應(yīng)激通過(guò)FATP1影響肉雞骨骼肌脂肪沉積的作用機(jī)制.pdf

1、FATP1作為脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，在機(jī)體脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)攝取方面發(fā)揮著重要作用。本論文從"脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)影響脂肪沉積"的角度出發(fā)，利用活體和離體試驗(yàn)，在核酸、蛋白、細(xì)胞、組織等水平系統(tǒng)研究了FATP1在糖皮質(zhì)激素(DEX)調(diào)控肉雞骨骼肌脂肪異位沉積中的作用及機(jī)制。
　　1.FATP1在應(yīng)激肉雞骨骼肌脂肪代謝中的作用。處理組根據(jù)肉雞體重注射DEX。結(jié)果表明，DEX處理會(huì)導(dǎo)致肉雞肌肉組織FATP1的mRNA水平升高，脂肪沉積量增多，血液中VLDL和

2、INS含量顯著升高。腿肌糖皮質(zhì)激素受體(GR)、脂聯(lián)素受體(ADPNR)、過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)的mRNA水平也升高。由這些結(jié)果推測(cè)，DEX調(diào)控骨骼肌的FATP1促進(jìn)脂肪攝取可能是通過(guò)GR-ADPNR-PPARα通路實(shí)現(xiàn)的。
　　2.脂肪水平對(duì)糖皮質(zhì)激素調(diào)控FATP1的影響。分別用不同脂肪水平的日糧飼喂肉雞，35日齡時(shí)用DEX處理。試驗(yàn)結(jié)果表明，低脂日糧飼喂肉雞組用DEX處理后肌肉組織TG沉積量增多，但高脂日糧

3、飼喂肉雞組用DEX處理后各組織脂肪沉積量無(wú)顯著變化；低脂日糧飼喂肉雞并用DEX處理后，肉雞肌肉組織GR、ADPNR、PPARα和FATP1的mRNA水平與組織TG沉積量有相同變化趨勢(shì)。但是，這種趨勢(shì)在飼喂高脂日糧并用DEX處理后的肉雞腿肌上表現(xiàn)不明顯。由此可以推出，不同日糧處理下DEX對(duì)肌肉GR-ADPNR-PPARα-FAPT1通路基因水平的影響并不一致。
　　3.脂肪酸類(lèi)型對(duì)糖皮質(zhì)激素調(diào)控FATP1的影響。利用添加了相同濃度油

4、酸和棕櫚酸的條件培養(yǎng)基分別培養(yǎng)成肌細(xì)胞，細(xì)胞分化至80％左右分別用不同濃度的DEX處理。結(jié)果表明，用飽和脂肪酸培養(yǎng)的細(xì)胞用DEX處理后，細(xì)胞脂肪沉積增多，而不飽和脂肪酸培養(yǎng)的細(xì)胞用DEX處理后細(xì)胞脂肪沉積量有所下降；檢測(cè)細(xì)胞AKT蛋白的磷酸化水平，結(jié)果顯示DEX處理對(duì)其無(wú)顯著影響；油酸培養(yǎng)細(xì)胞DEX處理后檢測(cè)到相關(guān)基因的mRNA水平無(wú)顯著差異，而棕櫚酸培養(yǎng)的成肌細(xì)胞用DEX處理后檢測(cè)到GR、ADPNR、PPARα和FATP1的mRNA水

5、平變化趨勢(shì)與細(xì)胞中TG沉積量的變化趨勢(shì)基本一致。這說(shuō)明不同脂肪酸類(lèi)型會(huì)影響DEX對(duì)FATP1的調(diào)控作用，進(jìn)而影響細(xì)胞TG的沉積量。
　　4.糖皮質(zhì)激素通過(guò)FATP1調(diào)控成肌細(xì)胞脂肪沉積的途徑。單獨(dú)DEX處理成肌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)FATP1和PPARα的mRNA水平無(wú)顯著變化；利用添加了相同濃度油酸和棕櫚酸的條件培養(yǎng)基分別培養(yǎng)成肌細(xì)胞，細(xì)胞分化至80%左右分別利用特異性抑制劑RU486、U0126、GW6471特異性抑制GR、ERK2/MA

6、PK和PPARα在細(xì)胞中的作用，并用DEX處理。發(fā)現(xiàn)油酸培養(yǎng)的成肌細(xì)胞用抑制劑和DEX處理后脂肪酸攝取無(wú)顯著差異，棕櫚酸培養(yǎng)的成肌細(xì)胞用抑制劑處理后脂肪酸攝取能力下降。這說(shuō)明DEX會(huì)通過(guò)GR-PPARα途徑或ERK2/MAPK-PPARα途徑調(diào)控細(xì)胞對(duì)飽和脂肪酸的攝取。
　　綜上所述，糖皮質(zhì)激素可能通過(guò)升高FATP1的mRNA水平促進(jìn)細(xì)胞對(duì)脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)攝取，進(jìn)而導(dǎo)致脂肪沉積。日糧不同脂肪水平會(huì)影響到糖皮質(zhì)激素通過(guò)FATP1對(duì)肉雞骨