìn)行了討論</p><p><b>　　2. 材料和方法</b></p><p><b>　　2.1. 材料</b></p><p>　　根據(jù)以前報(bào)道的程序，兒茶素（EC），-棓兒茶素（EGC），兒茶素棓酸酯（ECG），棓兒茶素棓酸酯（EGCG）的

14、和棓酸（GA）是從綠茶葉中分離，連續(xù)提取出甲醇，水和醋酸乙酯葉片上和采用葡聚糖凝膠LH - 20柱色層分離。就如之前的報(bào)道，它們的結(jié)構(gòu)和純凈度通過1H和13C核磁共振光譜和高效液相色譜法確定 [33]。亞油酸（標(biāo)準(zhǔn)差，色譜純），DL的- 1 -維生素E（默克，生化試劑，> 99.9％）和2,20 -偶氮（2 amidinopropane）鹽酸鹽（AAPH，）則在冰箱氮環(huán)境下保存待用。該表面活性劑SDS從乙醇重結(jié)晶后使用。</

15、p><p>　　2.2. 亞油酸氫過氧化物的測(cè)定</p><p>　　亞油酸膠束的制備是通過混合適量的亞油酸和維生素E, 維生素C和茶多酚。必要時(shí)，用勻質(zhì)器與0.1 M SDS水溶液混合2分鐘。 AAPH直接溶解于磷酸鹽緩沖液（pH值7.4）并注入膠束中引起過氧化。該亞油酸膠束被放置在一個(gè)2毫升容量的容器中，恒溫37 攝氏度并提供恒溫磁力攪拌器。根據(jù)前面描述的方法，氫過氧化物亞油酸（LOOH）

16、的形成取決于高效液相色譜法（HPLC）的測(cè)定。簡(jiǎn)言之，在反應(yīng)混合物中吸取了帶出一個(gè)開放的船只在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間間隔，并受到然后與以洗脫高效液相色譜分析），在一個(gè)吉爾森液體色譜以ZORBAX ODS的反相柱（6 --250毫米，杜邦儀器甲醇/水（5:1，第V / 5）。該流量率定為1.0毫升/分鐘。阿吉爾森116紫外檢測(cè)器，以監(jiān)測(cè)235納米的總亞油酸氫過氧化物。每3次重復(fù)測(cè)定，實(shí)驗(yàn)偏差均在10％以內(nèi)。</p><p>　

17、　2.3. 維生素E，維生素C和表沒食子兒茶素沒食子酸酯的測(cè)定</p><p>　　該程序與前面所描述的亞油酸氧化氫的測(cè)定相同，預(yù)計(jì)1吉爾森142電化學(xué)探測(cè)器以T700毫伏速度運(yùn)行，SCE 同時(shí)用來監(jiān)測(cè)TOH, VC and EGCG.使用。圓柱用含高氯酸鈉（50毫米）為支持電解質(zhì)的甲醇∕支柱物-2-ol/洗脫酸（80:20:1，v/v/v）洗提。</p><p>　　2.4.兒茶素棓酸酯

18、激進(jìn)程度的測(cè)定</p><p>　　電子順磁共振（EPR）光譜測(cè)量布魯克ER 200D光譜儀實(shí)現(xiàn)的，在X - 100千赫調(diào)制，調(diào)制振幅波段操作譜儀0.05噸，時(shí)間常數(shù)0.5秒和微波功率為25毫瓦條件下運(yùn)行。石英電解槽用于激進(jìn)程度的測(cè)定。EPR的測(cè)量樣品是在增加0.5 ml 的0.1 N氫氧化鈉溶液之前將0.5兒茶素棓酸酯溶解在純凈水中來完成， [34]。在此之后，黃顏色增厚后開始迅速氧化和在室溫下進(jìn)行后續(xù)計(jì)量。&

19、lt;/p><p><b>　　3.結(jié)果和討論</b></p><p>　　3.1 維生素E、維生素C和綠茶多酚抑制亞油酸過氧化反應(yīng)</p><p>　　亞油酸及其脂類作為不飽和脂肪酸的一種，其過氧化反應(yīng)所生成的氫過氧化物主要根據(jù)反應(yīng)條件的不同而有所差異。波特與同事最近提供一個(gè)框架通過理論計(jì)算來了解不飽和脂肪三自由基氧化情況。當(dāng)產(chǎn)品在缺乏抗氧化劑或

