雞MHC基因多態(tài)性及其與抗馬立克氏病的相關(guān)性研究.pdf

1、馬立克氏病(Marek's Disease，MD)是由具有高度傳染性、致瘤性的皰疹病毒科馬立克氏病毒引起的一種細(xì)胞結(jié)合性雞淋巴組織增生性免疫抑制性傳染病，對(duì)養(yǎng)禽業(yè)危害極大。
　　雞的主要組織相容性復(fù)合體（Major Histocompatibility Complex，MHC）基因是由一組緊密連鎖且高度多態(tài)的基因座組成的，參與體內(nèi)外抗原呈遞的遺傳區(qū)域，在動(dòng)物的免疫應(yīng)答、免疫調(diào)控中扮演著重要角色。雞的干擾素-γ（IFN-γ）基因是由

2、感染病毒的細(xì)胞釋放的一種細(xì)胞因子，干擾其他細(xì)胞病毒復(fù)制，對(duì)于機(jī)體的腫瘤發(fā)生、移植排斥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)及免疫系統(tǒng)的平衡至關(guān)重要，IFN-γ基因具有誘導(dǎo)某些腫瘤細(xì)胞表達(dá)MHCⅠ類和MHCⅡ類抗原的作用，可促進(jìn)此抗原誘導(dǎo)的自身T細(xì)胞數(shù)量的增加和CTL對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。家禽IFN-γ基因的表達(dá)量與其對(duì)馬立克氏病的抗性密切相關(guān)。MHC基因的不同基因型對(duì)MD的抗性不同，主要表現(xiàn)在其對(duì)IFN-γ等細(xì)胞因子的表達(dá)調(diào)控程度的不同等方面。
　　本文

3、對(duì)壽光雞(SG)、濟(jì)寧百日雞(JB)、汶上蘆花雞(WL)、SPF白來(lái)航雞(SPF)的MHC基因進(jìn)行了遺傳多樣性分析，根據(jù)位于MHCⅣ區(qū)域的LEI-0258的微衛(wèi)星位點(diǎn)，通過(guò)熒光PCR檢測(cè)技術(shù)，共篩選到32種等位基因，四種雞群的等位基因數(shù)依次分別是9個(gè)、10個(gè)、8個(gè)和5個(gè);其有效等位基因數(shù)依次分別是4.2050、5.2478、2.3346和1.8987;其期望雜合度依次分別是0.7756、0.7232、0.5814和0.4814。

4、　　為進(jìn)一步探索不同品種雞群MHC的特異基因型對(duì)MD的抗性差異，分別對(duì)壽光雞、濟(jì)寧百日雞、汶上蘆花雞和SPF白來(lái)航雞進(jìn)行了人工感染試驗(yàn)，根據(jù)腫瘤發(fā)生率與死亡率對(duì)壽光雞、濟(jì)寧百日雞、汶上蘆花雞和SPF白來(lái)航雞進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn):SG的主要基因型是SG-B，MD抗性基因型是SG-C;以SG-A型雞個(gè)體的死亡率最高，其抗病性相對(duì)最低;JB的主要基因型是B74，MD抗性基因型是JB-A，對(duì)MD抗性最差的是NYCAU-46型;WL的主要基因

5、型是B74，MD抗性基因型是NYCAU-50，對(duì)MD抗性最差的是NYCAU-33型;SPF雞群的主要基因型是NYCAU-17，MD抗性基因型是B74，易感的是NYCAU-46型和NYCAU-51型。通過(guò)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)壽光雞的MD抗性基因型、MD易感基因型與主要基因型的IFN-γ基因的表達(dá)量差異及其抗性相關(guān)性進(jìn)行了檢測(cè)，分析結(jié)果表明，MD抗性基因型的IFN-γ基因的mRNA含量要高于MD易感基因型，但MD抗性基因型、MD易感基因型與

6、主要基因型三者之間差異并未達(dá)到顯著水平(p＞0.05);同時(shí)，對(duì)不同攻毒時(shí)間MHC主要基因型個(gè)體的IFN-γ基因的mRNA表達(dá)量進(jìn)行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn):7d攻毒組在脾臟中的表達(dá)水平顯著高于1d攻毒組(p＜0.05)，說(shuō)明MD不同感染時(shí)間對(duì)雞個(gè)體的抗性表達(dá)有顯著影響。
　　綜合分析以上研究結(jié)果，說(shuō)明壽光雞、濟(jì)寧百日雞、汶上蘆花雞和SPF白來(lái)航雞的遺傳多樣性較為豐富;發(fā)現(xiàn)了四個(gè)雞群的MD的抗性基因型與MD易感基因型;檢測(cè)了壽光雞抗性、易