復(fù)方中草藥和果寡糖對羅非魚免疫性能的影響.pdf

1、本論文研究了兩種免疫增強劑(復(fù)方中草藥制劑和果寡糖)對尼羅羅非魚血液免疫酶類活性及其在脅迫條件下血液化學(xué)物質(zhì)變化的影響。研究分為三部分:
　　第一部分:復(fù)方中草藥對尼羅羅非魚血液非特異性免疫功能的影響
　　本實驗研究了在飼料中添加一種以魚腥草為主要成分的復(fù)方中草藥制劑對尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)血液非特異性免疫功能(或指標)的影響。將魚腥草、黃芩、板藍根、連翹、金銀花等10種中草藥按一定比例充分

2、粉碎后混勻制成以魚腥草為主要成分的復(fù)方中草藥制劑,按質(zhì)量分數(shù)0％(對照組)、1%(A組)、3%(B組)、6%(C組)分別添加到基礎(chǔ)飼料中投喂尼羅羅非魚(體質(zhì)量54±0.32g),共進行為期12周的飼養(yǎng)試驗。其中在第4、8、12周測定其血清免疫指標,并在第12周進行采樣測定全血免疫指標。試驗結(jié)果表明:從第8周開始,B組尼羅羅非魚血清丙二醛(MDA)含量降低極為顯著(P<0.01),而C組中尼羅羅非魚血清溶菌酶(LSZ)活力顯著提高(P<0

3、.05),超氧化物歧化酶(SOD)活力、一氧化氮(NO)含量提高極為顯著(P<0.01),并且MDA含量極顯著的降低(P<0.01)。至第12周,B組中尼羅羅非魚血清SOD活力和血細胞呼吸爆發(fā)活性極顯著提高(P<0.01),血清LSZ活力、NO含量顯著提高(P<0.05);C組中尼羅羅非魚血清SOD活力、NO含量、血清 LSZ活力、吞噬百分比、吞噬指數(shù)、呼吸爆發(fā)活力均極顯著提高(P<0.01),而MDA含量則降低極為顯著(P<0.01)

4、。結(jié)果表明:在飼料中添加3%和6%質(zhì)量分數(shù)的以魚腥草為主要成分的復(fù)方中草藥制劑均能增強尼羅羅非魚的免疫力,其中以添加6%的質(zhì)量分數(shù)的效果最好。
　　第二部分:果寡糖對尼羅羅非魚非特異性免疫及抗病力的影響
　　上述研究結(jié)果表明在基礎(chǔ)飼料中添加6%的復(fù)方中草藥可以有效提高尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)血液非特異性免疫功能。本實驗?zāi)康氖茄芯吭诤袕?fù)方中草藥的飼料中添加果寡糖(FOS)對尼羅羅非魚非特異性免

5、疫及抗病力的影響。分別在飼料中添加0(對照組)、1(A試驗組)、3(B試驗組)和5(C試驗組)g/kg的果寡糖投喂尼羅羅非魚(體質(zhì)量3±2.43g),共進行為期90d的飼養(yǎng)試驗。在第30、60、90d分別取樣測定其血清免疫指標及在試驗結(jié)束時用無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)對其進行攻毒處理。試驗結(jié)果表明:A組尼羅羅非魚血清溶菌酶(LSZ)活力和血清過氧化氫酶(CAT)活力均從第60d開始與對照組相比差異顯著

6、(P<0.05),并分別于第60d和第90d達到最大值;其血清超氧化物歧化酶(SOD)活力在第30d后開始顯著高于對照組(P<0.05),在第90d達到峰值;A組血清丙二醛(MDA)含量顯著低于對照組(P<0.05),并在第90d達到最低值;A組堿性磷酸酶(AKP)活性和血清中一氧化氮(NO)的含量與對照組相比差異不顯著(P>0.05)。B組尼羅羅非魚血清LSZ活力和堿性磷酸酶(AKP)在第60d后顯著高于對照組(P<0.05),分別于

7、第60d和第90d達到最大值;其血清SOD酶活力和過氧化氫酶(CAT)活力均從第30d開始顯著高于對照組(P<0.05),分別于第60d和第90d達到最大值;B組血清MDA含量顯著低于對照組(P<0.05),在第60d達到最低值;B組中血液NO含量與對照組差異不顯著(P>0.05)。B組血清SOD活力和AKP活力第60d時與A組差異顯著(P<0.05),而B組CAT活力在第90天時與A組差異顯著(P<0.05)。C組的血清溶菌酶活力、血

8、清SOD活力、血清AKP活力、血清MDA含量、血清CAT活力和血清NO含量與對照組相比在各時間點均無顯著差異(P>0.05)。用無乳鏈球菌強毒株進行腹腔注射攻毒,結(jié)果表明:A組和 B組的免疫保護率分別為55.81%和67.44%,可以顯著提高尼羅羅非魚對無乳鏈球菌的抵抗能力,降低其死亡率;C組的免疫保護率為6.9%,有輕微保護作用。
　　第三部分:兩種環(huán)境脅迫下果寡糖對羅非魚血液中皮質(zhì)醇及血糖的影響
　　上述研究結(jié)果表明在含

9、有6%復(fù)方中草藥的飼料中添加1～3g/kg的果寡糖可以有效提高尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)血液非特異性免疫功能。本實驗?zāi)康氖茄芯吭趦煞N環(huán)境脅迫條件下果寡糖(FOS)對羅非魚血液中皮質(zhì)醇(COR)及血糖(GLU)的影響。分別在含有6%的中草藥飼料中添加0 g/kg(對照組)、1 g/kg(A試驗組)、3 g/kg(B試驗組)和5 g/kg(C試驗組)的果寡糖投喂尼羅羅非魚,進行為期90d的飼養(yǎng)試驗。飼養(yǎng)試驗結(jié)束

10、后,一部分試驗魚進行致病菌脅迫試驗:每組取25尾魚,兩個重復(fù),對試驗魚腹腔注射0.1mL濃度為1.0×106 cfu/mL的無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae),分別在0h、3h、12h、24h、36h、48h取血樣分析其血液中皮質(zhì)醇及血糖含量。另一組試驗魚進行擁擠脅迫試驗:每組取一定量的魚,進行連續(xù)48h的擁擠脅迫(35g/L)試驗,分別在0h、3h、12h、24h、36h、48h取血樣分析其血液中皮質(zhì)醇及血

11、糖含量。致病菌脅迫試驗結(jié)果表明:各個組的血液皮質(zhì)醇及血糖含量在脅迫后前24h內(nèi)顯著提高,其中A組和B組與對照組相比差異顯著,C組與對照組差異不明顯;在第24h各個組都達到了最大值,但隨著時間的推移各組中COR及GLU含量逐漸下降,一段時間后恢復(fù)至與對照水平保持穩(wěn)定。擁擠脅迫試驗結(jié)果表明:在試驗前,各組魚血液中皮質(zhì)醇及血糖含量無明顯差異,試驗后3h,所有組魚的血液皮質(zhì)醇及血糖含量都顯著上升,上升趨勢持續(xù)至第12h和第24h,其中A組和B組