20、者是缺乏足夠抗氧化劑的情況下，氫過氧化物代替9號(hào)碳原子或13號(hào)碳原子上的其中一個(gè)位置，從而使其變成反式結(jié)構(gòu)或者是共軛二稀酸。例如，千分之一摩爾濃度的維生素E。研究發(fā)現(xiàn)，這些共軛二烯烴能夠就近快速切斷初步形成的11--烯丙基過氧化氫自由基，而且產(chǎn)品被活動(dòng)控制的結(jié)果就是不對(duì)稱氫過氧化物11號(hào)位置被取代，很有可能成為主要的產(chǎn)品在高濃度的抗氧化劑,例如,1摩爾濃度.在本實(shí)驗(yàn)中，使用非常少量的抗氧化劑（茶多酚，維生素E和維生素C），產(chǎn)生的不對(duì)稱氫

21、過氧化物微不足道，而對(duì)稱氫過氧化物才是主要產(chǎn)品，后者在235nm處有明顯的紫外線吸收特征，以至于它被用來監(jiān)控采用高效液相色譜法分離過氧化物反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的所有氫過氧化物。</p><p>　　亞油酸在SDS膠束中所發(fā)生的過氧化反應(yīng)所形成的總的氫過氧化物一些具有代表性的曲線如圖2所示。從圖中可以非常明顯地看出，在沒有抗氧化劑加入時(shí)，隨著鹽酸鹽的加入，氫過氧化物的濃度隨著時(shí)間的增加快速呈線性增加（曲線a），這說明產(chǎn)

22、品基質(zhì)被快速氧化，這條曲線的斜率跟反應(yīng)速度相一致。在所謂的“抑制周期”加入抗氧化劑維生素E，過氧化物的形成被明顯地抑制（曲線b）。抑制周期之后，氫過氧化物的形成率被控制在初始水平，并且和抗氧化劑的消耗量相一致。在抑制期，氫過氧化物的濃度同樣隨時(shí)間近似地呈線性增加，這條曲線的斜率被定義為Rinh，這也反映了抗氧化劑的潛力。添加了維生素C的話，除了減少一點(diǎn)點(diǎn)氫過氧化物的形成速率以外，它還沒有抑制周期(如曲線C)。添加表沒食子兒茶素沒食子酸酯

23、同樣會(huì)產(chǎn)生明顯的抑制周期（如曲線D）。有趣的是，添加同樣數(shù)量的維生素E，維生素C和表沒食子兒茶素沒食子酸酯在290分鐘的時(shí)候會(huì)共同產(chǎn)生一個(gè)抑制周期（如曲線E），這個(gè)時(shí)間100%長于分別添加等量維生素E產(chǎn)生抑制周期所需的時(shí)間（78.3分鐘），等量維生素C產(chǎn)生抑制周期所需時(shí)間（0分鐘）和等量表沒食子兒茶素沒食子酸酯產(chǎn)生抑制周期所需時(shí)間（66</p><p>　　3.2 表沒食子兒茶素沒食子酸酯，維生素C和維生素E的消

24、耗量</p><p>　　為了明確茶多酚，維生素E和維生素C協(xié)同抗氧化的機(jī)理，采用高效液相色譜法來分離反應(yīng)混合物來研究表沒食子兒茶素沒食子酸酯，維生素C和維生素E的衰退動(dòng)力學(xué)，隨后定量測(cè)定抗氧化劑的量。具有代表性的研究結(jié)果如圖3所示。研究表明，隨著時(shí)間的推移，當(dāng)它們被用在SDS膠束上時(shí)，三種抗氧化劑在兩個(gè)半衰期內(nèi)大致呈直線快速衰退（直線A，B，C所示），依照動(dòng)力學(xué)要求解釋抗氧化反應(yīng)。當(dāng)維生素E被單獨(dú)使用的時(shí)候，它

25、的衰退速率是，但是在表沒食子兒茶素沒食子酸酯的參與下，衰退速率顯著地變成，當(dāng)維生素C和表沒食子兒茶素沒食子酸酯耗盡的時(shí)候，衰退時(shí)間快速增加到120分鐘（直線D）。這個(gè)時(shí)間和表沒食子兒茶素沒食子酸酯的消耗相一致（看曲線C）。此外，在維生素C和表沒食子兒茶素沒食子酸酯參與下，維生素E的衰退幾乎完全被一抑制在起點(diǎn)，而且在120分鐘的時(shí)候變得更快當(dāng)維生素C和表沒食子兒茶素沒食子酸酯消耗完的時(shí)候。另一方面，在維生素E和表沒食子兒茶素沒食子酸酯參與

