水稻工程核不育系創(chuàng)制途徑的探究.pdf

1、水稻是我國單產(chǎn)最高、播種面積最大的糧食作物，雜交水稻被稱為我國“第五大發(fā)明”，水稻雜種優(yōu)勢利用是構(gòu)建我國糧食安全生產(chǎn)體系的核心技術(shù)之一。“三系法”和“兩系法”是當前水稻雜種優(yōu)勢利用的主要途徑。但由于親本利用資源和制種安全性的原因，限制了這兩種途徑全面開發(fā)水稻雜種優(yōu)勢的潛力。普通核不育具有來源廣泛、無恢保關(guān)系限制、敗育徹底且育性不受環(huán)境影響、單隱性基因控制易于轉(zhuǎn)育等特點，是理想的雜種優(yōu)勢利用資源，但由于其繁殖問題而不能應(yīng)用于生產(chǎn)。水稻工程

2、核不育體系的創(chuàng)制研究，擬通過基因工程手段解決普通核不育的繁殖問題，建設(shè)“第三代雜交水稻”應(yīng)用體系。
　　本研究為水稻工程核不育體系創(chuàng)制途徑的前期探究工作，為水稻工程核不育體系的建立奠定基礎(chǔ)。本研究從水稻工程不育系的材料創(chuàng)制、元件創(chuàng)造和方法研究三方面展開:構(gòu)建了水稻工程不育系中間父本功能載體——將水稻胚乳特異性啟動子PGt(1)驅(qū)動加強型綠色熒光蛋白的色選表達盒與水稻隱性不育突變體tdr的育性恢復(fù)基因表達盒緊密連鎖，構(gòu)建雙元表達載體

3、GET130，并進行遺傳轉(zhuǎn)化，獲得了29株轉(zhuǎn)基因陽性植株，創(chuàng)制了新的水稻種質(zhì)資源;從頭構(gòu)建了來源煙草、擬南芥等5個物種包含11個片段的三順反正原核表達葉綠體遺傳轉(zhuǎn)化載體，并通過了原核表達驗證，在大腸桿菌中獲得了綠色熒光表達，為驗證細胞核基因在質(zhì)體中表達的育性恢復(fù)情況研究以及水稻工程核不育系葉綠體途徑的探索創(chuàng)造了基礎(chǔ)元件;為降低水稻工程不育系創(chuàng)制過程中常出現(xiàn)的多基因片段載體構(gòu)建的難度，建立了新的高效快捷載體構(gòu)建方法——重組融合PCR法，此