水稻OsMED18基因的克隆與功能分析.pdf

1、水稻水稻OsMED18基因的克隆與功能分析基因的克隆與功能分析陳立陳立二○一四年二○一四年五月碩士學(xué)位碩士學(xué)位論文I水稻OsMED18基因的克隆與功能分析摘要水稻是世界上最重要的糧食作物之一，其產(chǎn)量的高低與其花的發(fā)育過程密切相關(guān)因此研究水稻穎花發(fā)育的分子機(jī)理已成為現(xiàn)代生命科學(xué)研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)之一。近年來，隨著對雙子葉植物擬南芥花發(fā)育研究的深入，其成花誘導(dǎo)、花器官形成以及分化的分子遺傳學(xué)機(jī)制有了較好的認(rèn)識。但是，對單子葉植物水稻的花發(fā)育過

2、程的分子機(jī)制認(rèn)識還相對滯后。轉(zhuǎn)錄中介體復(fù)合物（Mediatcomplex，MED）是一種大分子蛋白復(fù)合物，在真核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中，其基因的時(shí)空表達(dá)控制著植物的生長發(fā)育。在模式植物擬南芥中AtMED18在分生組織中表達(dá)，抑制FT表達(dá)。其突變體med18植株開花推遲，花器官發(fā)育異常，結(jié)實(shí)率低下。若能明確水稻中的OsMED18基因的表達(dá)情況，將具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本研究利用同源克隆從水稻農(nóng)墾58中擴(kuò)增了OsMED18基因全長片段，利用過表達(dá)與

3、RNAi干擾方法，研究OsMED18在水稻中的功能，通過半定量RTPCR與原位雜交，分析了OsMED18的時(shí)空表達(dá)模式。主要結(jié)果是：1.通過克隆OsMED18全長片段，構(gòu)建了OsMED18過表達(dá)與干擾載體。2.通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化，將過表達(dá)與干擾載體轉(zhuǎn)入到水稻農(nóng)墾58中。3.經(jīng)PCR檢測，共獲得18株陽性轉(zhuǎn)基因苗，其中有10株陽性RNAi干擾植株，8株陽性過表達(dá)轉(zhuǎn)基因苗。4.通過對轉(zhuǎn)基因植株后代進(jìn)行表型分析和掃描電鏡實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其與對照相比，轉(zhuǎn)