26、下，維生素C的衰退熟速率從始至終沒有改變（曲線F）。然而，在維生素C和維生素E的參與下，表沒食子兒茶素沒食子酸酯的衰退速率完全被抑制在初始期，而且在40分鐘的時(shí)候轉(zhuǎn)變的非</p><p>　　3.3表兒茶素棓酸酯(ECG)與維生素C的反應(yīng)的直接證據(jù)</p><p>　　大家都知道，茶多酚這種酚很容易因電子轉(zhuǎn)移而氧化的，產(chǎn)生了在堿性溶液中電子順磁共振檢測(cè)為茶多酚陰離子自由基。改變pH值，茶多

27、酚及其和激進(jìn)的分子結(jié)構(gòu)都急劇變化。表兒茶素棓酸酯的酸解離常數(shù)pK1，PK2，pK3和pK4分別是8.03，8.64，11.26和11.6。在本實(shí)驗(yàn)中（pH值12~13），表兒茶素棓酸酯的分子結(jié)構(gòu)和激進(jìn)的結(jié)構(gòu)將主要是共軛結(jié)構(gòu)。如圖4所示，表兒茶素棓酸酯的激進(jìn)共軛結(jié)構(gòu)在隔絕空氣的0.05 N的氫氧化鈉溶液中生成。表兒茶素棓酸酯的激進(jìn)共軛表現(xiàn)為一個(gè)有1:2:1和比超精細(xì)分裂常數(shù)強(qiáng)度強(qiáng)大三倍吸收1.08 G的在D -環(huán)的兩個(gè)相同的元質(zhì)子耦合，這

28、符合之前的報(bào)告。即使經(jīng)過120分鐘，這強(qiáng)度依然很強(qiáng)，形狀沒有改變。加入5mM維生素C后，，激進(jìn)消失，表兒茶素棓酸酯的信號(hào)在維生素的陰離子自由基出現(xiàn)。在維生素C的陰離子自由基具有1:1的顯示和超精細(xì)分裂常數(shù)為1.7 G雙峰強(qiáng)度比1，這符合之前的報(bào)告。</p><p>　　3.4脂質(zhì)過氧化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)</p><p>　　現(xiàn)已證明，脂質(zhì)過氧化膠束和生物膜反應(yīng)動(dòng)力學(xué)遵循相同的速率定律在同質(zhì)解決方案

29、。亞油酸的動(dòng)力學(xué)（LH）的由偶氮化合物，其通過連鎖打破抗氧化劑（阿抑制發(fā)起過氧化），我們以前的文獻(xiàn)已進(jìn)行了詳細(xì)討論。對(duì)繁殖率（Rp）和過氧化率在抑制期（Rinh）的形成是由反應(yīng)式給出。 分別為（1）及（2）。</p><p>　　動(dòng)力學(xué)鏈長（氯化鉀）定義的鏈繁殖數(shù)量由每個(gè)發(fā)起自由基所致，并給出了均衡器。抑制過氧化的公式分別為（5）和（6）。由圖2可推斷出動(dòng)力學(xué)參數(shù)并列于表1。</p>&l

30、t;p>　　國際扶輪值的抑制時(shí)間[式（3）計(jì)算]為十二烷基硫酸鈉，這與價(jià)值相吻合，從式（4）衰減獲得。</p><p>　　它從圖2中可以看出，增加對(duì)維生素C在SDS膠束只降低了氫的生成速率，但沒有觀察到抑制期。這表明，風(fēng)險(xiǎn)投資只能捕獲發(fā)起自由基（原產(chǎn)的規(guī)則），而從鹽酸鹽熱分解來，但不能捕獲傳播亞油酸（在十二烷基硫酸鈉膠束應(yīng)用LOO）過氧自由基。然而，表明在十二烷基硫酸鈉膠束茶多酚明確抑制時(shí)期，對(duì)傳播和動(dòng)力

