水稻穗腐病鐮刀菌及相關(guān)毒素研究.pdf

1、近年來，全國(guó)各稻區(qū)普遍發(fā)生一種危害稻穗和谷粒的病害----水稻穗腐病(Ricespikelet rot disease，RSRD)。該病由多種真菌引起，造成稻米腐壞、變色、畸形，致使結(jié)實(shí)率降低或不實(shí)，嚴(yán)重影響產(chǎn)量。還由于病原菌產(chǎn)生色素和毒素而改變稻谷外觀，降低稻米品質(zhì)。本文采集了浙江省杭州市和嘉興市兩地的水稻穗腐病樣本，共鑒定出5種病原鐮刀菌，并對(duì)各種鐮刀菌的生物學(xué)特性、脂肪酸組成和含量、致病力、產(chǎn)毒條件和產(chǎn)毒能力、粗毒素毒性、田間防治

2、進(jìn)行了研究。獲得主要研究結(jié)果如下：
　　 ⑴水稻穗腐病鐮刀菌的分離和鑒定。共分離到216株鐮刀菌，利用培養(yǎng)性狀、形態(tài)特征觀察和分子生物學(xué)手段共鑒定到5個(gè)鐮刀菌種，包括:層出鐮刀菌(F.proliferatum)、藤倉鐮刀菌(F.fujikuroi)、擬輪枝鐮刀菌(F.verticillioidess)、尖孢鐮刀菌（F.oxysporum）和禾谷鐮刀菌（F.graminearum）。其中，層出鐮刀菌(F.proliferatum)

3、137株，占63.4％;藤倉鐮刀菌（F.fujikuroi）50株，占23.1％;擬輪枝鐮刀菌（F.verticillioidess）21株，占9.7％;尖孢鐮刀菌（F.oxysporum）5株占2.3％;禾谷鐮刀菌（F.graminearum）3株，占1.4％。通過Koch法則驗(yàn)證，各種鐮刀菌均能成功接種稻穗，使稻穗感染穗腐病。
　　 ⑵病原鐮刀菌生物學(xué)特性。禾谷鐮刀菌菌最適生長(zhǎng)溫度是25℃，最適pH為6，最佳碳源是葡萄糖、蔗

4、糖，最佳氮源是尿素、硝酸鈉;尖孢鐮刀菌最適生長(zhǎng)溫度是25℃，最適pH為6，最佳碳源是葡萄糖、蔗糖，最佳氮源是硝酸鈉;層出鐮刀菌最適生長(zhǎng)溫度是25℃，最適pH為6，最佳碳源是蔗糖、葡萄糖，最佳氮源是硝酸鈉、亞硝酸鈉;藤倉鐮刀菌最適生長(zhǎng)溫度是25℃，最適pH為8，最佳碳源是葡萄糖，最佳氮源是硝酸鈉;擬輪枝鐮刀菌最適生長(zhǎng)溫度是25℃，最適pH為8，最佳碳源是蔗糖、葡糖糖、果糖，最佳氮源是硝酸鈉、尿素。
　　 ⑶病原鐮刀菌脂肪酸分析。應(yīng)

5、用Sherlock脂肪酸鑒定系統(tǒng)，總共檢測(cè)出36種脂肪酸。Sum In Feature3、16:00、Sum In Feature5、18(:)1 w9c和18(:)00為主要脂肪酸。5種鐮刀菌的脂肪酸組成及含量有一定的差異性，但不顯著。因此，無法利用脂肪酸組成特征十分準(zhǔn)確的將不同鐮刀菌進(jìn)行分類。
　　 ⑷病原鐮刀菌致病力。通過病原菌孢子懸浮液接種水稻穗部試驗(yàn)，證明藤倉鐮刀菌的致病力最強(qiáng)，擬輪枝鐮刀菌、層出鐮刀菌、禾谷鐮刀菌次之

6、，尖孢鐮刀菌最弱。
　　 ⑸病原鐮刀菌產(chǎn)毒能力和粗毒素毒性。禾谷鐮刀菌、尖孢鐮刀菌和層出鐮刀菌的最佳產(chǎn)毒培養(yǎng)基為Richard培養(yǎng)基，最佳產(chǎn)毒溫度為25℃，最佳產(chǎn)毒pH為6，最佳產(chǎn)毒培養(yǎng)時(shí)間為15天;藤倉鐮刀菌和擬輪枝鐮刀菌的最佳產(chǎn)毒培養(yǎng)基為Richard和PD培養(yǎng)基，最佳產(chǎn)毒溫度為25℃，最佳產(chǎn)毒pH為8，最佳產(chǎn)毒培養(yǎng)時(shí)間為15天。利用活性炭吸附法提取了各種鐮刀菌的粗毒素，并測(cè)試了粗毒素的毒性。藤倉鐮刀菌粗毒素對(duì)水稻的毒害作用

7、最強(qiáng)，尖孢鐮刀菌最弱。
　　 ⑹利用ELLISA技術(shù)測(cè)定了粗毒素中伏馬菌素(fumonisin)的含量。其中，藤倉鐮刀菌粗毒素中伏馬菌素含量最高，為5379.03 ppm;擬輪枝鐮刀菌次之，含量為638.62ppm;之后是禾谷鐮刀菌禾谷鐮刀菌，含量為139.39 ppm;層出鐮刀菌含量為13.87ppm;最后是尖孢鐮刀菌，含量?jī)H為2.16 ppm。
　　 ⑺水稻穗腐病田間防治。用20％異噻菌胺懸浮劑(200 g a.i.