31、學(xué)鏈長率明顯下降（圖2和表1），表明茶多酚能夠捕獲宣傳亞油酸（應(yīng)用LOO $）在過氧自由基特別職務(wù)隊(duì)膠束[式（7）]。在我們以前的文獻(xiàn)中進(jìn)行了討論綠茶多酚（茶多酚的抗氧化作用）。</p><p>　　3.5抗氧化協(xié)同作用的維生素E，維生素C和茶多酚</p><p>　　TOH是維生素E最豐富和活躍的形式，是一個(gè)眾所周知的，主要的脂溶性連鎖打破血漿抗氧化及紅細(xì)胞[式（8）。它的協(xié)同作用，如維

32、生素C，茶多酚，黃酮醇及其苷類等抗氧化劑的抗氧化作用和白藜蘆醇及其類似物，已經(jīng)有據(jù)可查的。協(xié)同效應(yīng)可以量化的協(xié)同效率，SE％，反應(yīng)式如下：</p><p>　　它從圖2和表1中可以看出，所有展品除遺傳茶多酚顯著的協(xié)同抗氧化作用在十二烷基硫酸鈉膠束時(shí)，三抗氧化劑一起使用。在十二烷基硫酸鈉膠束的（圖3中的抗氧化劑的衰變動(dòng)力學(xué)）清楚地表明，VC的衰變是沒有影響TOH和表?xiàng)攦翰杷貤斔狨ス泊妫ū容^圖3的線b和f）。另一方面

33、，TOH衰減的顯著抑制，直到兒茶素最受共存的表?xiàng)攦翰杷貤斔狨サ南?。這是類似的動(dòng)力學(xué)行為的TOH再生觀察抗壞血酸，因此強(qiáng)烈建議表?xiàng)攦翰杷貤斔狨タ山档凸曹椬杂苫?，以恢?fù)TOH[式10]。</p><p>　　為反應(yīng)的速率常數(shù)（10）已決定直接在本實(shí)驗(yàn)室通過測(cè)量衰變動(dòng)力學(xué)，利用停流電子順磁共振（EPR）光譜是0.45瓦特在十二烷基硫酸鈉膠束與兒茶素是最活躍的一個(gè)。這是最近發(fā)現(xiàn)的速率常數(shù)在膠束溶液為pH依賴獲得，而茶多

34、酚反應(yīng)速率的增加而增加的茶多酚陰離子特征顯著。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步表明，維生素C可降低兒茶素苯氧基自由基和再生的表?xiàng)攦翰杷貤斔狨式11]，由于表?xiàng)攦翰杷貤斔狨ネ耆种屏斯泊婢S生素E和維生素C，直至用完全衰退（圖3的曲線）。此外，電子順磁共振實(shí)驗(yàn)（圖4）提供明確的證據(jù)表明，維生素C可有效減少高建苯氧基自由基再生。另據(jù)報(bào)道，除了維生素C可以增加綠茶多酚的穩(wěn)定性和完全抑制綠茶多酚在衰變AAPH發(fā)起的人血漿中脂質(zhì)過氧化。</p><

35、;p>　　因此，TOH和維生素C在十二烷基硫酸鈉膠束抗氧化劑的協(xié)同作用，可在合理化計(jì)劃1所述的機(jī)制。TOH，是唯一在系統(tǒng)中脂溶性抗氧化反應(yīng)，應(yīng)首先與在膠束內(nèi)脂質(zhì)過氧自由基（應(yīng)用LOO $），形成一共軛自由基。后者可減少再生TOH，因此延長的抑制期。也可以應(yīng)用LOO直接反應(yīng)在膠束表面。維生素C可應(yīng)用LOO不發(fā)生反應(yīng)，因?yàn)長OO$或TO$之間的抗壞血酸（維生素C_）和帶負(fù)電荷的十二烷基硫酸鈉頭組的靜電斥力阻止它到達(dá)膠束表面。然而，維生

36、素C可以減少走在散裝再生茶多酚到。據(jù)作者報(bào)道：茶多酚，EGCG和維生素C的氧化電位分別證明為0.26 [52]，0.23 [24]和0.04 [52]（飽和甘汞主場(chǎng)迎戰(zhàn)電極（SCE）），這些都是積極可行的氧化還原循環(huán)。總之，這項(xiàng)工作表明，綠茶的多酚混合物（吳氏），1 -維生素E（TOH）和L -抗壞血酸（VC）的具有顯著增強(qiáng)抗氧化功效比加時(shí)3抗氧化劑效果是單獨(dú)使用。它也證明了該抗氧化劑的協(xié)同作用是由于TOH回收GOH和利用VC回收GOH